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《斜紋夜蛾論文：斜紋夜蛾 caspase rt-pcr 基因 race》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、斜紋夜蛾論文：斜紋夜蛾Splicaspase-1基因的克隆及分析【中文摘要】細(xì)胞凋亡(Apoptosis)是當(dāng)前生命科學(xué)研究的熱門領(lǐng)域,在哺乳動物和線蟲的凋亡機制方面已取得較大進展,但對于昆蟲細(xì)胞凋亡的信號途徑仍有許多問題有待探究。細(xì)胞凋亡的分子機制在生物進化整個過程中高度保守,昆蟲細(xì)胞凋亡途徑與哺乳動物凋亡途徑有許多相似之處,也有不相同的地方。在對昆蟲模式生物果蠅和哺乳動物細(xì)胞凋亡途徑的比較研究中發(fā)現(xiàn)的不同,對細(xì)胞凋亡的發(fā)展提出了新的視角。本文主要克隆鱗翅目斜紋夜蛾(Spodopteralitura)Caspase基因的全長cDNA,以期望能對進一
2、步探索該基因在細(xì)胞凋亡中的作用和找到與調(diào)控Caspase活性相關(guān)的蛋白提供重要線索。本實驗從蓮紋夜蛾(Spodopteralittoralis)和草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda)序列出發(fā),根據(jù)其中保守性高的序列設(shè)計引物,提取SL-1細(xì)胞中的總RNA,并進行逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴增,首先獲得了一條419bp的cDNA片段,并以此序列為基礎(chǔ)設(shè)計了幾組3’-和5’-RACE的基因特異性引物,然后采用SMARTRACE技術(shù)克隆了SpodopteralituraCasp的3’末端和5’末端,通過序列拼接,得到的...【英文摘要】Apoptosi
3、sisthecurrenthotareasoflifescienceresearch.ThemechanismofapoptosisinmammalsandC.eleganshasmadegreatprogress.,butfortheinsectcellapoptosissignalingpathwaysarestillmanyissuestobeexploring.Themolecularmechanismofapoptosisintheprocessofbiologicalevolutionishighlyconserved.Therearem
4、anysimilaritiesbetweeninsectcellsapoptosispathwayandthatofmammalian.ThedifferencesintheapoptosispathwaybetweenDrosophilamelanogasterandmammalsarefound,wh...【關(guān)鍵詞】斜紋夜蛾CaspaseRT-PCR基因RACE【英文關(guān)鍵詞】SpodopteralituraCaspaseRT-PCRgeneRACE【目錄】斜紋夜蛾Splicaspase-1基因的克隆及分析中文摘要4-5Abstract51.前言8
5、-161.1細(xì)胞凋亡8-91.1.1細(xì)胞凋亡概念81.1.2細(xì)胞凋亡特征81.1.3細(xì)胞凋亡與細(xì)胞程序性死亡81.1.4細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別8-91.2CASPASE9-121.2.1Caspase特性及分類9-101.2.2Caspases家族成員10-111.2.3啟動Caspase111.2.4鱗翅目昆蟲的凋亡效應(yīng)因子111.2.5Caspase在細(xì)胞凋亡中有重要作用11-121.3昆蟲細(xì)胞凋亡的信號通路12-141.3.1類似于哺乳動物細(xì)胞的凋亡通路12-141.3.2線蟲細(xì)胞的凋亡信號通路141.4本研究的目的和意義14-162.實驗材
6、料和方法16-272.1實驗材料16-182.1.1昆蟲細(xì)胞162.1.2菌種162.1.3主要試劑與試劑盒162.1.4試劑的配置16-182.1.5主要儀器設(shè)備182.2實驗操作以及方法18-272.2.3Trizol法提取細(xì)胞總RNA182.2.4RT-PCR法對目的基因Caspase擴增18-212.2.5RACE法對斜紋夜蛾Caspase基因cDNA擴增21-273.實驗結(jié)果27-353.1SL-1總RNA電泳檢測273.2SL-1的CASPASE基因片段的PCR擴增及序列測定27-293.3SL-1CASPASEcDNA3’末端擴增29-
7、303.4SL-1CASPASEcDNA5’末端擴增30-313.5cDNA全長與分析313.6序列比對及分析31-353.6.1同源性比較31-343.6.2系統(tǒng)發(fā)育分析34-354.討論35-37參考文獻37-41致謝41
