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《酸法提取斑點叉尾鮰魚皮膠原工藝的條件優(yōu)化》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、第25卷第2期安徽工程科技學院學報Vol.25.No.22010年6月JournalofAnhuiUniversityofTechnologyandScienceJun.,2010文章編號:16722477(2010)02002204酸法提取斑點叉尾鮰魚皮膠原工藝的條件優(yōu)化*劉海濤,陶玉貴,陳靜穎,王其進,谷浩(安徽工程大學生物與化學工程學院,安徽蕪湖241000)摘要:采用酸法從人工養(yǎng)殖的鮰魚皮中提取膠原,并研究了酸的種類、酸的濃度、料液比、提取時間和提取溫度對膠原提取率的影響.正交實驗研究結果表明
2、,最適提取工藝條件為:乙酸濃度1.0mol/L,固液比130,提取時間72h,在5下提取得率為33.79%,提取膠原的最大紫外吸收波長為236nm,和標準品紫外吸收波長基本一致.關鍵詞:鮰魚皮;膠原;酸法;提取中圖分類號:TS209文獻標識碼:A膠原是!細胞外基質(ECM)的結構蛋白質,含有一個或幾個由鏈組成的三螺旋結構的區(qū)域,即膠原[1]域?.膠原廣泛存在于動物的皮、骨、肌腱、韌帶和血管中,起著支撐器官、保護機體的,現(xiàn)已被廣泛應用于[24][5]生物醫(yī)學材料、美容保健、食品、制革等眾多領域.目前,全世界魚類加工
3、廢棄物約有730萬t,不僅污染環(huán)境,而且是資源的巨大浪費,而魚皮等廢棄物中含有大量的膠原,因此如能將這些廢棄物綜合利用,就可以達到雙贏的目的.膠原的提取方法主要分為酸法、堿法、酶法、鹽法以及熱水浸提法等5類.堿法和熱水浸提法提取的膠原3股螺旋結構得不到保留;鹽法可降低其構象穩(wěn)定性;酶解法水解膠原仍有完整的3股螺旋結構,但是滅酶所需的高溫則可能導致膠原變性.酸法是提取膠原比較常用和有效的方法,常用的酸有乙酸、鹽酸、檸檬酸和乳酸等.其原理是在低離子濃度酸性條件下破壞膠原纖維分子間的鹽鍵和Schiff堿,引起纖維膨[67]脹、溶解,
4、用酸法提取的膠原最大程度的保持了其3螺旋結構.Nagai等從小須鯨的皮中得到28.4%(以濕基計)的酸溶性膠原蛋白,并發(fā)現(xiàn),在日本黑鱸、鮭魚、和大頭鯊的魚皮中膠原的含量分別是51.4%、[8]49.8%和50.1%(干基).丁卓平等通過酸法提取羅非魚魚皮膠原的含量達61.34%.Zhou和Regen[9]+stein研究發(fā)現(xiàn)鱈魚皮膠原的產量從3%~19%不等,且其產量受預處理溫度和H濃度的影響較大.而[10]Gudmundsson和Hafsteinsson通過利用不同濃度的硫酸、檸檬酸、氫氧化鈉對鱈魚皮進行預處理,其鱈魚皮膠原
5、產量達到了11%~14%.斑點叉尾鮰魚(Ictaluruspunctatus),占全美淡水養(yǎng)殖總產量的一半以上.我國于1984年由湖北省水產科學研究所從美國引進并在全國推廣,據中國漁業(yè)協(xié)會鮰魚產業(yè)分會分析,2007年全年出口達2.88萬[11]t,其中廢棄魚皮量達3000t,是開發(fā)膠原潛在資源.本文以斑點叉尾鮰魚皮為研究對象,利用酸法提取鮰魚皮中膠原,并對膠原的提取工藝條件進行了優(yōu)化,為鮰魚加工產生的廢棄物資源的充分開發(fā)利用提供理論參考.1材料與方法1.1實驗材料斑點叉尾鮰魚皮:巢湖富煌三珍有限公司提供;氯氨T晶體:國藥集團
6、化學試劑有限公司;L()羥脯氨酸標準品:國藥集團化學試劑有限公司;對二甲氨基苯甲醛:國藥集團化學試劑有限公司;無水乙醚:分析純;UV757CRT型紫外可見分光光度計:上海精密科學儀器有限公司;BECKMAN臺式高速離心機:湖南凱達科學儀器有限公司;K2300全自動凱氏定氮儀:瑞典FOSS公司.收稿日期:20100107基金項目:安徽省自然科學研究重點基金資助項目(kj2008a078)作者簡介:劉海濤(1977),男,安徽淮北人,講師,碩士研究生.通訊作者:陶玉貴(1965),男,安徽無為人,教授,碩導.第2期劉海
7、濤,等:酸法提取斑點叉尾鮰魚皮膠原工藝的條件優(yōu)化?23?1.2實驗方法(1)鮰魚皮的預處理.將-20凍藏的鮰魚皮置于4下流水解凍,剔除碎肉、脂肪及結締組織等雜質.然后剪成約1mm#5mm碎魚皮塊,用10%正丁醇溶液浸泡,去除脂肪,洗滌至中性后再用0.1mol/LNaOH溶液短時浸泡,除去可溶性的非膠原蛋白,反復洗滌至中性,最后凍干備用.(2)鮰魚皮中膠原的提取.取預處理好的碎鮰魚皮(干)與適量酸共混浸提,設置不同浸提條件,通過測定浸提液來測定膠原的提取率.浸提結束后,將得到的濾液,加入NaCl鹽析,緩慢攪拌,使NaCl終濃度達
8、2.5mol/L.靜置24h后,于4下12000r/min離心30min,取沉淀以1.0mol/L乙酸復溶后,重復NaCl鹽析,直至所得沉淀能全部溶解在乙酸中,最后將沉淀轉入透析袋透析,至無氯離子檢出.取出透析袋中的膠原溶液,冷凍干燥,得到純白色的膠原.(3)酸
