高活性苧麻脫膠菌制霉菌素抗性菌株的選育-生物技術(shù)通報(bào)

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1、高活性苧麻脫膠菌制霉菌素抗性菌株的誘變選育(生物技術(shù)通報(bào)2009.12)曾瑩1,向新柱2(1.湖北工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院武漢430068;2.武漢科技學(xué)院武漢430073)摘要:利用制霉菌素抗性來篩選高滲透性突變株,提高黑曲霉菌對(duì)苧麻纖維的脫膠能力,使微生物脫膠能用于工業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐之中。分別用紫外線、硫酸二乙酯、亞硝酸作為誘變劑對(duì)黑曲霉3.0.2菌株進(jìn)行誘變處理。以制霉菌素抗性為遺傳標(biāo)記,從突變菌株中定向篩選得到一株高活性苧麻脫膠菌黑曲霉3.0.2-26。在以未經(jīng)刮制的苧麻韌皮為主要碳源,0.7%(NH4)2SO4為氮源,添加0.05%KCl;0.05%MgSO4;0.1%K2HPO4;

2、0.1%酵母膏;Tween800.1%的培養(yǎng)液中,接入黑曲霉3.0.2-26,置30℃下,150r/min處理30hr左右,脫膠苧麻纖維的殘膠率平均為14.43%。關(guān)鍵詞:誘變育種,定向篩選,制霉菌素抗性,苧麻脫膠菌,黑曲霉.中圖分類號(hào):TS192.55文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:AMutationBreedingofNystatinresistantmicroorganismwithhighRamieDegummingactivity.ZengYing1,Xiangxinzhu2,(1.CollegeofBioengineering,HubeiUniversityofTechnology,Wuha

3、n,430068)(2.WuhanInstituteofScienceandTechnology,Wuhan,430073)Abstract:InordertoimprovetheramiedegummingcapabilityofAspergillusnigerstrain,Nystatinresistancewasemployedforscreeninghighpermeablemutationstrainsothatmicroorganismdegummingcanbeappliedintoindustrialproduction.TheAspergillusniger3.0.

4、2strainwasmutatedbyUVlight,DES,andnitritetreatment.ThestrainAspergillusniger3.0.2-26,whichhashighramiedegummingactivitywasselectedoutfromallthemutantsusingNystatinresistanceasthegeneticmarker.Aspergillusniger3.0.2-26wasinoculatedintothemediumcontainingunwiperedraminebastasthemaincarbonsource,0.

5、7%(NH4)2SO4asnitrogensource,inadditionwith0.05%KCl;0.05%MgSO4;0.1%K2HPO4;0.1%yeastextract;Tween800.1%.Thisincubationlasted30hrat30℃and150r/min,theaverageresidualgumcontentoframiefiberwas14.43%.KeyWords:mutationbreeding;directivebreeding;nystatinresistance;degummingstrainoframie;Aspergillusniger

6、.苧麻脫膠是影響苧麻纖維紡織加工的關(guān)鍵,傳統(tǒng)的化學(xué)法脫膠不僅對(duì)苧麻纖維有一定的損傷,會(huì)嚴(yán)重污染環(huán)境,而且破壞了苧麻纖維本身具有的多種對(duì)人體有益的保健功能,殘留的化學(xué)物質(zhì)影響人體健康。[1]生物法脫膠則是利用微生物或微生物產(chǎn)生的酶將膠質(zhì)分解。其作用條件溫和,對(duì)纖維損傷小,還能提高苧麻纖維的光澤度,而且生物法脫膠耗水少,污染輕,有利于環(huán)境保護(hù)[2-3]。多年來,國(guó)內(nèi)外在微生物脫膠方面進(jìn)行了一系列的研究,但因所篩選到的脫膠菌株脫膠關(guān)鍵酶活力不高或分泌的酶系不全,苧麻經(jīng)微生物脫膠處理后仍然不能達(dá)到紡織工業(yè)生產(chǎn)上對(duì)苧麻纖維的要求,而未能完全替代化學(xué)脫膠廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中[4-6]。為了提高菌

7、株脫膠的能力,一個(gè)重要方法是進(jìn)行誘變育種。而選用合適的誘變劑及特殊的篩選方法(即“篩子”)是提高誘變效果的關(guān)鍵所在。本研究試圖對(duì)篩選得到的一株苧麻脫膠菌分別用紫外5作者簡(jiǎn)介:曾瑩(1953-),女,教授。研究方向?yàn)楫a(chǎn)酶菌株的選育。E-mail:zengyin1227@126.com線、硫酸二乙酯、亞硝酸作為誘變劑進(jìn)行誘變處理,以Nystatinr為標(biāo)記,定向篩選得到高活性苧麻脫膠菌。1.材料與方法1.1材料原麻未經(jīng)刮制的有殼苧麻由湖北省咸寧市天化麻業(yè)公司提

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