第4次課 蛙神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)速度的測定

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1、第4次課蛙神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)速度的測定一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ㄒ唬?、掌握蛙坐骨神?jīng)-脛腓神經(jīng)標(biāo)本的制備方法。(二)、掌握引導(dǎo)神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位和測定其傳導(dǎo)速度的基本原理和方法。二相關(guān)知識(shí)(一)、興奮及興奮性的概念(二)、動(dòng)作電位的潛伏期、動(dòng)作電位時(shí)程和幅值1、動(dòng)作電位:各種可興奮細(xì)胞在受到刺激而興奮時(shí),可以在細(xì)胞膜靜息電位的基礎(chǔ)上發(fā)生一次短暫的,可向周圍擴(kuò)布的電位波動(dòng)。這種電位波動(dòng)稱為動(dòng)作電位。2、刺激偽跡:刺激偽跡是在電刺激的同時(shí),記錄電極所記錄到的一個(gè)電位變化。它在動(dòng)作電位之前出現(xiàn),而且會(huì)隨著刺激強(qiáng)度的增加而增大。偽跡是由于刺激電流沿神經(jīng)干表面的電解質(zhì)液體傳導(dǎo)到記錄電極下而

2、被引導(dǎo)、放大出來的電信號(hào)。由于電流的傳導(dǎo)速度接近光速,所以刺激偽跡也幾乎與刺激信號(hào)同時(shí)出現(xiàn)。偽跡可以作為刺激開始的時(shí)間標(biāo)記,用來觀察潛伏期的長短。(三)、動(dòng)作電位的傳導(dǎo)局部電流的形式三本次實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)(一)、細(xì)胞外記錄(二)、神經(jīng)干的動(dòng)作電位神經(jīng)干是由許多粗細(xì)不等的有髓和無髓神經(jīng)纖維組成的混合神經(jīng),故神經(jīng)干動(dòng)作電位與單根神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位不同,它是由許多神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位合成的一種復(fù)合電位。其傳導(dǎo)速度與組成該神經(jīng)干的主要神經(jīng)纖維有關(guān),蛙類坐骨神經(jīng)干中以Aα類纖維為主,傳導(dǎo)速度大約為35~40m/s,它并不能代表組成該神經(jīng)干的每一單個(gè)神經(jīng)纖維的傳導(dǎo)速度,而是主要代表了Aα類神經(jīng)纖

3、維的傳導(dǎo)速度。神經(jīng)干動(dòng)作電位是由多根神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位復(fù)合而成。對(duì)于每根神經(jīng)纖維其興奮性都不同,在一定范圍內(nèi),較小的刺激能引起興奮較高的少數(shù)神經(jīng)纖維興奮,所以動(dòng)作電位的幅度較小;隨著強(qiáng)度增加,能興奮的神經(jīng)纖維的數(shù)目也增加,所以神經(jīng)干的復(fù)合動(dòng)作電位增加,當(dāng)所有神經(jīng)纖維都興奮后,動(dòng)作電位的幅度就不會(huì)隨著刺激強(qiáng)度的增加而增加速度。四本實(shí)驗(yàn)的原理(一)、單根神經(jīng)纖維動(dòng)作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)1、記錄出了一個(gè)先升后降的雙相動(dòng)作電位的原理當(dāng)神經(jīng)纖維未受刺激時(shí),膜外與電極所接觸的兩點(diǎn)之間沒有電位差,所以兩電極之間也無電位差存在,掃描線為一水平基線。在神經(jīng)干左端給予電刺激后,則產(chǎn)生一個(gè)向右傳導(dǎo)的

4、沖動(dòng)(負(fù)電位),當(dāng)沖動(dòng)傳到1電極(負(fù)電極)下方時(shí),此處電位較2處為低,產(chǎn)生了電位差,掃描線向上偏轉(zhuǎn),記錄出一個(gè)向上的波形(在電生理實(shí)驗(yàn)中,為了便于觀察,習(xí)慣上規(guī)定負(fù)波向上)。隨后,沖動(dòng)繼續(xù)向右側(cè)傳導(dǎo),離開1電極傳向2電極處。當(dāng)它到達(dá)2電極(正電極)下方時(shí),因1電極處神經(jīng)差不多已恢復(fù)到原來的狀態(tài),于是2電極處又較1電極處為負(fù),引起掃描線向下偏轉(zhuǎn),記錄出一個(gè)向下的波形。這樣,在神經(jīng)沖動(dòng)向右傳導(dǎo)的過程中,就記錄出了一個(gè)先升后降的雙相動(dòng)作電位。負(fù)電極在前時(shí),它首先記錄到神經(jīng)干表面由正變負(fù)的電位變化,經(jīng)歷了由正到負(fù)再到正的過程,因此記錄出動(dòng)作電位的上相。當(dāng)在后的正電極記錄到這種同樣的電

5、位變化過程時(shí),顯示相反的情況,記錄出動(dòng)作電位的下相。如果互換正、負(fù)電極的位置,則記錄到先降后升的雙相動(dòng)作電位。2、雙相動(dòng)作電位的上、下兩相幅值是不同的原因如果一對(duì)引導(dǎo)電極的正、負(fù)極比較靠近,其雙相動(dòng)作電位的上、下兩相幅值是不同的。因?yàn)榍耙粋€(gè)電極引導(dǎo)出來的動(dòng)作電位要受到后一個(gè)引導(dǎo)電極極性的影響,會(huì)產(chǎn)生一定的抵消作用。由于神經(jīng)干動(dòng)作電位是一種復(fù)合動(dòng)作電位,如果不同部位的神經(jīng)纖維粗細(xì)不同,則更會(huì)影響到動(dòng)作電位的幅值。但如果一對(duì)引導(dǎo)電極的正、負(fù)極相距較遠(yuǎn),排除神經(jīng)纖維粗細(xì)不同的影響,其動(dòng)作電位的上、下兩相幅值是相互不受影響的,也就是說應(yīng)該是相同的。A.??雙向動(dòng)作電位由A、B兩點(diǎn)的單

6、向動(dòng)作電位疊加而成,但神經(jīng)干單向動(dòng)作電位是一非左右對(duì)稱圖形。因此,兩圖形疊加所形成的雙向動(dòng)作電位也不對(duì)稱。特點(diǎn):第一相高,第二相低,第一相窄,第二相寬。(如圖所示)B.??當(dāng)A點(diǎn)興奮時(shí),B點(diǎn)尚未興奮(-70mv-0),但由于記錄電極之間的距離不夠大,當(dāng)B點(diǎn)興奮時(shí),A點(diǎn)的興奮還沒有完全恢復(fù)(20mv-70mv),因此第一相高于第二相。C.??A點(diǎn)神經(jīng)纖維多于B點(diǎn)(次要原因)。(二)、神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)五實(shí)驗(yàn)步驟(一)、制備蛙類坐骨神經(jīng)-脛腓神經(jīng)標(biāo)本通過觀看錄象讓學(xué)生學(xué)習(xí)制作方法(二)、連接實(shí)驗(yàn)裝置注意電極的安裝,正負(fù)不要接反。(三)、實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置:參照P78表6-1設(shè)

7、置(四)、實(shí)驗(yàn)觀察、記錄和測量啟動(dòng)刺激器,逐漸增大刺激強(qiáng)度,確定閾刺激(閾強(qiáng)度)和最大刺激強(qiáng)度。調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度至圖形最佳并記錄雙相動(dòng)作電位。將通道1的引導(dǎo)電極的正、負(fù)極互換,觀察波形的變化。夾傷1和2之間,記錄單相動(dòng)作電位5、實(shí)驗(yàn)觀察的指標(biāo)參照P79表6-2的項(xiàng)目。六實(shí)驗(yàn)后處理(一)、打印出雙相和單相動(dòng)作電位的圖譜(二)、列表6-2顯示實(shí)驗(yàn)結(jié)果相關(guān)數(shù)值七注意事項(xiàng)(一)、備的標(biāo)本盡可能長些,避免損傷。(二)、標(biāo)本不能接觸屏蔽盒或發(fā)生折返。(三)、制備標(biāo)本時(shí)要經(jīng)常向神經(jīng)干滴加林格液,保持標(biāo)本濕潤,但屏蔽盒內(nèi)不

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