生化基礎(chǔ)知識(shí)-比色法

生化基礎(chǔ)知識(shí)-比色法

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1、比色法原理(分光光度法)多么美麗五彩斑斕的春天啊為什么上述溶液呈現(xiàn)不同的顏色?自然光-赤橙黃綠青藍(lán)紫波長決定顏色光譜-連續(xù)不同波長光的集合物質(zhì)對(duì)不同波長光的選擇性吸收由于物質(zhì)對(duì)不同波長光的選擇性吸收而引起,物質(zhì)呈現(xiàn)的是被吸收顏色的互補(bǔ)色。單色光互補(bǔ)光復(fù)色光現(xiàn)在知道她的秘密了嗎?腦筋急轉(zhuǎn)彎1、紅光照射紅色溶液,看透過什么色?2、紅光照射綠色溶液,看透過什么色?透光度(透射比)Transmittance透光度定義:T取值為0.0%~100.0%全部吸收T=0.0%全部透過T=100.0%吸光度定義:T、A與顏色的關(guān)系---------------------透光率(T)吸光度(A)--

2、-------------------10.0000.750.1250.50.3010.250.6020.170.7700.11.0000.051.3010.012.0000.0013.000---------------------?測(cè)量物質(zhì)光吸收的裝置-比色計(jì)比色計(jì)或分光光度計(jì)物質(zhì)的光吸收曲線-定性分析吸光度與光徑的關(guān)系吸光度與濃度的關(guān)系朗伯-比爾定律:A=-lgT=KCL透光度(transmittance,T,透射率)T=It/I0吸光度(absorbance,A)光密度(opticaldensity,D或OD)A=-lgT=lgI0/ItLamb-beer定律:A=KCLK

3、為吸光系數(shù),C為濃度,L為光徑cm摩爾吸光系數(shù)ε:當(dāng)C=1mol/L,L=1cm,A=ε比色定量——與標(biāo)準(zhǔn)濃度物質(zhì)溶液比較目視比色法觀察方向空白c1c2c3c4比色計(jì)或分光光度計(jì)比色法成立的基礎(chǔ)有色或有吸收單色光

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