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《高效液相色譜法測定廣西粉葛中葛根素的含量》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、高效液相色譜法測定廣西粉葛中葛根素的含量:楊立芳,李小燕,羅偉強(qiáng),潘洪平,鄧光輝,韋冬萍【關(guān)鍵詞】廣西粉葛;,,葛根素;,,高效液相色譜法 摘要:目的采用HPLC法測定廣西粉葛中葛根素的含量。方法色譜柱PhenomenexGeminiC18柱(250mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B),采用梯度洗脫;流速:1.0ml/min;檢測波長:250nm;柱溫:30℃。結(jié)果葛根素在800~2400ng范圍內(nèi)峰面積與進(jìn)樣量呈良好的線性關(guān)系?;貧w方程為A=7.682×104C+5.885×104,r=0.
2、9993(n=5)。其平均回收率為99.49%,RSD為0.75%(n=5)。結(jié)論該方法簡便易行,結(jié)果準(zhǔn)確,可作為廣西粉葛藥材質(zhì)量控制的有效方法?! £P(guān)鍵詞:廣西粉葛;葛根素;高效液相色譜法 DeterminationofPuerarininContentinGuangxiRadixpuerariaethomsoniibyHPLC Abstract:ObjectiveTodeterminethecontentofpuerarinfromGuangxiRadixpuerariaethomsoniibyHPLC.MethodsTh
3、eisolationenexgeminiC18column(250rmm×4.6mm,5μm),themobilephaseconsistedofacetonitnle(A)-0.4%phosphoricand(B)inagradientmodel,theflol/min,thedetectionandthecolumntemporatureethodissimple,rapid,accurateandreliable.ItcanbeusedforqualitycontrolofGuangxiRadixpuerariaethoms
4、onii. Keysonii;Puerarin;HPLC 粉葛為豆科植物甘葛藤(PuerariathomsoniiBenth)的干燥根。收載于《中國藥典》各版[1]。主含異黃酮成分葛根素(Puerarin)、葛根素木糖苷(Puerarin―xyloside)、大豆黃酮(Daidzein)、大豆黃酮苷(Daidzein)及多量淀粉等[2],具有解肌退熱、生津、透疹、生陽止瀉之功效[3]。葛根素是粉葛藥材中的主要活性成分之一,具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈,降低血壓,減少心肌耗氧量;抗心率失常;降血糖,降血脂;抗動(dòng)脈硬化,改善微循環(huán);抗腫瘤等多
5、種藥理作用[4]。為此,粉葛越來越受到人們的重視。本文采用適宜的提取方法,通過HPLC法對廣西不同產(chǎn)地粉葛中葛根素進(jìn)行含量測定,可較全面地評價(jià)廣西粉葛藥材質(zhì)量,為廣西粉葛藥材的開發(fā)和應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)?! ?儀器與試藥 美國PerkinElmerSeries200液相色譜儀;紫外檢測器;葛根素對照品(中國藥品生物制品鑒定所批號(hào):110752-2004110);乙腈為色譜純;水為超純水。其余試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)所用粉葛藥材(產(chǎn)地:廣西)經(jīng)廣西南寧食品藥品檢驗(yàn)所鑒定?! ?方法與結(jié)果 2.1色譜條件色譜柱:PhenomenexGe
6、miniC18柱(250mm×4.6mm,5μm);檢測波長:250nm;柱溫:30℃;進(jìn)樣量:20μl;理論板數(shù)按葛根素計(jì)算不低于5000。流動(dòng)相:乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B),流速:1.0ml/min。采用梯度洗脫,程序:0~5minA/B(0:100);5~25minA/B(11:89);25~40minA/B(17:83);40~50minA/B(35:65);50~70minA/B(78:22)?! ?.2對照品溶液的制備精密稱取20mg葛根素對照品,用30%乙醇超聲5min使溶解,定容至50ml容量瓶中搖勻,即
7、得(每毫升中含葛根素400μg)?! ?.3供試品溶液的制備取粉葛藥材粉末約1.0g(過2號(hào)篩),精密稱定,精密加入30%乙醇溶液50ml,稱定重量,用超聲清洗器進(jìn)行超聲提取1h,再次稱定重量,用30%乙醇溶液補(bǔ)足減失的重量,然后減壓過濾,取出濾液,用0.45μm水系微孔濾膜過濾,得供試品溶液?! ?.4系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)在“2.1”項(xiàng)色譜條件下,葛根素與相鄰峰可達(dá)到基線分離,分離度大于4.0,理論塔板數(shù)以葛根素計(jì)算為5000,色譜圖見圖1?! ?.5線性關(guān)系考查精密稱取20mg葛根素對照品,用30%乙醇溶解(需超聲5min),定容至
8、50ml容量瓶中制成貯備液。分別精確量取貯備液1.00,1.50,2.00,2.50,3.00ml定容至10ml,制成葛根素含量為40.00,60.00,80.00,100.0,120.0μg・ml-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液,各進(jìn)樣20μl,記錄