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1、王英等：長期定位施肥對土壤生理轉化菌群的影響2419長期定位施肥對土壤生理轉化菌群的影響王英1，王爽2，李偉群1，魏丹1,2，周寶庫1，王玉峰11.黑龍江省土壤環(huán)境與植物營養(yǎng)重點實驗室//黑龍江省農業(yè)科學院土壤肥料與環(huán)境資源研究所，黑龍江哈爾濱150086；2.哈爾濱工業(yè)大學生命科學與工程系，黑龍江哈爾濱150001摘要：針對哈爾濱黑土28a長期定位施肥現狀進行土壤生理轉化菌群測試分析，采用稀釋平板法和MPN法測定不同施肥處理土壤的微生物各生理群的數量。結果表明：施肥處理的土壤微生物多樣性指數最高
2、，微生物種類多，群落結構較復雜，同不施肥處理之間的土壤微生物群落結構組成存在顯著差異。關鍵詞：黑土；生理轉化菌群；土壤肥力；長期定位中圖分類號：S154.3文獻標識碼：A文章編號：1672-2175（2008）06-2418-03王英等：長期定位施肥對土壤生理轉化菌群的影響2419施用肥料對土壤微生物數量及其生理生化特性，微生物代謝功能和群落結構有較大的影響，土壤微生物的數量、生物量、活性和多樣性與土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定密切相關。因此，適宜的施肥方式對維持土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定至關重要。本研究選用了28a
3、長期定位施肥的黑土作為供試土樣，采用稀釋平板法和最大或然值法（MPN法）測定不同施肥處理土壤的微生物各生理群的數量，分析了施用不同肥料的土壤微生物種類、數量、生物量、代謝能力和群落結構的差異，確定合理的施肥方法及最適的施肥量，尋求黑土肥力變化的敏感指標，對于黑土質量演變規(guī)律的研究提供理論基礎。1材料與方法研究施肥對微生物影響試驗地設在黑龍江省農科院黑土肥力定位試驗站，試驗點位于東經126o35′，北緯45o40′，海拔151m，屬松花江二級階地，地勢平坦，成土母質為洪積黃土狀粘土。氣候屬于中溫帶大
4、陸性季風氣候，年平均溫度3.5℃，年降水量533mm，無霜期135d。1.1微生物各生理群數量測定氨化細菌、好氣纖維素分解菌、好氣性固氮菌生理群微生物的測定采用稀釋平板測數法；硝化細菌（亞硝酸細菌、硝酸細菌）、反硝化細菌、嫌氣性纖維素分解菌、嫌氣性固氮菌生理群微生物的測定采用最大或然數法（MPN）。氨化細菌總數：采用肉汁蛋白胨培養(yǎng)基（MПA）（pH7.0）。硝化細菌總數：（包括亞硝酸細菌和硝酸細菌）亞硝酸細菌總數：采用改良斯蒂芬遜（Stephenson）氏培養(yǎng)基。硝酸細菌總數：采用硝酸細菌培養(yǎng)基。
5、反硝化細菌總數：采用反硝化細菌培養(yǎng)基。固氮菌總數：（包括好氣性固氮菌和嫌氣性固氮菌）好氣性固氮菌總數：采用改良瓦克斯曼（Waksman）77號培養(yǎng)基。嫌氣性固氮菌總數：采用嫌氣性固氮菌培養(yǎng)基。纖維素分解菌：好氣性纖維素分解菌總數：采用赫奇遜（Hutchison)氏培養(yǎng)基。嫌氣性纖維素分解菌：采用依姆歇涅茨基嫌氣性纖維素分解菌培養(yǎng)基。1.2試驗設計CK，D1，N1，P1，K1，N1P1，N1P1K1，D1N1P1K1，D2，N2P2，D2N2P2在小麥和玉米上為N150kg·hm-2，P2O575k
6、g·hm-2，K2Okg·hm-2；在大豆上為N75kg·hm-2，P2O5150kg·hm-2，K2O75kg·hm-2，記作N1、P1、K1；有機肥為純馬糞，每輪作周期施一次，施于玉米茬，按氮量75kg·hm-2（約馬糞18600kg·hm-2），記作D1；二倍量組施肥量為常量組的二倍，記作N2、P2、D2。氮、磷、鉀肥均秋施肥，氮肥為尿素，磷肥為三料過磷酸鈣、磷酸二銨，鉀肥為硫酸鉀。本試驗1979年設立，1980年開始按小麥-大豆-玉米順序輪作，到2007年為第28個生長季，試驗面積8060
7、m2，小區(qū)面積168m2，每區(qū)8壟，30m長，70cm壟距，無重復。定位試驗在2007年春季4月應用GPS采集土壤樣本，進行微生物檢測。2結果與討論2.1氮素轉化菌的數量變化氮素轉化菌中氨化細菌數量最多，固氮菌和反硝化細菌次之，硝化細菌最少；其中氨化細菌、固氮菌和反硝化細菌均以D1N1P1K1處理的土壤中為最多，占細菌總數的54.79%、7.74%和4.25%；硝化細菌以N1P1K1處理中含量最高，占細菌總數的1.82%。從圖1可見王英等：長期定位施肥對土壤生理轉化菌群的影響2419，能顯著增加氮
8、素轉化微生物數量的處理為有機肥與無機肥配合施用（D1N1P1K1），其次為單施無機肥的處理（N1P1K1）。圖1氮素轉化菌數量Fig.1AmountofUtilizingNmicrobe2.2碳素轉化菌的數量變化土壤中的碳素轉化菌以纖維素分解菌為主[1]，本研究中經培養(yǎng)獲得的纖維素分解菌多為真菌。統(tǒng)計纖維素分解真菌菌落數發(fā)現，施用肥料增加了分解纖維素的微生物數量，CK、D1、N1P1K1和D1N1P1K1四個處理中纖維素分解真菌數量分別為每克土壤干樣品：1.64×104個、2.76
