阿霉素對(duì)K562細(xì)胞Gfi1表達(dá)的影響及其與相關(guān)凋亡基因關(guān)系的研究

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1、阿霉素對(duì)K562細(xì)胞Gfi1表達(dá)的影響及其與相關(guān)凋亡基因關(guān)系的研究作者：常偉　孫漢英　黃敏　周劍鋒張義成【摘要】　　本研究探討阿霉素體外作用于K562細(xì)胞的細(xì)胞效應(yīng)及癌基因Gfi1和相關(guān)凋亡基因表達(dá)變化的機(jī)制。用不同濃度的阿霉素作用于K562細(xì)胞24小時(shí),然后應(yīng)用DNA電泳和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)K562細(xì)胞凋亡;用RTPCR、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Gfi1、Bcl2、bax基因和蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果表明：當(dāng)阿霉素濃度在0、、mg/L作用K56細(xì)胞24小時(shí),細(xì)胞凋亡增加,可見典型的DNA斷裂電泳條帶;同時(shí),當(dāng)ADM濃度自增為mg/L時(shí),Gfi1表達(dá)減少,bax表達(dá)增加;Bcl

2、2表達(dá)在ADMmg/L之間變化不明顯,mRNA及蛋白水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；當(dāng)阿霉素濃度大于mg/L時(shí),細(xì)胞凋亡率并不增加,而是下降,且出現(xiàn)細(xì)胞壞死。結(jié)論：　一定濃度阿霉素能誘導(dǎo)K56細(xì)胞凋亡,細(xì)胞凋亡率表達(dá)的變化與阿霉素濃度呈一定的量效依賴關(guān)系,阿霉素誘導(dǎo)K56細(xì)胞凋亡可能與抑制Gfi1基因的表達(dá)和激活bax基因的表達(dá)有一定的關(guān)系?！娟P(guān)鍵詞】阿霉素　K56細(xì)胞；　細(xì)胞凋亡；　Gfi1；Bcl；　baxEffectofAdriamycinonGfi1ExpressioninK56CellsandItsRelationshipwiththeRelevantApoptot

3、icGenesAbstractThestudywaspurposedtoexploretheeffectofadriamycin(ADM)onK56cellsinvitroandthemechanismofexpressionchangesofrelevantapoptoticgenesandoncogeneGfi1.　Theapoptosiswasassayedbyflowcytometry(FCM)andtheDNAelectrophoresis;theexpressionchangesofGfi1、Bcl2、baxmRNAandprotEinweredetec

4、tedbyRTPCRandFCMafterK56cellsweretreatedwithdifferentconcentrationsofADMforhours.TheresultsshowedthatwhenK56cellsweretreatedwithmg/LADMforhours,thetypicalapoptoticDNAelectrophoresisbandofK56cellswereobservedwiththedoseincreasing.WhenconcentrationofADMwasmg/L,theexpressionofGfi1decreased

5、andtheexpressionofbaxincreased;whenconcentrationofADMwasmg/L,theexpressionofBclwasnotfoundtobesignificantlychanged,thelevelsofBclmRNAandprotEInwereofnostatisticaldifference.WhendoseofADMwashighermg/L,thepercentageofapoptoticK56cellsdecreasedwithcellnecrosis.Itisconcludedthatatcertainran

6、geofconcentration,apoptosisornecrosisofK56cellscanbeinducedbyADM,thepercentageofapoptosis,thechangesofexpressionofBcl2,baxandGfi1dependonthedoseofADM.ThemechanismofapoptosisinK56cellsinducedbyADMmayberelatedtosuppressionofGfi1oncogeneandactivationofexpressionofbaxgene.KeywordsADM;K562;

7、apoptosis;Gfi1;Bcl2;baxJExpHematol007;15(2):278-282阿霉素在細(xì)胞凋亡中起著重要的作用,國(guó)內(nèi)外有不少學(xué)者利用阿霉素成功地誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡，但對(duì)其作用機(jī)制還不完全清楚。為此,我們利用阿霉素誘導(dǎo)急性髓系白血病細(xì)胞株K562細(xì)胞凋亡,旨在了解阿霉素對(duì)細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制,為今后臨床血液系統(tǒng)腫瘤的治療提供理論的依據(jù)。材料和方法試劑和細(xì)胞系K562細(xì)胞由我院免疫學(xué)教研室提供,胎牛血清為杭州四季青公司產(chǎn)品,阿霉素購(gòu)自意大利Pharmacia公司,RPMI1640購(gòu)于美國(guó)Gibco公司,碘化丙