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1、尿液紅細胞及形態(tài)學檢查血尿的概念鏡下血尿：以傳統(tǒng)的尿離心沉渣玻片涂片，在高倍鏡下檢查10個視野后，如每高倍視野中見到紅細胞超過3～5個，則定為鏡下血尿。肉眼血尿：重癥者尿呈洗肉水樣或血色，稱為肉眼血尿。尿紅細胞檢測方法干化學分析法顯微鏡檢查法（鏡檢）自動化尿沉渣分析儀法單克隆抗體免疫法干化學法原理：利用尿液中紅細胞內(nèi)血紅蛋白或其破壞釋放出的血紅蛋白均具有過氧化物酶活性，可使過氧氫茴香素或過氧化氫烯鈷釋放出新生態(tài)氧，后者可氧化有關(guān)色原(如鄰甲苯胺)顯色。因此，它既可檢測紅細胞，也可檢測游離血紅蛋白，還可作為紅細胞鏡檢
2、的篩選法。不足：吩噻嗪類或吩嗪類藥物、肌紅蛋白、對熱不穩(wěn)定酶、氧化劑或細菌過氧化物酶、尿pH值偏高等均可使隱血出現(xiàn)假陽性。尿液中存在大量維生素C時，可由于競爭性抑制反應(yīng)而使干化學隱血出現(xiàn)假陰性。顯微鏡檢查法（鏡檢）尿沉渣鏡檢的標準是：①醫(yī)生要求鏡檢或病人的主訴、體征可能在尿沉渣中出現(xiàn)除紅、白細胞以外的有形成分如結(jié)晶、異常細胞等；②泌尿系統(tǒng)疾病或可引發(fā)腎臟并發(fā)癥的疾病；③尿液顏色、濁度、蛋白、亞硝酸鹽、紅細胞、白細胞有任何一項異常者。對于干化學篩選后的鏡檢問題，國內(nèi)學者有爭議，有學者認為鏡檢是尿沉渣分析的參考標準，其
3、重要意義是任何方法無可替代的，只要有條件，最好每份標本都鏡檢。尿紅細胞鏡檢是尿液紅細胞檢測的參考標準。其不足是：①有些紅細胞在腎臟長時間滯留，受機械作用破碎或在血管內(nèi)發(fā)生溶血，形成Hb尿，不能檢出；②規(guī)范化尿沉渣鏡檢操作較為繁瑣（標準化操作步驟：新鮮尿液10ml，1500r/min離心5min后留0.2ml尿沉渣，將尿沉渣充盈到標準尿沉渣計數(shù)板內(nèi)，計算出紅細胞數(shù)/μl）；③獲得準確的試驗結(jié)果，除需訓(xùn)練有素、工作認真負責的技術(shù)人員外，還需對所用試驗器材（標本收集器皿、離心機及計數(shù)板）進行標準化。自動尿沉渣分析儀UF-
4、100尿沉渣分析儀對尿液中有形成分直接作熒光染色，利用流式細胞儀原理，通過前向散射光強度(Fsc)、前向散射光脈沖寬度(Fscw)、熒光強度(Fls)、熒光脈沖寬度(Flw)以及細胞電阻抗等參數(shù)來檢測尿中有形成分的大小、長度、染色情況，從而區(qū)分尿中的各種有形成分，具有操作簡單、結(jié)果重復(fù)性好等特點。在紅細胞檢測方面，UF-100的特點之一是同時提供尿紅細胞均一型和非均一型指標，對鑒別尿中紅細胞的來源有較大參考價值。結(jié)晶、菌尿（草酸鈣結(jié)晶和霉菌）導(dǎo)致假陽性，紅細胞碎片及影紅細胞相對于普通紅細胞而言其熒光染色敏感度下降，
5、熒光強度弱而造成儀器漏檢。單克隆抗體免疫法可將尿液中的紅細胞或Hb與試劑中單克隆抗體結(jié)合并顯色。其優(yōu)點是敏感度高、特異性好。按每個紅細胞Hb含量為30pg計，尿液中含有2個紅細胞/μl（相當于0.5/HFP）即可檢出。其特異性體現(xiàn)在僅與人Hb起反應(yīng)，假陽性率很低。由于其過于敏感，在正常人尿內(nèi)含紅細胞（0～3/HFP）時，即可發(fā)生反應(yīng)。因此，不適合常規(guī)尿紅細胞檢查。但當常規(guī)鏡檢與干化學法結(jié)果不能解釋時，如尿中紅細胞溶解和受某些物質(zhì)干擾干化學檢查陽性，而鏡檢未找到紅細胞，應(yīng)用單克隆抗體免疫法可為尿中紅細胞的性質(zhì)提供鑒別
6、診斷依據(jù)。綜合評價尿紅細胞鏡檢是尿液紅細胞檢測的參考標準，但對尿中溶解的紅細胞不能檢出。干化學法可檢測Hb，既有助于溶血性疾病的診斷，也可彌補鏡檢不能檢出破壞的紅細胞之不足，還可作為尿紅細胞鏡檢的篩選方法。但必須注重尿液分析儀及試劑帶的質(zhì)量及在工作中可能出現(xiàn)的干擾因素。綜合評價單克隆抗體免疫法檢查尿液紅細胞具有很好的敏感性和特異性，但由于其過于敏感，不能用于常規(guī)檢測；在鏡檢和干化學法檢測結(jié)果不可解釋時，其有重要的鑒別診斷價值。尿流式細胞儀檢查不僅對尿紅細胞定量分析有意義，而且還能對尿紅細胞形態(tài)進行分析，以確定血尿來
7、源。但分析過程易受某些因素的干擾，如酵母菌、精子等，當儀器出現(xiàn)報警時，必須用鏡檢確認。尿紅細胞形態(tài)學檢查主要用于鑒別腎性血尿和非腎性血尿。主要方法有：普通光鏡、相差顯微鏡、掃描電鏡、血液分析儀、尿液有形成分分析儀等。普通光鏡檢查通常，在高倍鏡下(400倍)識別非染色細胞形態(tài)，此法由于缺乏色澤對比和立體感，常要求觀察者有豐富熟練的尿形態(tài)學經(jīng)驗。改用染色法(甲基綠染色，結(jié)晶紫-沙黃染色，或瑞氏染色)可增加形態(tài)鑒別特征。相差顯微鏡檢查1968年，Kark研究小組開始應(yīng)用相差顯微鏡觀察尿細胞等形態(tài)，1979年澳大利亞的腎病
8、學家Birch和Fairly應(yīng)用于臨床。相差顯微鏡反映紅細胞立體感強，是目前檢查尿紅細胞形態(tài)最常用的方法。掃描電鏡1983年，F(xiàn)asseff用掃描電鏡觀察尿紅細胞。由于立體感強，可敏感地觀察到紅細胞表面的細微變化。但因價格昂貴而難以普及于臨床。尿液有形成分分析儀1995年，日本推出流式細胞技術(shù)為原理的尿液分析儀SysmexUF-100，可將尿中成分作熒光染色
