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《工學(xué)微生物12革蘭陽性需氧和兼性厭氧桿菌自制課件》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、第十二章革蘭陽性需氧和兼性厭氧桿菌本章內(nèi)容革蘭陽性無芽胞桿菌白喉棒狀桿菌產(chǎn)單核細胞李斯特菌紅斑丹毒絲菌革蘭陽性需氧芽胞桿菌屬炭疽芽胞桿菌蠟樣芽胞桿菌教學(xué)要求掌握白喉棒狀桿菌、炭疽芽孢桿菌生物學(xué)性狀與微生物學(xué)檢驗。熟悉產(chǎn)單核細胞李斯特菌的生物學(xué)性狀與微生物學(xué)檢查法。了解紅斑丹毒絲菌、蠟樣芽胞桿菌的生物學(xué)性狀與微生物學(xué)檢查第一節(jié)革蘭陽性無芽胞桿菌（一）生物學(xué)特性1.形態(tài)結(jié)構(gòu)：革蘭氏染色陽性，菌體細長彎曲，一端或兩端膨大呈棒狀，常排列呈V、L等文字形。無鞭毛、無莢膜、無芽胞。用亞甲藍或奈瑟染色，菌體一端、兩端或
2、中央可見明顯的濃染顆粒，稱為異染顆粒，主要成分是核糖核酸和多磷酸鹽。一、白喉棒狀桿菌電鏡下的白喉桿菌形態(tài)與染色革蘭染色白喉棒狀桿菌2.培養(yǎng)特性：本菌為需氧或兼性厭氧菌。對營養(yǎng)要求較嚴格，在一般培養(yǎng)基上不生長。在呂氏血清斜面上生長快，菌落為細小有光澤、圓形、灰白色、凸起、光滑的菌落；涂片染色菌體形態(tài)典型、異染顆粒明顯。在亞碲酸鉀血平板上，可形成黑色或灰黑色菌落。此培養(yǎng)基可作為選擇和鑒定之用。在麥康凱平板上不生長。血平板上菌落亞碲酸鉀血平板菌落：3.生化反應(yīng)發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。觸酶和硝酸鹽還原試驗
3、陽性，氧化酶陰性。不分解尿素，不產(chǎn)生吲哚。4.抵抗力對熱抵抗力強，煮沸1分鐘死亡。對干燥、寒冷和日光的抵抗力較其他無芽胞細菌強，對一般消毒劑敏感。（二）微生物學(xué)檢驗標本的采集鑒定直接涂片分離培養(yǎng)毒力試驗用無菌長棉拭子從疑為假膜的邊緣采取分泌物，也可采取鼻咽部或扁桃腺分泌物。作培養(yǎng)時應(yīng)在抗生素前采取，如不能立即送檢，應(yīng)將標本浸于無菌生理鹽水或15%甘油中，標本應(yīng)取雙份。1.標本的采集2.鑒定直接涂片染色鏡檢革蘭染色：觀察形態(tài)、染色異染顆粒染色：觀察異染顆粒初步報告：檢出具有異染顆粒的革蘭陽性桿菌分離培養(yǎng)：同
4、時接種血平板及呂氏斜面或亞碲酸鉀血平板呂氏斜面：生長迅速，涂片鏡檢異染顆粒明顯亞碲酸鉀血平板：黑色菌落鑒定要點革蘭陽性，著色不均勻，菌體細長彎曲，排列不規(guī)則，有X、V形態(tài)，具有異染顆粒觸酶陽性，無動力，無芽胞呂氏血清斜面的菌落：灰白色、隆起、濕潤亞碲酸鉀血平板的菌落：黑色或灰黑色毒力試驗人類臨床標本中檢出白喉棒狀桿菌，并非都能產(chǎn)生毒素，產(chǎn)生外毒素的菌株是由于攜帶β-棒狀桿菌噬菌體。可用Elek瓊脂擴散法體外試驗或用動物體內(nèi)毒力測定。(1)瓊脂平板毒力試驗：將含有20％牛血清肉湯瓊脂注于平皿中，將浸有l(wèi)OO
5、u／ml抗毒素血清的濾紙條沉于瓊脂內(nèi)，在與濾紙條垂直方向?qū)⒋龣z菌劃線接種，同時接種標準產(chǎn)毒株作為陽性對照。37℃培養(yǎng)24—48h，若菌苔兩側(cè)出現(xiàn)斜向外側(cè)延伸的乳白色沉淀線，并與其鄰近的標準產(chǎn)毒株的沉淀線相吻合，則為產(chǎn)毒株。Elek平板試驗結(jié)果沉淀線(陽性)含白喉抗毒素濾紙片白喉桿菌菌苔(2)動物試驗采用家兔皮內(nèi)試驗法。取待檢菌的48h肉湯培養(yǎng)液O．2ml，注射在去毛的一側(cè)體壁皮內(nèi)，5h后注射500U白喉抗毒素血清，30min后再次注射同樣的培養(yǎng)液于動物去毛的另一側(cè)體壁皮內(nèi)作為對照。經(jīng)24—72h后，若注射
6、抗毒素前接種培養(yǎng)液的部位發(fā)生紅腫與壞死，而對照部位不發(fā)生任何變化，則說明待檢菌株具有毒力。（三）臨床意義傳染源：患者或帶菌者致病物質(zhì)：白喉外毒素（由攜帶β-棒狀桿菌噬菌體的白喉桿菌產(chǎn)生）經(jīng)呼吸道飛沫感染，引起白喉。假膜脫落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用二、產(chǎn)單核細胞李斯特菌（一）生物學(xué)特性（二）微生物檢驗（三）臨床意義（一）微生物特性形態(tài)與染色：G+短小桿菌或球桿菌，常成雙排列，無芽胞培養(yǎng)特性：最適30～37℃，4℃能生長，在血
7、瓊脂平板上，形成較小、圓形、光滑而有狹窄β-溶血環(huán)的菌落，耐8.5%NaCl，半固體培養(yǎng)中動力陽性（倒傘形，是本菌特征之一）。生化反應(yīng)：觸酶（+），甲基紅（+），VP（+），CAMP（+），發(fā)酵葡萄糖、果糖、麥芽糖等，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（二）微生物學(xué)檢驗標本采集：血液、腦脊液、分泌物及病變組織等鑒定：直接涂片：腦脊液離心后取沉淀涂片，其它直接涂片分離培養(yǎng)：腦脊液：血瓊脂平板血標本：增菌后，再接種血瓊脂平板咽拭子、組織和糞便等：接種于肉湯培養(yǎng)基中，置于4℃冰箱中冷增菌，然后轉(zhuǎn)種于血瓊脂平板（二）微生物學(xué)檢驗鑒定特點
8、：G+桿菌，細菌在濕片中呈翻筋斗運動，觸酶陽性等（三）臨床意義李斯特菌屬有7個種，只有該菌對人和動物致病分布廣泛，土壤、水、植物、人和動物糞便中均存在，亦可自甲殼動物、蠅、蜱中分離出能引起多種野生動物和家畜感染（羊、馬、狗、貓、鳥、魚等）正常人糞便帶菌率達10%左右，70%的人可短期帶菌。新生兒、免疫功能降低者，易受該菌感染健康帶菌者是主要的傳染源污染食物，糞-口途徑傳播，通過腸道擴散全身胎盤和產(chǎn)道——感染新生兒接觸病畜及產(chǎn)品
