強(qiáng)力霉素對人肺癌細(xì)胞系增殖及侵襲行為的影響

《強(qiáng)力霉素對人肺癌細(xì)胞系增殖及侵襲行為的影響》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、強(qiáng)力霉素對人肺癌細(xì)胞系增殖及侵襲行為的影響【摘要】目的探討強(qiáng)力霉素對人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞的增殖和體外侵襲能力及其基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)表達(dá)的影響。方法采用MTT比色法研究不同濃度強(qiáng)力霉素(2.5、5、10、20、50mg/L)對A549細(xì)胞增殖的影響，免疫組織化學(xué)方法和Millicell-pore小室法，研究不同濃度強(qiáng)力霉素(2.5、5、10、20mg/L)作用后，A549細(xì)胞MMP-2蛋白表達(dá)及其體外侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。結(jié)果10mg/L以上強(qiáng)力霉素可以抑制A549細(xì)胞增殖，5mg/L以上強(qiáng)力霉素可以抑制A549細(xì)胞中MMP-2蛋白的表達(dá)及體外侵襲。結(jié)論強(qiáng)

2、力霉素可以抑制A549細(xì)胞增殖及體外侵襲，其抑制A549細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移的作用與其抑制MMP-2的表達(dá)有關(guān)。【關(guān)鍵詞】肺癌基質(zhì)金屬蛋白酶強(qiáng)力霉素侵襲　　Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsofdoxycyclineontheproliferation,expressionofmatrixmetalloproteinase-2(MMP2)andtheinvasivenessoflungcancercarcinomacelllineA549invitro．MethodsMTTassaywasappliedtostudytheeffectso

3、fdoxycycline（2.5，5，10，20，50mg/L）ontheproliferationofA549.ImmunohistochemistrystainandmillicellporechamberwereusedtoinvestigatetheexpressionofMMP2andthe12invasiveabilityofdifferentconcentrationofdoxycycline（2.5，5，10，20mg/L）treatedA549cells．ResultsDoxycyclinemorethan10mg/Linhibitedthepr

4、oliferationofA549inanoseandtimedependentmanners.Doxycyclinemorethan5mg/LinhibitedtheexpressionofMMP2andinvasivenessnofA549.ConclusionDoxycyclinecaninhibittheproliferation,invasivenessandmetastasisofA549andthemechanismofwhichisrelatedtotheinhibitionofMMP2inA549cel1．　　Keywords:lungcancer

5、；matrixmetalloproteinase；doxycycline;invasiveness12　　肺癌是一種發(fā)病率及死亡率極高的惡性腫瘤，對人類健康的危害日益嚴(yán)重。盡管治療手段在不斷發(fā)展，肺癌患者的生存時間并沒有明顯延長。癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移是影響其療效的主要原因，因此，尋找有效手段干預(yù)癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移成為肺癌研究的一個重要方向。基質(zhì)金屬蛋白酶因參與了侵襲轉(zhuǎn)移的各個環(huán)節(jié)，故而成為腫瘤治療的一個重要靶標(biāo)。研究表明，在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中，MMPs不僅可降解細(xì)胞外基質(zhì)，而且可維持腫瘤微環(huán)境并促進(jìn)腫瘤生長［1］、調(diào)解細(xì)胞粘附［2］、能增強(qiáng)上皮細(xì)胞的運(yùn)動能力［3］，從而參與腫

6、瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。還有研究證實(shí)MMP-2、MMP-9和MT1-MMP等在血管形成過程中發(fā)揮重要作用［4］。細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)劑EMMPRIN可以通過刺激MMP和VEGF的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤血管形成和腫瘤生長［5］。而強(qiáng)力霉素除了具有廣譜的抗菌作用外，還有抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的功能［6-8］。本研究采用免疫組化、MTT及Millicell小室法，觀察強(qiáng)力霉素對人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)及腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移的影響,為強(qiáng)力霉素治療肺癌提供理論依據(jù)?！　?材料和方法　　1.1材料　　強(qiáng)力霉素、DMEM、MTT試劑、DMSO均購自Sigma公司；胎牛

7、血清購自康利達(dá)生物制品公司；胰酶、Millicell-pore購自美國Costar公司；SABC免疫組化試劑盒及抗MMP-2單抗購自武漢博思德公司；Matrigel為BectonDickinson公司產(chǎn)品。其余試劑均為國產(chǎn)分析純?！　?.2方法　　1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)：肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞由第四軍醫(yī)大學(xué)口腔生物教研室提供。細(xì)胞培養(yǎng)于DMEM培養(yǎng)液中(含100mL／L胎牛血清、100U／mL青霉素、100mg／mL鏈霉素)，在37℃體積分?jǐn)?shù)為5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。12　　1.2.2藥物對細(xì)胞增殖作用的測定：取對數(shù)生長期的A549細(xì)胞，用