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1、分枝桿菌 放線菌 諾卡菌Mycobacterium是一類細長略帶彎曲的桿菌，含有分枝菌酸，有分枝生長的趨勢而得名。具有抗酸性，故又稱抗酸桿菌(acid-fastbacillus)。人結(jié)核分枝桿菌牛分枝桿菌非洲分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌莢膜：CR3結(jié)合、降解大分子物質(zhì)、保護、抑制溶酶體融合脂質(zhì)：索狀因子、磷脂、硫酸腦苷脂、蠟質(zhì)D蛋白質(zhì):超敏反應(yīng)、結(jié)核結(jié)節(jié)的形成傳播途徑：呼吸道、消化道、損傷的皮膚疾?。憾喾N臟器的結(jié)核病，肺結(jié)核最為多見。免疫性：高感染率，低發(fā)病率。抗體無保護作用帶菌免疫細胞免疫細長略帶彎曲的桿菌，抗酸染色后結(jié)核分枝桿菌呈紅色，背景呈藍色。菌體外有莢膜。專性需氧改良羅氏培養(yǎng)基生長緩慢表
2、面干燥、不透明的菜花樣粗糙型菌落液體培養(yǎng)時生成菌膜抵抗力較強。耐干燥，在干燥的痰內(nèi)生存6～8個月，對化學(xué)消毒劑的抵抗力較強，在3％HCl或6％H2SO4中不被殺死，對濕熱敏感,在70％～75％乙醇中數(shù)分鐘即被殺死。結(jié)核分枝桿菌不發(fā)酵糖類，有毒株中性紅試驗均陽性，無毒株則為陰性，并失去索狀生長現(xiàn)象。H2O2煙酸硝酸鹽人型結(jié)核分枝桿菌+++牛型結(jié)核分枝桿菌+--（1）DirectSmear2.MorphologicExaminations報告標(biāo)準-全視野未找到抗酸菌1+100個視野發(fā)現(xiàn)3～9個2+100個視野發(fā)現(xiàn)10～99個3+每個視野發(fā)現(xiàn)1～9個4+每個視野發(fā)現(xiàn)10個以上（2）濃縮集菌涂片檢
3、查法如果直接涂片鏡檢不易檢出結(jié)核桿菌，應(yīng)采用濃縮集菌涂片檢查法，以提高結(jié)核桿菌的檢出率。將標(biāo)本離心，取沉淀涂片，或采用漂浮集菌法，集菌后標(biāo)本經(jīng)反復(fù)多次使涂層加厚，一般取3~4個接種環(huán)，干燥固定后染色鏡檢。3.核酸檢測用PCR法快速診斷結(jié)核分枝桿菌感染,特異性與敏感性均大于95％。４.抗原檢測：用ELISA法檢測結(jié)核分枝桿菌抗原，可快速得知是否感染結(jié)核分枝桿菌．５.抗PPDIgG的檢測用ELISA法檢測患者血清中抗PPDIgG，可作為活動性結(jié)核分枝桿菌感染的快速診斷方法，陽性率為80％～90％。６.分離培養(yǎng)專性需氧、羅氏培養(yǎng)基、8w前處理目的：去除雜菌，痰液均質(zhì)化。方法：挑取5ml痰液至已經(jīng)
4、標(biāo)記的50ml離心試管中；加入等量的2%N-乙酰半胱氨酸-氫氧化鈉（NACL-NaOH）前處理液（去污染）；漩渦振蕩20秒；靜置15分鐘，切勿超過20分鐘；加入無菌PBS（PH6.8）至約50mL，蓋緊蓋子；離心3000r/min，15分鐘；倒掉上清液；添加1-3mlPBS（PH6.8）以中和PH至6.8.無菌毛細管吸取消化后標(biāo)本0.1ml，滴加于中性羅氏培養(yǎng)基，將接種過的斜面來回晃動，使菌液均勻鋪于斜面上，斜面朝上放37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。每一標(biāo)本同時接種2支。接種后第一周每天觀察一次，此后每周觀察一次。陽性結(jié)果經(jīng)涂片證實隨時報告。若7天內(nèi)報告陽性，則為快速生長菌，超過7日則為緩慢生長菌。陰
5、性結(jié)果至8周報告。必要時可延長。７.鑒定(1)PCR反向膜探針雜交ELISA法(PCR雜交梳)(2)DNA探針(3)16srRNA基因序列測定(4)高效液相色譜(HPLC)檢測８.藥物敏感性試驗將純培養(yǎng)物菌懸液，接種含各種濃度藥物的固體培養(yǎng)基上，同時做不含藥物的對照組。經(jīng)過培養(yǎng)，含有藥物的培養(yǎng)基上菌落數(shù)目是對照組的75％以上，則認為該菌對該藥物濃度為完全耐藥，如無菌落生長則為敏感。四、免疫學(xué)診斷1、結(jié)核菌素試驗原理：純蛋白衍生物(PPD)，是用三氯醋酸沉淀結(jié)核菌培養(yǎng)濾液后的純化物。注入皮內(nèi)后如受試者已感染結(jié)核，則結(jié)核菌素與致敏淋巴細胞特異性結(jié)合，形成遲發(fā)型超敏反應(yīng)性炎癥。應(yīng)用：①選擇BCG
6、接種對象及測定接種效果，結(jié)核菌素反應(yīng)陰性者應(yīng)接種BCG； ②結(jié)核菌素試驗對嬰幼兒可做診斷結(jié)核病之用； ③在末接種BCG的人群中作結(jié)核分枝桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查； ④可借用其測定腫瘤病人的細胞免疫功能。2、結(jié)核分枝桿菌抗原檢測3、結(jié)核分支桿菌抗體檢測4、全血干擾素釋放試驗ESAT、CFP-10第二節(jié)非典型分枝桿菌指結(jié)核分枝桿菌和麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。因具有抗酸性，故又稱非典型抗酸性菌。廣泛分布于外環(huán)境和人及動物的機體中。已發(fā)現(xiàn)50種以上能引起人類疾病，引起的肺部感染。特點1、對人類的致病性比MTB低。2、機體免疫力低下時作為繼發(fā)性疾病發(fā)生。3、與結(jié)核分支桿菌發(fā)生混合感染4、對抗結(jié)核藥物
7、天然耐藥光產(chǎn)色分枝桿菌暗產(chǎn)色分枝桿菌不產(chǎn)色分枝桿菌迅速生長分枝桿菌—、光產(chǎn)色分枝桿菌特點是在暗處不產(chǎn)生色素，光照1h后能在48h內(nèi)，菌落轉(zhuǎn)為黃色或橘黃色。對人有致病性的是：1．堪薩斯分枝桿菌廣泛分布于水和土壤中，能引起肺內(nèi)外結(jié)核樣的病變。2．海分枝桿菌為水中的腐生菌。通過皮膚微小創(chuàng)口侵入，引起所謂的“游泳池肉芽腫”。3．猿分枝桿菌先后從猿和人體分離出此菌。二、暗產(chǎn)色分枝桿菌有光或無光均能產(chǎn)生色素，呈黃色或橘黃色。對人有致
