資源描述：
《放線菌素d和vm》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、放線菌素D和VM.freelycinD，ACTD)和替尼泊苷（Teniposide，VM-26)對大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的體內(nèi)治療效果。方法將野生型的C6鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞接種于鼠腦右側(cè)尾狀核（對照組10只，空載組10只），并對鼠腦內(nèi)已形成的C6膠質(zhì)瘤分別用ACTD及VM-26抗瘤緩釋劑瘤區(qū)原位注射（治療組各10只）。觀察各組大鼠的一般情況、生存期、腫瘤病理學(xué)和磁共振成像（MRI）動態(tài)改變.freelainvivo.MethodsRIfeatures，histopathologicalchange，proliferationactivityandapoptosi
2、softhegliomaineachgroupofratseansurvivaltimeofcontrolanimalsplantationforhistopathologicalexamination.Thesurvivingtimeofthe9remainingrats(6ACTDand3VM-26treatedrats)onstratedadistinctcerebraltumorincontrolrats，butthetumorfociostpletelyinthetreatedrats.Thecerebralgliomaofratsafter
3、thetreatmentententofratC6gliomaisencouraging.Itcanbeusedasthechemotherapyforhumanmalignantglioma.【Keya；invivo；chemotherapy我們以往的研究結(jié)果表明，放線菌素D(ActinomycinD，ACTD)可顯著抑制C6鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞惡性增殖誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，在4個(gè)不同的濃度對比中ACTD的抑瘤作用均強(qiáng)于替尼泊苷(Teniposide，VM-26)，凋亡率在大劑量ACTD時(shí)的作用明顯優(yōu)于VM-26［1］。為進(jìn)一步明確二者對惡性膠質(zhì)瘤化療療效，我們研究
4、了C6細(xì)胞接種于鼠腦的致瘤性以及對鼠腦內(nèi)已形成瘤灶的C6膠質(zhì)瘤應(yīng)用ACTD及VM-26的抗瘤緩釋劑瘤區(qū)原位治療的療效，觀察大鼠的一般情況、生存期、腫瘤體積變化以及腫瘤病理組織學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)特征變化。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料C6鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系由中國科學(xué)院動物所提供。細(xì)胞培養(yǎng)基：DMEM（DulbeccomodifiedeaglemediumGibco，USA)，小牛血清（Hyclone，USA)。主要生化試劑：將消毒后的醫(yī)用明膠10g加入注射用水50ml，分別加入ACTD0.1g及VM-260.5mg，攪拌成半流狀，制成抗瘤緩釋劑。原位細(xì)胞凋亡檢測試劑
5、盒（Roche，Germany)，ABC免疫組化試劑盒及抗體（北京中山及其代理的SantaCruz公司）。主要儀器：江灣Ⅰ型腦立體定向儀（第二軍醫(yī)大學(xué)生產(chǎn)），磁共振儀（Advantage1.5TeslaGEMedicalSystems，GECorporation，USA)。實(shí)驗(yàn)動物：二級雄性SD大鼠，體重200～300g，共40只，由北京生物制品檢定所繁育場提供，其特征已經(jīng)鑒定。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1C6鼠腦膠質(zhì)瘤模型的建立［1］C6鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞于含10%小牛血清的DMEM培養(yǎng)液中單層培養(yǎng)。接種細(xì)胞量為1.0×106/(10μl·只)。大鼠經(jīng)10%水
6、合氯醛（300mg/kg）腹腔注射麻醉后，固定于江灣Ⅰ型腦立體定向儀上，手術(shù)暴露顱骨標(biāo)志，在前囟位置，矢狀縫右側(cè)3.0～3.5mm處用牙鉆鉆孔，孔徑1.2mm，用微量注射器垂直穿刺右尾狀核，將細(xì)胞懸液緩慢注入。1.2.2實(shí)驗(yàn)動物分組及組織標(biāo)本采集顱內(nèi)實(shí)驗(yàn)運(yùn)動分為4組，每組各10只SD大鼠：（1）對照組：接種野生型C6鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞；（2）空載緩釋劑組：接種野生型C6鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞后瘤體多點(diǎn)注射半流狀醫(yī)用明膠；（3）ACTD治療組：治療組C6鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞種植后第5天，MRI證實(shí)有腫瘤形成時(shí)，分別于第6、28天按上述方法麻醉、固定動物；同時(shí)將制備好的ACTD抗
7、瘤緩釋劑原位多點(diǎn)注入瘤體；（4）VM-26治療組：治療組C6鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞種植后第5天，MRI證實(shí)有腫瘤形成時(shí)，分別于第6天按上述方法麻醉、固定動物；同時(shí)將制備好的VM-26抗瘤緩釋劑載體原位多點(diǎn)注射入瘤體。接種后28、58天各處死1只，瘤標(biāo)本做常規(guī)HE染色并檢測凋亡；其余8只長期觀察生存期。各組實(shí)驗(yàn)動物在其自然死亡或人為處死后取出腦組織，將腫瘤標(biāo)本于10%福爾馬林溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋后冠狀切片，行大體標(biāo)本觀察、常規(guī)HE染色；另進(jìn)行PA免疫組化染色。另一部分標(biāo)本用OCT包埋液氮速凍-70℃保存冰凍切片，行原位細(xì)胞凋亡的檢測。1.2.3MRI成像及檢測
8、方法［2］用GE公司1.5TSignaMR機(jī)成像，冠狀面和矢狀面T1-26治療組10只大鼠中5
