異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的研究與應(yīng)用

異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的研究與應(yīng)用

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1、異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的研究與應(yīng)用發(fā)布時(shí)間:[1970-01-01]中華整形外科雜志2002年9月第18卷第5期異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的研究與應(yīng)用霍孟華,戚可名,黃金井脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(acellulardermalmatrix,ADM)是異體皮經(jīng)特殊處理,去除其細(xì)胞成分后得到的一種真皮替代品。由Livesey[1]開發(fā)研制,Lifecell公司生產(chǎn),商品名為AlloDerm,已獲美國FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床,近幾年在燒傷和整形外科領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用和發(fā)展。一、脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的制備方法ADM的制備包含去表皮

2、、脫真皮細(xì)胞及冷凍干燥處理3個(gè)基本步驟,有兩種方法。一是尸體皮經(jīng)高滲鹽水和12烷基硫酸鈉(SDS)處理,形成NaCl-SDSADM[1,2];二是經(jīng)DispaseⅡ處理后,再經(jīng)TritonX-100處理,形成Dispase-TritonADM[3]。兩種處理方法不同,得到的ADM略有差異,其中細(xì)胞成分均被清除,基質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)完整,彈力素、硫酸角質(zhì)素、層粘素、Ⅲ、Ⅳ型膠原雖有丟失,但仍保留足夠的數(shù)量;相比較而言,Dispase-TritonADM中各種抗原成分較少,而NaCl-SDSADM中Ⅳ型膠原

3、、纖維結(jié)合素、結(jié)合素、彈力素、HLA-DR的含量較多[4]。二、生物學(xué)特性針對(duì)異體皮產(chǎn)生的免疫反應(yīng)主要作用于表皮細(xì)胞、真皮中的成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等細(xì)胞成分,真皮的非細(xì)胞成分細(xì)胞外基質(zhì)蛋白和膠原(即ADM)則相對(duì)無免疫活性,可永久地存在于宿主機(jī)體內(nèi)。ADM作為一種異體真皮,細(xì)胞成分及Ⅰ、Ⅱ型細(xì)胞相容性抗原已被完全清除,免疫活性很低,不會(huì)誘發(fā)針對(duì)異體組織移植所產(chǎn)生的特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)(即排異反應(yīng)),亦不會(huì)誘發(fā)非特異性異物反應(yīng)[5]。ADM中保留了基底膜復(fù)合物,形成基底膜與真皮兩個(gè)面,真皮面有利于AD

4、M的快速血管化,基底膜面可為上皮細(xì)胞的移行和定植提供一個(gè)天然平面,有利于ADM的上皮化[2,6]。真皮成分的多寡是創(chuàng)面愈合后彈性、外觀是否良好的重要因素,瘢痕形成的量及攣縮程度與所植皮片中真皮的含量成反比[7]。真皮含量不足時(shí),成纖維細(xì)胞只能合成不成熟的基質(zhì),此種基質(zhì)經(jīng)改建后即成為瘢痕組織[8]。ADM作為一種真皮替代物可為創(chuàng)面提供足夠量的真皮組織,從而減輕瘢痕的形成和攣縮。排列規(guī)則的膠原束和彈力纖維是真皮發(fā)揮正常功能所必需的結(jié)構(gòu),肉芽組織和瘢痕組織正是以膠原排列紊亂和彈力纖維缺乏為特征[9]。A

5、DM中細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)完整,可為組織細(xì)胞的再生提供一個(gè)良好的支架,細(xì)胞外基質(zhì)蛋白可促進(jìn)表皮細(xì)胞的附著和增生[10]。自創(chuàng)面基底部移入ADM中的成纖維細(xì)胞仍具有產(chǎn)生成熟基質(zhì)的能力[2]。ADM埋植于皮下2周,有輕度的淋巴-組織細(xì)胞浸潤和新生血管,極輕度的炎性反應(yīng),4周時(shí)炎性反應(yīng)消退,之后即無明顯組織學(xué)改變,未見組織排異反應(yīng)。ADM移植于開放創(chuàng)面1周即有部分血管化,2周出現(xiàn)廣泛的血管化,之后不再增加,3周時(shí)ADM邊緣出現(xiàn)上皮化,4周時(shí)上皮覆蓋整個(gè)創(chuàng)面[3]。異種ADM移植后1個(gè)月可出現(xiàn)成纖維細(xì)胞的移入和

6、血管化[11]。ADM具有良好的柔韌性,易于修剪,可以切割、重疊、搓成卷狀,亦可制成微粉狀進(jìn)行皮內(nèi)或皮下注射,均可見到成纖維細(xì)胞的移入及膠原的沉積。ADM對(duì)代謝的要求很低[12]。ADM血管化后會(huì)出現(xiàn)不同程度的吸收,各家報(bào)道不一,從無吸收[13,14]到明顯吸收,多在15%~20%之間[2,3,13-16],發(fā)生在術(shù)后4~6周內(nèi)。ADM的吸收可能與ADM受區(qū)組織血運(yùn)差,ADM暴露、脫水、干燥、活動(dòng)、輕度的慢性感染有關(guān)。ADM的無細(xì)胞特性大大減少了炎性反應(yīng)的可能性,ADM移植后機(jī)體將其視為自體組織,

7、逐漸將其改建為與自體組織相似的組織。ADM移植后5~8周新生的成纖維細(xì)胞便可合成自體膠原[2]。當(dāng)膠原的沉積與吸收達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡時(shí),植入物即獲得一個(gè)穩(wěn)定的體積。影響這一動(dòng)態(tài)平衡的因素有血管化過程,受區(qū)局部活動(dòng)度、壓力、炎性反應(yīng)和組織內(nèi)在因素等,還需要進(jìn)一步的研究。三、臨床及實(shí)驗(yàn)應(yīng)用研究1.燒傷創(chuàng)面的應(yīng)用:ADM作為真皮替代品,可為燒傷創(chuàng)面提供足夠的真皮,從而明顯減少瘢痕及瘢痕攣縮。其移植方式各家報(bào)道不一,ADM與自體超薄皮片可一期亦可二期手術(shù)移植[2,3]。表皮細(xì)胞[17]、口腔粘膜上皮細(xì)胞[18]

8、可直接培養(yǎng)在ADM上,然后移植于創(chuàng)面上或作為口腔粘膜代用品。ADM埋植于皮下,經(jīng)過2周血管化后,將其掀起、旋轉(zhuǎn),形成預(yù)構(gòu)真皮瓣,在其上方移植培養(yǎng)的自體表皮細(xì)胞膜片,修復(fù)鄰近的皮膚缺損[19]。2.橫膈缺損的修復(fù):全層切除SD幼鼠左半橫膈的中央部分,然后以ADM修補(bǔ),結(jié)果ADM存活良好,可隨機(jī)體的生長而生長,局部無膨出,是一種理想的橫膈修復(fù)材料,特別適合兒童橫膈缺損的修復(fù)[20]。3.硬腦膜缺損的修復(fù):將ADM的基底膜面朝向腦組織,與硬腦膜缺損邊緣連續(xù)縫合修復(fù)硬腦膜缺損,可有效地防止

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