全自動染色機在常規(guī)he染色中的應(yīng)用體會

全自動染色機在常規(guī)he染色中的應(yīng)用體會

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1、全自動染色機在常規(guī)HE染色中的應(yīng)用體會【關(guān)鍵詞】HE染色;全自動染色機;手工染色  近年來,隨著病理學(xué)檢驗技術(shù)的快速發(fā)展,全自動組織切片染色機正以其卓越的性能與良好的切片處理效果。特別是其穩(wěn)定、高效,逐漸被各大醫(yī)院及相關(guān)實驗室所接受并使用。逐步替代目前的人工染色。我科自2004年中將該染色機應(yīng)用于常規(guī)HE染色,切片的處理效率明顯提高,染色效果穩(wěn)定,染色質(zhì)量顯著改觀。在使用過程中對染色程序及染色劑的選擇與更換進行比較并選用最適于本科室的方案,進一步提高了染色效率及染色質(zhì)量?! ?材料與方法  1.1儀器與設(shè)備英國ShandonVaristainRGemini自動染片機及附帶

2、設(shè)備?! ?.2試劑改良Lily’s蘇木素,0.5%水溶性伊紅,80%乙醇,95%乙醇,無水乙醇,二甲苯,1%鹽酸乙醇,Sottc促藍液,苯酚(石碳酸)二甲苯混合液。  1.3染色過程:5  1.3.1常規(guī)石蠟切片HE染色[1]石蠟切片裱貼在載玻片上,在載玻片的磨砂面標出組織塊的編號,放入染色機配套的玻片籃中并在65℃~70℃恒溫烤箱中烤片15min后置入染色機中,見表1?! ”?常規(guī)石蠟切片HE染色步驟(略)  程序完成后自二甲苯中取出切片,去掉玻皮籃手柄后置入自動封片機中,中性樹膠封固?! ?.3.2脫落細胞學(xué)涂片HE染色涂片經(jīng)95%乙醇固定后放在玻片籃中置入染色機中

3、,按下表步驟處理。  表2脫落細胞學(xué)涂片HE染色步驟(略)  程序完成后自二甲苯中取出切片,去掉玻片籃手柄后置入自動封片機中,中性樹膠封固?! ?結(jié)果  石蠟切片及脫落細胞學(xué)涂片HE染色鮮艷、均勻,胞核、胞質(zhì)著色良好、對比清晰?! ?體會5  在2年多來應(yīng)用自動染色機的過程中,通過摸索和實踐,得出如下幾點體會?! ?.1傳統(tǒng)的染色方法多為手工染色,費時、費力,尤其在大的綜合性醫(yī)院中,工作量大,此缺點尤為突出,而該自動染色機有以下的優(yōu)點,高效率:可進行大批量玻片的染色,每個玻片籃20張載玻片,每張載玻片上可裱貼兩個組織塊切片,一次最大量可放進19個玻片籃。這在制作教學(xué)玻片或

4、讀片用玻片時尤為方便;穩(wěn)定:使用相同的染色程序,同一批次的組織切片,HE染色效果穩(wěn)定;不同的人操作也不會出現(xiàn)明顯的波動;省時省力:可同時編制多個染色程序,石蠟切片與脫落細胞學(xué)涂片的HE染色可同時進行。玻片在進入染色機程序后,操作人員可進行別的工作,可節(jié)省人力;安全:使用密封式鉛酸充電池,電后仍可工作40min,保證染色工作的完成;而且在相對密閉的空間中進行染色工作,減少了揮發(fā)性化學(xué)試劑對工作環(huán)境的污染。  3.2使用Socct促藍液對細胞胞進行藍化,可縮短流水沖洗藍化的時間;在0.5%的伊紅液中加入一滴冰醋酸,可促進伊紅的著色而且使顏色更為鮮艷,與蘇木精的藍色對比鮮明。使

5、用改良的Lily蘇木索染液,配制好后即可應(yīng)用,無需放置成熟?! ?.35在脫水透明的過程中,在最后一道無水乙醇與第一道二甲苯之間加入一道苯酚二甲苯混合液(比例為1:3)[2],因苯酚有吸水的作用,具有加強脫水的作用,使組織切片脫水更為充分,透明效果更好?! ?.4根據(jù)我科的具體情況對試劑進行定期的更換蘇木素每周更換,更換時不必全部更換,可用多層紗布過濾后,加入等量的新的液染后繼續(xù)使用。伊紅液每周進行過濾,可連續(xù)使用2周~3周。其他的液體每周進行更換。以保證脫蠟與脫水的充分和徹底?! ?.5儀器的保養(yǎng)機器外部每天進行常規(guī)的清潔,內(nèi)部染色缸之間的溢液應(yīng)及時用紗布或衛(wèi)生紙吸干后

6、用酒精擦拭。染色缸每2周倒出液體后用自來水沖洗,再用漂白液浸泡以清除染液在外部的殘留。沖洗干凈后晾干后使用。水槽每周清洗,水槽底部的進水孔要定時進行清理,以防堵塞;水槽的水每天要放出,以防有霉菌生長,影響染色質(zhì)量?!緟⒖嘉墨I】 ?。?]孫淑芬,馬福成,李江,等.染色的基本原理、生物染料和蘇木精伊紅染色方法[M].見:王伯沄,李玉松,黃高升,等.病理學(xué)技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:130134. ?。?]5張哲,陳輝.實用病理組織染色技術(shù)[M].沈陽:遼寧科學(xué)技術(shù)出版社,1988:3242.5

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