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1、宮頸癌與癌前病變組織中HPV廖林（四川省眉山市第二人民醫(yī)院/四川省眉山市仁壽縣人民醫(yī)院四川眉山620000）【摘要】目的：探索宮頸癌與癌前病變組織中的HPV-16整合感染狀態(tài)的研究。方法：對我院2009年1月~2014年12月接受的241例患者的宮頸病變組織的蠟塊進行研究，宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變（CIN）196例，其中CINI122例，CINII44例，CINIII30例；宮頸癌45例，取22例正常宮頸上皮作為對照組，對HPV-16感染標本的病毒整合狀態(tài)進行測定分析。結(jié)果：經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，在正常的宮頸組織、宮頸癌、CINI、CINII、CINIII組織中，HPV-16
2、的陽性檢出率分別為4.5%，66.7%，19.7%，34.1%，43.3%，不同組織的HPV-16的陽性檢出率均有明顯差異（P<0.05），CINIII的HPV-16整合的感染率（38.5%）明顯高于CINI、CINII（16.7%，20.2%，P<0.05），宮頸癌的HPV-16整合的感染率（60.0%）明顯高于CINI、CINII、CINIII（16.7%，20.2%，38.5%，P<0.05）。結(jié)論：宮頸疾病的病變程度與HPV-16整合感染狀態(tài)具有正相關(guān)的關(guān)系，在檢測的過程中輔助HPV感染狀態(tài)的檢測能提高對宮頸癌疾病的預(yù)測。.jyqka
3、npapilloma-virus，HPV）是發(fā)生宮頸癌的重要因素，有研究表明單純的HPV感染并不能導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生，DNA整合進入宿主細胞以及持續(xù)存在的高危型HPV是細胞變性的主要因素［2］。HPV整合可在不同的DNA開放讀碼框架處發(fā)生，由于其不穩(wěn)定性，E2基因鉸鏈區(qū)成為宿主細胞常見的斷裂或缺失部位［3，4］。在本次研究中，通過對E2基因缺失的檢測，來判斷HPV-16對臨床宮頸癌預(yù)測的作用和意義。1材料與方法1.1一般資料：對我院2009年1月~2014年12月接受的241例患者的宮頸病變組織的蠟塊進行研究，所有的病變組織均得到病理確認，患者年齡為（48.7±
4、15.3）歲，患者均已婚，本次研究均在家屬及患者知情的情況下，得到醫(yī)院倫理會的審核和批準。根據(jù)EM培養(yǎng)基，在飽和濕度、37℃、5%CO2的條件下進行培養(yǎng)。1.2方法：對病變組織切片的DNA進行提取并進行測量，利用Digene公司的HPV檢測盒并依照操作步驟對其進行檢驗。HPV-16的感染：①DNA水平：根據(jù)相關(guān)文獻，HPV引物序列為：下游為5’-TTATGGTTTCTGAGAACAGA-3’，上游為5’-AGAAACCCAGCTGTATCAT-3’。②蛋白質(zhì)水平：免疫組化SP法檢測切片組織中HV-16的表達。HPV-16整合的確認：通過重疊的PCR擴增HPV-
5、16E2基因序列間有相互交叉的三個片段來確認病毒的整合。當三個片段不能同時進行陽性擴散時，表明HPV-16E2基因有缺失，表明HPV-16整合狀態(tài)。1.3觀察指標：對HPV-16感染以及整合進行記錄分析。1.4統(tǒng)計學(xué)分析：選擇spss18.0進行數(shù)據(jù)分析，用均數(shù)±標準差（±s）的形式表示計量資料，并用t檢驗進行其檢驗，用率的形式表示計數(shù)資料，并用χ2檢驗對其進行檢驗，用秩和檢驗（Wilcoxon兩樣本比較法）的方法，對等級資料進行檢驗，當P<0.05時統(tǒng)計學(xué)有意義。2結(jié)果2.1HPV的檢測與分型：經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，在正常的宮頸組織、宮頸癌、CINI、CINII
6、、CINIII組織中，HPV的陽性檢出率分別為13.6%，93.3%，32.8%，54.5%，70.0%，不同組織的HPV的陽性檢出率均有明顯差異（P<0.05），具體數(shù)據(jù)見表1。2.2HPV-16感染的確定：經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，在正常的宮頸組織、宮頸癌、CINI、CINII、CINIII組織中，HPV-16的陽性檢出率分別為4.5%，66.7%，19.7%，34.1%，43.3%，不同組織的HPV-16的陽性檢出率均有明顯差異（P<0.05），具體數(shù)據(jù)見表1。2.3HPV-16整合的確定：經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，在正常的宮頸組織、宮頸癌、CINI、CINII、CIN
7、III組織中，HPV-16整合的感染率分別為0%，60.0%，16.7%，20.2%，38.5%，CINIII的HPV-16整合的感染率明顯高于CINI、CINII（P<0.05），宮頸癌的HPV-16整合的感染率明顯高于CINI、CINII、CINIII（P<0.05），具體數(shù)據(jù)見表1。3討論宮頸癌是臨床常見、具有高致死率的惡性腫瘤，對女性健康具有嚴重的威脅，所以，對宮頸癌的預(yù)防和治療具有非常重要的意義。大量臨床資料表明［6］，宮頸癌的發(fā)生和HPV的感染存在因果關(guān)系，宮頸癌發(fā)生的首要危險因素就是HPV感染，在本次研究中，HPV感染率隨著宮頸疾病的
8、加重呈現(xiàn)出逐漸增加的趨勢，得到了與臨床
