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《二株棉花立枯病拮抗菌的篩選與鑒定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、二株棉花立枯病拮抗菌的篩選與鑒定杜志兵，杜秉海，姚良同，黃偉紅，丁延芹通訊作者：Tel:86-538-8242908;E-mail:dingyq6885@163.com基金項目：山東省優(yōu)秀中青年科研獎勵基金（2006BS06012）作者簡介：杜志兵(1980~),男,在讀碩士，研究方向為分子微生物學(xué)E-mail:duzhibing331@163.com（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東，泰安271018）摘要:從棉花根際分離了1277個細(xì)菌分離物，以棉花立枯病病原真菌立枯絲核菌（RhizoctoniasolaniKuhn）
2、為靶標(biāo)菌，通過平板對峙法獲得25個具有拮抗性能的分離物，其中MH1和MH25具有很強的拮抗性能，且拮抗性能穩(wěn)定，具有較好的生防潛力。經(jīng)過形態(tài)觀察、生理生化特征分析及16SrDNA堿基序列測定和同源性分析，將MH1鑒定為短短芽孢桿菌（Brevibacillusbrevis），MH25鑒定為枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）。MH1和MH25的16SrDNA堿基序列已在GenBank中注冊，登陸號分別為：EF488102，EF488103。關(guān)鍵詞:棉花根際拮抗立枯病鑒定ISOLATIONANDIDENTIFIC
3、ATIONOFANTAGONISTICBACTERIAINHIBITINGAGAINSTPANTHOGENICFUNGIOFCOTTONRHIZOSPHEREDUZhi-bing,DINGYan-qin,YAOLiang-tong,HuangWei-hong,DUBing-hai(Departmentofmicrobiology,Collegeoflifescience,ShandongAgriculturalUniversity,Taian271018,China)Abstract:Twenty-fivestrains
4、ofantagonisticbacteria,screenedfrom1277isolatesofcottonrhizospere,haveinhibitioneffectagainstRhizoctoniasolabniKuhn.Basedontheresultsofmorphologiccharacteristics,physiologicalandbiochemicalpropertiesandphylogeneticanalysisof16SrDNA,MH1wasidentifiedasBrevibacillus
5、brevisandMH25wasidentifiedasBacillussubtilis.Thesequencesof16SrDNAobtainedinthisstudyhavebeenregisteredatGenBankdatabaseandtheaccessionnumber,respectively,areEF4488102andEF4488103.KeyWords:cottonrhizosphere,Rhizoctoniasolani,antagonistic,identification棉花立枯病是由立枯絲核
6、菌（RhizoctoniasolaniKuhn）引起的，是世界各產(chǎn)棉區(qū)分布廣泛，危害嚴(yán)重的病害，我國主要棉區(qū)都有發(fā)生，其中以黃河流域為重，現(xiàn)在采用合理輪作、選用抗病品種[1]、施用化學(xué)農(nóng)藥等措施防治棉花立枯病的發(fā)生，但是輪作和篩選抗病品種周期長，使用化學(xué)農(nóng)藥不能從根本上防治棉花立枯病，又帶來了環(huán)境污染。而生物防治的方法可以減少化學(xué)農(nóng)藥帶來的環(huán)境污染，又解決了抗病棉種篩選周期長，抗病單一的缺點，是一種行之有效的方法；此方法既限制了有害微生物生長又增加了根際有益微生物的數(shù)量。近年來雖然有棉花立枯病原菌拮抗菌的相關(guān)報道[2,3
7、,4]，但是存在著拮抗菌難以在棉花根際長期定殖的問題。本實驗從棉花根際分離并篩選的拮抗菌有利于其在棉花根際的定殖。拮抗菌的應(yīng)用還可以有效的促進(jìn)植物的生長。本實驗從高河周大廟、馬集新莊、雞黍李固堆、濟(jì)寧、金鄉(xiāng)、濟(jì)寧農(nóng)科院的農(nóng)田中采集棉花根際土，篩選棉花立枯病的拮抗細(xì)菌，獲得具有很好生防應(yīng)用潛力的拮抗菌株2株，其中MH1被鑒定為短短芽孢桿菌（Brevibacillusbrevis），MH25被鑒定為枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）。1材料和方法1.1材料供試病原菌棉花立枯病原菌-----立枯絲核菌（Rhizo
8、ctoniasolaniKuhn）由本實驗室保存。培養(yǎng)基馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基（PDA），牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（NA），高氏一號培養(yǎng)基，LB培養(yǎng)基。試劑分子生物學(xué)試劑購于寶生物工程（大連）有限公司，DNA小量快速純化試劑盒（3SSpinAgaroseGelDNApurificationkit）購于上海申能博彩生物科技有限公司
