脂血對臨床生化檢驗影響

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1、脂血對臨床生化檢驗的影響對于脂血對生化檢測結(jié)果的影響大家都略知一二，但很少有很系統(tǒng)的資料，在今年的《齊魯檢驗醫(yī)學(xué)雜志》上的找到了一篇，并將其整理出來，以便大家交流學(xué)習(xí)。脂血造成干擾的評估脂血、溶血和黃疸都會對一些以光學(xué)為基礎(chǔ)的實驗室檢驗產(chǎn)生干擾，但脂血的干擾與溶血（血紅蛋白）和黃疸（膽紅素）的干擾在根本上有所不同。脂血中，乳糜微粒和極低密度脂蛋白（VLDL）是懸浮著的顆粒，它們的散射光，產(chǎn)生類似于牛奶中見到的云霧和混濁。此時如采用以光傳導(dǎo)作為部分檢測方法的檢驗，脂血就可能會造成干擾。通過在樣本中加入血紅蛋白或

2、膽紅素，我們可以評價上述經(jīng)驗方法對黃疸和溶血干擾的敏感性，但脂血的評價卻要復(fù)雜的多，因為我們目前還難以作到：獲得相應(yīng)的脂類標準參考物，通過添加，制備不同程度的脂血樣本。Gkick等報道將一種人工合成的靜脈使用乳劑“l(fā)ntralipib”加入血清中可模似脂血樣本，但在本期《臨床化學(xué)》(ClinicalChem—istr2004；50：2197-2201)中,Bronhorst等指出，添加“ntraLipib”的樣本不能真實地模似脂血樣本，因為在使用免疫濁度法檢測血漿銅藍蛋白、前清蛋白和鐵傳遞蛋白時，天然的脂血樣

3、本會造成檢測結(jié)果假性偏低，但是加入“l(fā)ntralipib”的模似脂血樣本卻不會這樣。怎么會產(chǎn)生這種差異以及如何評判在光學(xué)法檢驗中這種差異存在的可能性？首先，讓我們來回顧一下與此類檢驗相關(guān)的有關(guān)儀器的光散射特征以及天然脂血樣本與添加“l(fā)ntralipib”的模似脂血樣本之間在物理化學(xué)性質(zhì)上的區(qū)別。當電磁輻射以光的形式與某物質(zhì)（如脂質(zhì)微粒）相互作用時，粒子會產(chǎn)生一個偶極矩。偶極矩的大小與電場強度和粒子的極化率成正比。粒子本身不會反射光，光反射的產(chǎn)生是由于溶質(zhì)（即粒子）和溶劑折射率的不同。極化率與折射率有關(guān)，脂質(zhì)微

4、粒的折射率大多在1.3左右。分光光度法，通過比爾定律A=εbc(ε是摩爾吸光率，b是吸收池的厚度，c是溶液濃度)，將吸光度（A）和濃度聯(lián)系起來；而吸光度又等于透射強負log(l。/l),l。是入射光強度，l是光穿過吸收池后被檢測器檢測到的光強度。從吸收池中央進行透視，對著光源方向的角度是0度，對著檢測器的角度是180度。在分光光度法中，我們假設(shè)檢測器測得的光強度減弱是由于樣本吸收了部分光能的緣故。光散射存在時，光會向各個方向發(fā)散，其散射強度隨著角度θ而變化（θ是觀測線與X軸之間的夾角），其相對強度可表示為1+

5、cos2(θ).我們可以通過l。/l推算出光透過吸收池后被減少的量，l是散射光強度。通過與吸收光譜的對比，濁度可以被定以為ln(l。/l).只有在光散射強度處在相對較低的狀態(tài)時，濁度才能與粒子濃度間保持線性關(guān)系并通過分光光度檢測儀進行分析測定。一旦光散射強度增大就會干擾分光光度法檢測。通過分析摸似的“分析物—溶劑”產(chǎn)品，比如分光光度中膽紅素的多重干擾，我們確信光散射干擾光電散射強度和比濁分析?；谌粘Ｓ^察，我們知道影響光散射強度的因素有：懸浮在溶液中的粒子數(shù)目、粒子大小、折射率（取決于粒子濃度）以及光波波長。

6、相對而言，波長的影響要小一些?？紤]到散射角度以及散射粒子與觀測間存在距離，我們?nèi)鹄龋≧ayleighRatio,Rθ）來代表光散射的相對比例，它與l。/l直接相關(guān)。光散射的強度與粒子分子量（M），粒子濃度（c）折射率（n）、折射增量以及波長的負四冪成正比：RθKn2,其中K是常數(shù)。如果我們改變?nèi)苤辛Ｗ拥奈锢砘瘜W(xué)性質(zhì)，比如加入某種試劑它能增加或者減少粒子在溶劑中的溶解度（例如表面活性劑對油脂粒子的影響），那么折射率（n）和折射量就會發(fā)生改變。這種變化可以解釋為什么在一些而不是全部免疫濁度檢測法中存在油脂粒子的

7、干擾，對比，Bomborst等在本期《臨床化學(xué)》中已作了報道。。光波波長和粒子分子量對于解釋上面提到的有關(guān)Bornhorst等觀察到的“l(fā)ntralipib”摸似血脂樣本間的差異是非常重要的。瑞利散射（Rayleighscattering）使用于直徑小于入射光波的粒子。光散射強度與入射光的γ-4有關(guān)，因此溶液中粒子散射紫光（400nm）的強度是散射紅光（700nm）強度的9倍。分子量是第三大變量，它與密度和粒子半徑的立方之積有關(guān)。因子隨著粒子大小的增加，它們散射光的能力也大大增加。一旦粒子直徑達到與入射光的波

8、長接近時，就會導(dǎo)致瑞利散射發(fā)生形狀改變。變形意味著在接近入射光直角的方向強度減弱，而沿著縱軸的方向強度增大。當粒子（指球狀體）直徑超過波長的四分之于。即對400nm波長的可見來說，粒子直徑大于100nm時，這種變形就會變得異常明顯。而且隨著粒子直徑與光波波長的可見來說，粒子直徑大與100nm時，這種變形就會變得異常明顯。而且隨著粒子直徑與光波波長的接近，米氏（Mic）散射將成為主導(dǎo)，瑞利散射退居其次