中藥穴位敷貼療法對哮喘大鼠炎癥反應(yīng)的影響

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1、中藥穴位敷貼療法對哮喘大鼠炎癥反應(yīng)的影響【摘要】【目的】觀察穴位敷貼療法對哮喘大鼠炎癥反應(yīng)的影響?！痉椒ā窟x用Wistar大鼠33只隨機(jī)分為正常組、模型組、地塞米松組及穴位貼藥組；模型組以卵蛋白致敏并誘發(fā)哮喘模型，腹腔注射生理鹽水，同時(shí)背部給予空白對照藥物敷貼；地塞米松組在哮喘大鼠霧化后予以腹腔注射1mg/kg地塞米松，同時(shí)在背部備皮予以空白對照藥物敷貼；穴位貼藥組在哮喘大鼠霧化后予以腹腔注射1mg/kg的生理鹽水，同時(shí)在背部備皮予以治療藥物敷貼，穴位取大椎、肺俞、脾俞、腎俞穴。療程結(jié)束24h內(nèi)取各組大鼠肺組織觀察其炎癥情況，并取外周血采用酶聯(lián)免疫吸

2、附（ELISA）法比較各組大鼠白細(xì)胞介素4（IL4）、干擾素γ（IFNγ）的含量?！窘Y(jié)果】模型組大鼠與正常組比較，肺組織中可見嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）、淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤增加（P＜0.01）。地塞米松組與模型組比較嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤顯著降低（P＜0.05或P＜0.01）。穴位貼藥組對嗜酸性粒細(xì)胞浸潤也有顯著抑制作用（P＜0.01），但對于淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤無顯著抑制作用（P＞0.05）。模型組大鼠外周血IL4含量較正常組顯著增加（P＜0.01），而IFNγ含量較正常組顯著降低（P＜0.01），地塞米松組及穴位貼藥組中大

3、鼠外周血IL4含量較模型組降低（P＜0.01），但地塞米松組大鼠外周血IFNγ含量與模型組比較無顯著性差異（P＞0.05），而穴位貼藥組大鼠外周血IFNγ10含量顯著高于模型組（P＜0.01），與正常組比較無顯著性差異（P＞0.05）?！窘Y(jié)論】中藥穴位敷貼治療哮喘的作用可能與其能抑制肺組織嗜酸性粒細(xì)胞浸潤，降低外周血IL4含量，升高IFNγ含量有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】哮喘/穴位療法；肺組織/病理學(xué)；疾病模型，動(dòng)物；穴，大椎；穴，肺俞；穴，脾俞；穴，腎俞中藥穴位敷貼療法是中醫(yī)外治法中一種常用的治療方法，它是通過藥物刺激人體局部穴位并借助藥物的藥力和熱

4、力而達(dá)到溫通經(jīng)絡(luò)、行氣化痰、散寒除濕的作用。臨床上多用于治療支氣管哮喘、慢性支氣管炎等慢性呼吸系統(tǒng)疾病［1］。本研究觀察了穴位敷貼療法對支氣管哮喘模型大鼠外周血白細(xì)胞介素4（IL4）、干擾素γ（IFNγ）含量以及肺組織中嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）、淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。1材料與方法1.1動(dòng)物SPF級Wistar大鼠，雄性，共33只，體質(zhì)量200～250g，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號：0016837。1.2試劑及儀器10卵蛋白(OVA)購于美國Sigma公司；地塞米松購于鄭州卓峰制藥廠（批號：0604213）；穴位貼

5、藥制劑（批號：20060815）及空白對照藥物制劑（批號：20060829）均由廣東省中醫(yī)藥研究所制備并提供；酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒由深圳海輝試劑公司提供；超聲霧化器為汕頭市粵華醫(yī)療器械廠產(chǎn)品；CH2型顯微鏡為日本OLYMPUS產(chǎn)品；800型酶標(biāo)儀為美國寶特公司產(chǎn)品。1.3哮喘模型復(fù)制［2］造模大鼠于第1天及第7天腹腔注射100g/LOVA1mL致敏，2周后將大鼠放入霧化箱中，用20g/L卵蛋白25mL，在最大霧化程度和最大風(fēng)速的條件下霧化40min，每天1次，連續(xù)霧化2周，在霧化期間及結(jié)束后觀察大鼠反應(yīng)，以出現(xiàn)煩躁不安，呼吸頻率加快，節(jié)

6、律性點(diǎn)頭運(yùn)動(dòng)為陽性反應(yīng)，提示造模成功。1.4藥物制備治療藥物：取胡椒、白芥子、細(xì)辛、白芷、半楓荷各等份磨至100目細(xì)粉后混合。取生姜10kg，溫度50℃，壓力14.4mPa，超臨界CO2萃取，時(shí)間2h，得姜油約90mL，備用。另取7kg生姜，榨汁，得生姜汁，加熱煮沸10min，冷卻后冰箱保存?zhèn)溆谩Ｈ∷幏奂尤脒m量姜油混合，并加蒸餾水調(diào)節(jié)至合適的軟硬度，分裝玻璃瓶中，經(jīng)滅菌、檢查、貼簽,成品呈棕黃色，于低溫(4℃～10℃)狀態(tài)下保存。用時(shí)以特定容器壓成直徑1.2cm、厚0.25cm的圓柱形小藥餅，蘸姜汁用無菌敷料固定在穴位上?？瞻讓φ账幬铮喝〖t米、黑米、

7、玉米干炒處理，分別粉碎成100目細(xì)粉后混合,拌入姜油(取生姜3kg，制備方法同上)，加蒸餾水調(diào)節(jié)至合適的軟硬度,分裝玻璃瓶中,經(jīng)滅菌、檢查、貼簽，成品呈棕黃色。保存及用法同治療藥物。101.5實(shí)驗(yàn)分組將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為4組：正常組用生理鹽水代替OVA致敏與誘發(fā)；模型組造模霧化后腹腔注射生理鹽水，同時(shí)背部給予空白對照藥物敷貼；地塞米松組造模2周后開始腹腔注射1mg/kg地塞米松，同時(shí)在背部備皮予以空白對照藥物敷貼；穴位貼藥組造模2周后開始腹腔注射1mg/kg的生理鹽水，同時(shí)在背部備皮予以治療藥物敷貼。貼藥的部位位于大鼠下頸項(xiàng)部至上背部處(相當(dāng)于人體的大

8、椎、肺俞、脾俞、腎俞穴，取穴方法按照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［3］)，保留4h后除去，每日1次，7次為1療程，治療結(jié)束