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《實(shí)驗(yàn)室常用培養(yǎng)基的配制方法》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、實(shí)驗(yàn)室常用培養(yǎng)基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100mg/ml)組份濃度100mg/mlAmpicillin配制量50ml配制方法1.稱量5gAmpicillin置于50ml離心管中。2.加入40ml滅菌水，充分混合溶解后，定容至50ml。3.用0.22μm過濾膜過濾除菌。4.小份分裝(1ml/份)后，-20℃保存。IPTG(異丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24mg/ml)組份濃度24mg/mLIPTG配制量50mL配制方法1.稱1.2gIPTG置于50ml離心管中。2.加入40ml滅菌水，充分混合溶解后，定容至50ml。
2、3.用022μm過濾膜過濾除菌。4小份分裝(1ml，份)后，-20℃保存。X-Gal(20mg/ml)組份濃度20mg/mlX-Gal配制量50ml配制方法1.稱量lgX-Gal置于50ml離心管中。2.加入40mlDMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解后，定容至50ml。3.小份分裝(1ml/份)后，-20℃避光保存。LB培養(yǎng)基組份濃度1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨)，0.5%(W/V)YeastExtract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl配制量1L配制方法1.稱取下列試劑，置于lL燒杯中。Tryptone10gYeas
3、tExtract5gNaCl10g2.加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?.滴加5NNaOH(約0.2m1)，調(diào)節(jié)pH值至7.0。4.加去離子水將培養(yǎng)基定容至1L。5高溫高壓滅菌后，4℃保存。1.2%(W/V)Tryptone2.4%(W/V)YeastExtract0.4%(V/V)Glycerol17mMKH2PO472mMK2HPOaTB培養(yǎng)基組份濃度配制量1L配制方法1.配制磷酸鹽緩；中液(0.17MKH2PO4，0.72MK2HPO4)100ml。溶解2.31gKH2PO4和l2.54gK2HPO4于90ml的去離子水中
4、，攪拌溶解后，加去離子水定容至100ml，高溫高壓滅菌。2.稱取下列試劑，置于lL燒杯中。Tryptone12gYeastExtract24gGlycerol4m3.加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?.加去離子水將培養(yǎng)基定容至1L后，高溫高壓滅菌。5.待溶液冷卻至60℃以下時(shí)，；加入100ml的上述滅菌磷酸鹽緩沖液。6.4℃保存。SOB培養(yǎng)基組份濃度2%(W/V)Tryptone0.5%(W/V)YeastExtract0.05%(W/V)NaCl2.5mMKCl10mMMgCl2配制量1L配制方法1.配制250mMKCl溶液。
5、在90ml的去離子水中溶解l.86gKCl后，定容至100ml。2.配制2MMgCl2溶液。在90ml去離子水中溶解19gMgCl2后，定容至100ml，高溫高壓滅菌。3.稱取下列試劑，置于lL燒杯中。Tryptone20gYeastExtract5gNaCl0.5g4.加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?.量取10m1250mMKCl溶液，加入到燒杯中。6.滴加5NNaOH溶液(約0.2m1)，調(diào)節(jié)pH值至7.0。7.加入去離子水將培養(yǎng)基定容至lL。8.高溫高壓滅菌后，4℃保存。9.使用前加入5ml滅菌的2MMgCl2溶液。SO
6、C培養(yǎng)基組份濃度2%(W/V)Tryptone0.5%(W/V)YeastExtract0.05%(W/V)NaCl2.5mMKCl10mMMgCl220mMGlucose配制量100mL配制方法1.配制lMGlucose溶液。將18gGlucose溶于90ml去離子水中，充分溶解后定容至100ml。用0.22μm濾膜過濾除菌。2.向l00mlSOB培養(yǎng)基中加入除菌的1MGlucose溶液2ml，均勻混合。3.4℃保存。RM培養(yǎng)基組份濃度1%(W/V)YeastExtract0.2%(W/V)KH2PO42%(W/V)Glucose配制量
7、100mL配制方法1.配制50%Glucose溶液。將200gGlucose溶于300ml去離子水中，充分溶解后定容至400ml。用0.22μm濾膜過濾除菌。2.向96mlRM培養(yǎng)基中加入除菌的50%Glucose溶液4ml，均勻混合。3.4℃保存。抗生素的貯存溶液及其工作濃度抗生素貯存液*1工作濃度濃度保存條件嚴(yán)緊型質(zhì)粒松弛型質(zhì)粒氨芐青霉素羧芐青霉素氯霉素卡那霉素鏈霉素四環(huán)素*250mg/ml(溶于水)-20℃50mg/mL(溶于水)-20℃34mg/mL(溶于乙醇)-20℃10mg/mL(溶于水)-20℃10mg/mL(溶于水)-20
8、℃5mg/mL(溶于乙醇)-20℃20μg/ml60μg/ml20μg/ml60μg/ml25μg/mll70μg/mL10μg/ml50μg/ml10μg/ml50μg/ml10μg/ml5
