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時間:2018-08-07
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1、教學內容1、實驗目的與要求2、實驗內容3、實驗材料及用具4、實驗方法與步驟5、作業(yè)實驗作物雄性不育系的鑒定一、實驗目的與要求通過本實驗學習,要求學生初步掌握水稻雄性不育系的植物學形態(tài)特征和花粉育性鑒定技術二、實驗內容(一)水稻雄性不育系和保持系植株形態(tài)特征的識別(二)水稻雄性不育系花粉育性鏡檢鑒定(三)水稻雄性不育系套袋自交結實性鑒定三、實驗材料與用具水稻雄性不育系和保持系(或恢復系)的生長植株,擴大鏡、顯微鏡、鑷子、載玻片、蓋玻片、回形針、羊皮紙袋、標簽、吸水紙,1%I-KI溶液。四、實驗方法與步驟(一)水稻雄性不育系和保持系
2、植株形態(tài)特征的識別在不育系繁殖田或雜交制種田對不育系及其保持系(或恢復系)進行逐行逐株地觀察比較,并從株型、分蘗、抽穗開花時間、吐頸性、花藥形態(tài)、顏色、開裂情況和開穎角度等形態(tài)進行區(qū)別(見下表)水稻雄性不育系與雄性不育保持系植株形態(tài)比較性狀不育系保持系株型較緊湊,植株較矮較松散,植株較高分蘗分蘗力較強分蘗力較弱抽穗開花時間較長,較分散有明顯高峰期穗頸有包頸現(xiàn)象正常花藥形態(tài)、色澤、開裂情況瘦小、干癟、白色或淡黃色水漬狀,不開裂肥大、飽滿、鮮黃色、開裂(二)水稻雄性不育系花粉育性鏡檢鑒定1、取樣分別從不育系、保持系(或恢復系)中隨機
3、選取即將開花的稻穗2一4個,掛上標簽,帶回實驗室。從中選擇花藥已伸長達穎殼2/3的花朵3—4個,剝開內外稃,從每朵花中取花藥3個左右作鏡檢制片。2、制片將花藥分別置于載玻片上,用鑷子輕輕搗碎,滴上一小滴I—KI溶液染色,去掉藥壁后,蓋好玻片,用吸水紙吸去多余的I—KI,待鏡檢觀察。3、鏡檢將制好的玻片,置于100倍顯微鏡下仔細觀察。每片各選擇有代表性的視野2—3個觀察花粉粒的形狀和染色反應,按下表的標準,數(shù)計每個視野內各類型花粉粒的數(shù)量,敗育型花粉與正常可育花粉的比較項目典敗型圓敗型染敗型正??捎ǚ坌螤畈灰?guī)則形圓形圓形圓形碘反
4、應不染色不染色或少量淺藍色藍色或染色不均勻藍黑色套袋自交結實情況不結實不結實不結實結實分別按下式計算各類不育花粉的百分率。不育花粉率(%)=不育花粉粒數(shù)/總花粉粒數(shù)X100根據不育花粉率,判定花粉不育等級水稻花粉不育性分級標準不育等級正??捎筒挥氩挥卟挥挥挥ǚ勐剩?)<5050—6970—94>95100(三)雄性不育系套袋自交結實性鑒定在不育系中選擇剛抽穗但尚未開花的稻穗10個,套上羊皮紙袋,用回形針固定讓其自交結實。15天后取掉紙袋,分別統(tǒng)計其自交結實情況。凡套袋的株(穗)只要有一粒結實的就為結實株(穗)。計算
5、不育株(穗)率和不育度。根據不育度,確定不育度等級水稻、油菜不育系不育度分級標準不育等級全不育高不育半不育低不育正??捎静挥?10090-9950-8920-49<20油菜不育度%100>8050-8010-50<10五、實驗作業(yè)1.在不育系繁殖田或雜交制種田中逐行逐株地觀察比較不育系與保持系植株的形態(tài)區(qū)別。2.將不育系、保持系花粉進行育性鏡檢鑒定,并寫出鑒定結果。
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