對(duì)低溫脅迫下蘿卜幼苗逆境指標(biāo)的影響

對(duì)低溫脅迫下蘿卜幼苗逆境指標(biāo)的影響

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1、Ca2+對(duì)低溫脅迫下蘿卜幼苗逆境指標(biāo)的影響-農(nóng)學(xué)論文Ca2+對(duì)低溫脅迫下蘿卜幼苗逆境指標(biāo)的影響葉亞新1,楊玲玲1,朱勇良2(1.蘇州科技學(xué)院化學(xué)生物與材料工程學(xué)院,江蘇蘇州215009;2.江蘇省太湖地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,江蘇蘇州215155)摘要:以蘿卜(RaphanussativusL.)幼苗為材料,研究外源Ca2+對(duì)低溫脅迫下蘿卜幼苗逆境指標(biāo)可溶性糖、丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)含量、過氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響。結(jié)果表明,在低溫脅迫下,MDA、可溶性糖以及Pro的含量明顯上升,SOD和

2、POD活性先下降再上升。用不同濃度的Ca2+處理后,可溶性糖和MDA的含量相對(duì)對(duì)照組在處理后的第1天有所下降,而Pro的含量增加,POD和SOD的活性變化則與處理的時(shí)間有關(guān)。用適當(dāng)濃度的Ca2+處理可以增強(qiáng)蘿卜幼苗對(duì)低溫的抗性,降低低溫對(duì)蘿卜幼苗的傷害。關(guān)鍵詞:低溫脅迫;Ca2+;逆境指標(biāo);蘿卜(RaphanussativusL.)幼苗中圖分類號(hào):S631.1;Q945.78文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2015)07-1612-06DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.

3、07.021低溫對(duì)植物的毒害效應(yīng),按低溫程度和受害情況,可分為冷害和凍害。冷害是指溫度在零攝氏度以上時(shí),雖無結(jié)冰現(xiàn)象,仍能使喜溫植物受害甚至死亡,即零攝氏度以上的低溫對(duì)植物的傷害。冷害是喜溫植物北移的主要障礙,是喜溫作物穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的主要限制因子。近年來發(fā)現(xiàn),低溫引發(fā)的細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平升高,在抗寒鍛煉中起著十分重要的作用。Ca2+充當(dāng)?shù)蜏匦盘?hào)的傳遞信使,啟動(dòng)抗寒鍛煉,誘導(dǎo)抗寒基因的表達(dá)[1-4]。利用水母發(fā)光蛋白的轉(zhuǎn)基因植物測定Ca2+濃度等研究揭示和證實(shí),低溫條件下由于質(zhì)膜上電壓門控Ca2+通道的開放而導(dǎo)致了Ca2+的流入[

4、5]。植物細(xì)胞膜感受到低溫后,將低溫信號(hào)通過Ca2+、ABA(脫落酸)等第二信使繼續(xù)向下游傳遞,其中Ca2+是低溫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)重要的第二信使[6]。張國增等[7]在研究低溫脅迫下擬南芥CBF1超表達(dá)突變體胞質(zhì)中Ca2+濃度的變化時(shí)發(fā)現(xiàn),Ca2+參與了CBF1應(yīng)答低溫信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,且CBF1超表達(dá)突變體可能是通過提高胞質(zhì)Ca2+的濃度來提高植物的抗低溫脅迫能力。由此看來,Ca2+作為胞內(nèi)的第二信使在低溫脅迫下發(fā)揮著調(diào)控細(xì)胞的重要功能。Ca2+不僅在增強(qiáng)植物抵抗非生物逆境時(shí)具有重要作用,它在增強(qiáng)植物抗生物逆境如抗病防衛(wèi)反應(yīng)中也有

5、重要作用[8]。為此,試驗(yàn)通過測定CaCl2處理后蘿卜(RaphanussativusL.)幼苗的丙二醛(MDA)、可溶性糖和脯氨酸(Pro)濃度變化以及過氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力變化,探討外源鈣離子(Ca2+)提高植物抵抗低溫脅迫以及其他脅迫的積極作用,旨在為進(jìn)一步研究Ca2+增強(qiáng)植物抗逆性的機(jī)理提供依據(jù)。1材料與方法1.1種子來源富農(nóng)正宗圓紅蘿卜,由蘇州種子公司提供。1.2蘿卜幼苗的培養(yǎng)和試驗(yàn)處理1.2.1蘿卜幼苗的培養(yǎng)將蘿卜種子用60~70℃的去離子水清洗數(shù)次,倒去漂浮的種子并將爛種、雜種挑去

6、。淘洗后置于干凈的培養(yǎng)皿中待用。將種子播于底部放置濕濾紙的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中放一定量的種子,然后在種子上方覆蓋1張濕濾紙,加少量的去離子水(半浸沒種子),蓋好培養(yǎng)皿。最后置于25℃的恒溫箱中催芽。等到芽苗長至2~3cm時(shí)撤掉上方濾紙,置于光照培養(yǎng)室中加完全培養(yǎng)液[9]進(jìn)行培養(yǎng),當(dāng)幼苗莖長至10cm左右時(shí)將所有幼苗轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶中,瓶壁避光。待幼苗長出第3片真葉時(shí)即進(jìn)行脅迫試驗(yàn)。在蘿卜幼苗的水培期間要保證培養(yǎng)液充足,并保持清潔。1.2.2試驗(yàn)處理1)溫度的選擇。參考文獻(xiàn)[10]和[11],確定以5℃作為試驗(yàn)的處理溫度。2)試

7、驗(yàn)處理。將蘿卜幼苗分組,A——利用完全培養(yǎng)液培養(yǎng);B——5mmol/LCaCl2完全培養(yǎng)液培養(yǎng);C——10mmol/LCaCl2完全培養(yǎng)液培養(yǎng);D——15mmol/LCaCl2完全培養(yǎng)液培養(yǎng),置于5℃、光照度33%、白天14h、晚上10h的恒溫培養(yǎng)箱中;另取適量幼苗置于25℃、光照度33%、白天14h、晚上10h的恒溫培養(yǎng)箱中,作為常溫對(duì)照,試驗(yàn)期間保證幼苗水培營養(yǎng)液充足。然后在培養(yǎng)1、2、3、4、5d時(shí)分別測定兩組幼苗的可溶性糖、MDA、Pro含量以及POD和SOD活性[11]。1.3指標(biāo)測定及方法可溶性糖、MDA、Pro

8、含量,POD、SOD活性的測定參考文獻(xiàn)[9]和[12]進(jìn)行。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS11.0進(jìn)行分析處理。2結(jié)果與分析2.1低溫脅迫對(duì)蘿卜幼苗逆境指標(biāo)的影響2.1.15℃和25℃下蘿卜幼苗葉片中可溶性糖含量的變化在5℃和25℃下分別測得蘿卜幼苗葉片中1、2、3、4、5d后可溶性糖含量的

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