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《醫(yī)藥學(xué)醫(yī)學(xué)畢業(yè)論文 肝干細胞與干細胞移植治療急慢性肝病的研究進展》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、湖南師范大學(xué)本科畢業(yè)論文考籍號：XXXXXXXXX姓名：XXX專業(yè)：醫(yī)藥學(xué)醫(yī)學(xué)論文題目：肝干細胞與干細胞移植治療急慢性肝病的研究進展指導(dǎo)老師：XXX二〇一一年十二月十日關(guān)鍵詞：肝干細胞 肝干細胞發(fā)現(xiàn)于20世紀50年代末，1956年，F(xiàn)arber［1］將肝內(nèi)可能具有分化潛力的細胞描述為卵圓細胞，1958年Wilson和Leduc［2］提出肝干細胞的概念。近年來，人們發(fā)現(xiàn)肝干細胞移植對急慢性肝臟疾病有明確的治療作用，使之成為消化領(lǐng)域的研究熱點。本文對肝干細胞及干細胞移植治療肝病的研究進展做一綜述。 1肝干細胞的來源與分類 根據(jù)肝臟干細
2、胞起源的不同，可將其分為肝源性肝臟干細胞和非肝源性肝臟干細胞，前者包括卵圓細胞、分化的肝細胞、胚胎肝細胞和膽管上皮細胞，后者則為源于胚胎干細胞、骨髓造血干細胞及胰腺上皮干細胞等不同來源的肝臟干細胞。在特定條件下，造血干細胞和骨髓間充質(zhì)細胞均可轉(zhuǎn)化成肝細胞。 1.1胚胎干細胞（embryonicstemcell，ES細胞）ES細胞來源于早期胚胎,具有多項分化潛能,可以在體內(nèi)或體外分化為多種組織細胞。Hamazaki等［3］在體外成功地將小鼠ES細胞定向分化為成熟的肝細胞,該細胞能表達AFP、甲狀腺轉(zhuǎn)運蛋白、A2抗胰蛋白酶、白蛋白等肝細胞
3、特征。Hu等［4］則在直接觀察到體外ES細胞向肝細胞轉(zhuǎn)化的過程中，發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)液中體外ES細胞能轉(zhuǎn)化為可分泌AFP、ALB的肝細胞?！ ?.2骨髓干細胞骨髓中含有的造血干細胞和間充質(zhì)細胞具有較強的增生、分化能力。Lagasse等［5］將骨髓組織細胞移植給致死量放射線照射鼠，發(fā)現(xiàn)在受鼠肝臟中發(fā)現(xiàn)骨髓造血干細胞來源的成熟肝細胞，提示造血干細胞可以轉(zhuǎn)化為肝細胞。Theise等［6］將正常雄性小鼠骨髓移植到正常雌性小鼠體內(nèi)，應(yīng)用熒光原位雜交方法檢查雌性小鼠肝臟細胞Y染色體，發(fā)現(xiàn)雌性小鼠肝臟的部分肝細胞表達Y染色體，提示骨髓干細胞在正常肝臟環(huán)境中能
4、分化為肝細胞。Petersen等［7］將雄性大鼠骨髓干細胞移植到致死量放射性肝損傷且肝細胞增生被抑制的雌性大鼠模型體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)該模型大鼠的部分肝臟細胞表達Y染色體，提示骨髓干細胞不僅在正常肝臟環(huán)境能分化為肝細胞，而且在肝臟某些病理的環(huán)境中也能分化為肝細胞?！ ?.3胰腺上皮干細胞胰腺中存在著肝臟前體細胞。Wang等［8］用野生型E.colilacZ轉(zhuǎn)基因小鼠胰腺細胞移植入同系酪氨酸代謝酶基因（FAH）突變的小鼠脾臟,在小鼠脾臟中能檢測到FAH（+）的肝細胞團。從胰腺分離的胰島前體細胞在體外培養(yǎng)中可分化為肝上皮細胞，提示在胚胎發(fā)育過程中,一
5、些原始的多能干細胞保持著未分化狀態(tài)滯留在機體組織中。胰腺肝臟細胞同源性的這一特征，為進一步的臨床治療提供了又一肝干細胞來源?！ ?.4肝干細胞 1.4.1肝卵圓細胞（hepaticovalcell）表現(xiàn)為核大而胞質(zhì)小并具有特殊的細胞標記,細胞表面高度表達OV-6、白蛋白、CK等,形態(tài)呈卵圓形。卵圓細胞來自終末小膽管Hering管細胞,其數(shù)量與肝損傷的嚴重程度有關(guān)。在成年動物肝臟內(nèi)肝卵圓細胞含量非常少,通常情況無法檢測到?！ ?.4.2肝小細胞與肝卵圓細胞類似,多在嚴重肝損傷的情況下,可觀察到肝小細胞增殖，該細胞直徑為9~12μm的小型
6、單個核細胞,呈鋪路石樣增殖,其性質(zhì)介于肝細胞與肝管上皮細胞之間。在急性病毒性肝炎、暴發(fā)性肝衰竭恢復(fù)期、慢性肝炎及肝硬化患者的肝組織中可以觀察到這種細胞?！ ?各種干細胞分離方法 2.1骨髓間充質(zhì)干細胞的分離方法骨髓干細胞主要有兩大類，一類是造血干細胞（hematopoieticstemcells,HSCs），它是血細胞的起源細胞，另一類是骨髓間充質(zhì)細胞（mesenchymalstemcells,MSCs）。骨髓中MSCs的含量很低，約為0.001%~0.01%，因此應(yīng)用MSCs前，需對其進行分離及體外培養(yǎng)擴增。目前常用的分離方法為貼壁
7、篩選法、密度梯度離心法、流式細胞儀分選法和免疫磁珠分離法，其中流式細胞儀分選是目前分離骨髓干細胞的最常用方法之一?！ ?.2肝干細胞的分離方法目前分選、純化肝干細胞的方法有密度梯度離心、流式細胞技術(shù)結(jié)合免疫熒光標記單克隆技術(shù)、免疫磁珠分選技術(shù)等,其中密度梯度離心無需特殊儀器及抗體，操作過程簡單，可減少復(fù)雜操作對細胞活性的損傷，采用proteaseE選擇性破壞肝實質(zhì)細胞［9］，20μm濾膜濾過清除體積較大細胞，后經(jīng)Percoll密度梯度離心獲得高產(chǎn)量及活性率的肝干細胞。 3急性肝損傷肝干細胞的激活與增殖 干細胞在肝損傷時具有分化增殖為
8、肝細胞的能力，但給予正常及受損傷的動物干細胞治療時，發(fā)現(xiàn)只在受損傷的動物觀察到干細胞的分化與增殖，正常動物肝臟組織并無外源性干細胞生長跡象。說明細胞對于生長信號的反應(yīng)因損傷的程度大小而異。正常肝臟中，肝干細
