石斑魚神經(jīng)壞死病毒傳播途徑阻斷的初步研究

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1、石斑魚神經(jīng)壞死病毒傳播途徑阻斷的初步研究林克冰方瓊珊吳建紹周宸何麗斌林琪王涵生（福建省水產(chǎn)研究所，福建，廈門361012）摘要：本文報(bào)告了斜帶石斑魚(Epinepheluscoioides)苗種培育中親魚、卵、餌料等幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)的病毒攜帶檢測(cè)以及幾種藥物對(duì)病毒的消除效果的試驗(yàn)。用RT-PCR法檢測(cè)，斜帶石斑魚親魚的糞便、卵、稚魚、仔魚，餌料輪蟲、橈足類中都有檢出神經(jīng)壞死病毒(nervousnecrosisvirus，NNV)。聚維酮碘50～100mg/L浸泡卵20min、浸泡輪蟲、橈足類30min，鹽酸嗎啉胍3～5mg/L浸泡卵30min、浸泡輪蟲、橈足類40mi

2、n，聚維酮碘50mg/L+鹽酸嗎啉胍3mg/L浸泡卵20min、浸泡輪蟲、橈足類30min可有效滅活所攜帶的神經(jīng)壞死病毒活性。關(guān)鍵詞：斜帶石斑魚，神經(jīng)壞死病毒，傳播途徑，阻斷魚類神經(jīng)壞死病毒(nervousnecrosisvirus，NNV)[1]，是一種世界范圍內(nèi)流行的海水魚類病毒病，主要發(fā)生在海水魚類種苗生產(chǎn)階段，是近幾年來(lái)石斑魚苗種培育中危害最大的病原，魚苗死亡率高達(dá)90%以上，給石斑魚養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展帶來(lái)嚴(yán)重的危害[3～4,7]。目前普遍認(rèn)為神經(jīng)壞死病毒的傳播有水平傳播和垂直傳播兩個(gè)途徑[5～6]，明確兩個(gè)傳播途徑病毒的攜帶者以及具體的傳播途徑，是種苗培育生產(chǎn)

3、中防治神經(jīng)壞死病毒病的關(guān)鍵。本文報(bào)告了斜帶石斑魚苗種培育中親魚、卵、餌料等幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)的病毒攜帶檢測(cè)以及幾種藥物對(duì)病毒的消除效果的試驗(yàn)，為深入研究神經(jīng)壞死病毒傳播途徑奠定基礎(chǔ)，同時(shí)也為石斑魚苗種培育生產(chǎn)中神經(jīng)壞死病毒病的防治提供理論依據(jù)。1．材料和方法1.1.1實(shí)驗(yàn)魚：斜帶石斑魚(Epinepheluscoioides)親魚糞便分別于2007年8月16日取自福建省漳浦佛壇聯(lián)合水產(chǎn)有限公司育苗室，2009年9月22日2010年10月18日取自詔安大華水產(chǎn)有限公司育苗場(chǎng)。斜帶石斑魚卵、孵化稚魚分別于2007年8月16日和2010年8月21日取自福建省漳浦佛壇聯(lián)合水產(chǎn)有

4、限公司育苗室、2009年8月26日取自東山烏礁灣育苗室、2008年9月23日2010年9月5日取自于澎湖漁業(yè)東山分公司育苗場(chǎng)。斜帶石斑魚稚魚分別取自于詔安大華水產(chǎn)有限公司育苗場(chǎng)和詔安海康水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司育苗場(chǎng)。1.1.2餌料：輪蟲分別取自詔安大華水產(chǎn)有限公司育苗場(chǎng)、詔安?？邓a(chǎn)養(yǎng)殖有限公司育苗場(chǎng)、詔安梅嶺海水魚養(yǎng)殖土池，海區(qū)吊養(yǎng)牡蠣受精卵、海區(qū)捕撈橈足類、海區(qū)捕撈小雜魚魚糜。上述樣品取后立即冷凍后轉(zhuǎn)入-65℃冷凍保存。1.1.3聚維酮碘：配成20mg/L、50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L鹽酸嗎啉胍：配成1mg/L、3mg/L、5mg/L

5、、7mg/L、9mg/L聚維酮碘+鹽酸嗎啉胍：20mg/L、50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L分別加入3mg/L的鹽酸嗎啉胍1.1.4卵、輪蟲、牡蠣受精卵、橈足類分別用上述海水溶液浸泡一定時(shí)間后取少量立即冷凍，然后轉(zhuǎn)入-65℃冷凍保存1.1.5試劑盒：國(guó)家海洋局第三海洋研究所研制的神經(jīng)壞死病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒。作者簡(jiǎn)介：林克冰,廈門東渡海山路7號(hào)9604，361012，Tel：,0592-6012063，E-mail：kebingl@sina.com。51.1.6聚維酮碘為北大泰普科技有限公司生產(chǎn)，鹽酸嗎啉胍為吉林省博大制藥有限責(zé)任

6、公司生產(chǎn)2．結(jié)果表1斜帶石斑魚親魚糞便、1d稚魚、雜魚糜、牡蠣受精卵神經(jīng)壞死病毒RT-PCR檢測(cè)結(jié)果Fig1　NNVRT-PCRdetectionofEpinepheluscoioidesdung,1doldlarvae,surimi,oysteroosperm批次RT-PCR批次RT-PCR批次RT-PCR糞便2007.08.16++稚魚1（2007.08.06）++魚糜（2007.08.20）—糞便2009.09.22—稚魚2（2009.08.26）+魚糜（2008.09.25）—糞便2010.10.18—稚魚3（2008.09.23）—ML1（2007.08

7、.07）—稚魚4（2010.08.21）++ML2（2007.09.13）—稚魚5（2010.09.05）—ML3（2008.08.20）—++表示強(qiáng)陽(yáng)性，+表示弱陽(yáng)性，—表示陰性，ML表示牡蠣受精卵表2聚維酮碘浸泡斜帶石斑魚卵20min前、后RT-PCR檢測(cè)結(jié)果Fig2NNVRT-PCRdetectionofEpinepheluscoioideseggsbeforeandafterexposuretoPovidoneIodine20min聚維酮碘mg/L2050100150200處理前處理后處理前處理后處理前處理后處理前處理后處理前處理后1（2007.08.06

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