氯化汞對斑馬魚的胚胎毒性及成魚的生殖毒性研究

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1、？４主砵笟碩士學位論文氬化象對農馬食魴ＪＫ蘼？牲反成Ａ的生破毒牲研禿張群芳？撗導教師．李英文教授專業(yè)名稱：動物學研究方向：水生動物生態(tài)健康二〇—八年五月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含他人己經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得重慶師范大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料一同工作。與我的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明。學位論文作者簽名：樣＃為簽字日期：：＾沒年６月鐘日學位

2、論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解重慶師范大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本Ｔｄｆ權重慶師范大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印。、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文？義學位論文作者簽名．旅￥簽字日期：從年〈月今曰重慶師范大學碩士學位論文氯化汞對斑馬魚的胚胎毒性及成魚的生殖毒性研究碩士研究生：張群芳指導老師：李英文教授學科專業(yè)：動物學所在學院：生命科學學院重慶師范大學2018年5月AThesisSubmittedto

3、ChonqingNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterStudyonembryonictoxicityandreproductivetoxicityofmercuricchlorideinzebrafishCandidate:ZhangQunfangSupervisor:ProfessorLiYingwenMajor:ZoologyCollege:CollegeoflifesciencesChongqingNormalUniversityMay,2018重慶師

4、范大學碩士學位論文中文摘要氯化汞對斑馬魚的胚胎毒性及成魚的生殖毒性研究摘要汞（Hg）是一種全球性重金屬污染物，廣泛分布于水環(huán)境中，嚴重威脅魚類生存并通過食物鏈危害人類健康。在自然界中，汞主要以汞元素、無機汞和有機汞三種形式存在，而以有機汞（尤其是甲基汞）的毒性最強。因此，目前的研究主要關注有機汞對魚類的毒性效應，而無機汞作為工業(yè)廢水中汞排放的最主要形式，其對魚類的毒性研究十分缺乏。本文首先以斑馬魚胚胎為研究對象，從發(fā)育參數、總汞含量、氧化應激和免疫應答方面探討了氯化汞（HgCl2）暴露對斑馬魚的胚胎毒性；然后以斑馬魚成魚為研究對象，從性腺的組織學結構、性激素水平、抗

5、氧化狀態(tài)及下丘腦-垂體-性腺（HPG）軸相關基因表達水平等方面，明確了HgCl2暴露對斑馬魚成魚的生殖毒性。1.HgCl2暴露對斑馬魚的胚胎毒性為了研究HgCl2暴露對斑馬魚的胚胎毒性及其機理，將斑馬魚胚胎從受精后2+2+2h暴露于0（對照）、1、4、16μg/LHg的水體中至168h。結果顯示：16μg/LHg暴露導致斑馬魚胚胎/仔魚發(fā)育損傷（死亡率和畸形率增加、體長較短、孵化率下2+降、孵化時間延長）；與體內總汞含量隨Hg濃度的升高和暴露時間的延長而增加；2+同時，Hg暴露影響了抗氧化酶（CAT、GST和GPX）的活性，GSH和MDA的含量以及抗氧化相關基因（c

6、at1、sod1、gstr、gpx1α、nrf2、keap1、hsp70和mt）2+的mRNA表達水平；此外，Hg暴露上調了先天免疫相關基因（il-1β、il-8、il-10、tnfα2、lyz和c3）的表達水平。因此，本研究表明HgCl2暴露能誘導斑馬魚胚胎/仔魚的發(fā)育損傷、氧化應激和免疫毒性。2.HgCl2暴露對斑馬魚成魚的生殖毒性為了研究HgCl2暴露對斑馬魚成魚的生殖毒性及其機理，將雌、雄斑馬魚成魚2+2+分別暴露于0（對照）、15、30μg/LHg的水體中30d。結果顯示：Hg暴露損傷了斑馬魚精巢和卵巢的組織學結構；改變了性腺中抗氧化酶（CAT、GST和G

7、PX）的活性和相關基因的mRNA水平，以及GSH和MDA的含量。在雌魚中，盡管卵巢17β-雌二醇（E2）含量保持相對穩(wěn)定，但腦中l(wèi)hβ、gnrh2、gnrh3和卵巢中l(wèi)hr2+和erα的表達顯著下調；在雄魚中，Hg暴露導致精巢中睪酮（T）水平顯著降低，且腦中gnrh2、gnrh3、fshβ和lhβ以及精巢中fshr、lhr、ar、cyp17和cyp11b的表達水平下調。因此，本研究表明，HgCl2暴露通過誘導斑馬魚性腺的氧化脅迫，從而損傷其組織學結構；同時，HgCl2通過調節(jié)HPG軸相關基因的轉錄而影響性I重慶師范大學碩士學位論文中文摘要激素的分泌。此外，HgC