資源描述:
《茯苓、蜜環(huán)菌、黑木耳協(xié)同作用對(duì)小鼠免疫功能影響》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、茯苓、蜜環(huán)菌、黑木耳協(xié)同作用對(duì)小鼠免疫功能的影響?哈爾濱師范大學(xué)張麗娟【摘要】觀察茯苓、蜜環(huán)菌、黑木耳及其配伍對(duì)小鼠免疫力的影響。結(jié)果表明,三種食用菌聯(lián)合使用,可顯著提高小鼠的淋巴細(xì)胞增殖能力和巨噬細(xì)胞吞噬能力(P<0.05),說明三種食用菌配伍可在特異性免疫和非特異性免疫兩面提高小鼠的免疫力,具有聯(lián)合增效的作用?!娟P(guān)鍵詞】茯苓,蜜環(huán)菌,黑木耳,免疫力,吞噬百分率TheeffectofcompatibilityPoriacocos,ArmillaramelleawithAuriculariaauricularonimmunologicalfunctionin
2、miceAbstract:ToobservetheimmunityeffectofPoriacocos,Armillaramellea,Auriculariaauricularandtheircompatibility.Theresultsshowthatthreekindsofediblefungususedincombination,cansignificantlyimprovethemice'scapacityoflymphocytesproliferationsandmacrophages'phagocytosis(P<0.05).Thesemean
3、thatcompatibilityofPoriacocos,ArmillaramelleawithAuriculariaauricularhasasynergisticeffecttoenhancethebody'simmunesysteminbothspecificimmunityandnonspecificimmunity.KeyWords:Poriacocos,Armillaramellea,Auriculariaauricular,Immunity,Devouringpercentage人類發(fā)現(xiàn)、認(rèn)識(shí)、利用食用菌的歷史悠久,在我國(guó),幾千年前食藥用菌就
4、被作為傳統(tǒng)中藥的重要組成部分,李時(shí)珍的藥學(xué)著作《本草綱目》和陳藏器的《本草拾遺》均有記載[1]。近些年來,食用菌的保健作用越來越引起人們的重視。茯苓、蜜環(huán)菌、黑木耳是我國(guó)資源豐富的三種食用菌,具有地源優(yōu)勢(shì)和開發(fā)潛力。茯苓作為一種傳統(tǒng)的中藥材,醫(yī)療和保健作用已經(jīng)得到了一致認(rèn)可[2,3]。蜜環(huán)菌可與天麻共生[4],具有與天麻類似的藥理作用[5]。黑木耳營(yíng)養(yǎng)豐富,食味鮮美,不但是營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高的食用菌,而且是藥用價(jià)值較高的藥用菌[6]5,是世界公認(rèn)的保健品。健康是人類的一項(xiàng)基本要求,也是社會(huì)進(jìn)步的重要標(biāo)志和潛在動(dòng)力。據(jù)調(diào)查顯示,90%的疾病與免疫力減弱有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)選
5、擇淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力和巨噬細(xì)胞吞噬能力作為觀察指標(biāo),研究茯苓、蜜環(huán)菌、黑木耳及其配伍對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)的影響,為其在醫(yī)藥領(lǐng)域的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。1材料1.1動(dòng)物清潔級(jí)昆明小鼠,雄性,6~8周齡,體重18~22g。1.2試劑及配制茯苓、蜜環(huán)菌、黑木耳提取物:杭州眾生菌蕈生物技術(shù)有限公司提供;ConA:Sigma公司;MTT、Hank’s液:Sigma公司;PBS緩沖液(pH7.2~7.4)等。MTT液:將5mgMTT溶于1mLpH7.2的PBS中,現(xiàn)用現(xiàn)配。無菌Hank’s液:使用前用3.5%的無菌NaHCO3調(diào)節(jié)pH7.2~7.4。雞紅細(xì)胞懸液制備:取雞血置于
6、三角瓶中,加入玻璃珠,搖動(dòng)脫去纖維。用0.9%NaCl溶液洗滌3次,2000r/min離心10min,棄去上清,用0.9%NaCl溶液配成20%的雞紅細(xì)胞懸液。1.3儀器PL203型電子天平:上海精天電子儀器有限公司;CO2孵化箱:日本三洋;F200型多功能酶標(biāo)儀:瑞士TECAN集團(tuán)公司。2方法2.1ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)80只小鼠隨機(jī)分為8組,灌胃量均為0.5mL,每日一次。分組情況及藥物濃度見表1。連續(xù)灌胃30d后,頸椎脫臼處死小鼠,無菌取脾臟,用鑷子輕輕將脾磨碎,制成單個(gè)細(xì)胞懸液。經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾,用Hank's液洗滌,1000r/mi
7、n離心10min,共洗滌兩次。然后調(diào)整細(xì)胞濃度為3×106個(gè)/mL。將每份脾細(xì)胞懸液加入24孔培養(yǎng)板中,1mL/孔,2孔/樣品,一孔加75μLConA液(相當(dāng)于7.5ug/mL),另一孔作為對(duì)照,置5%CO2,37℃CO2孵箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h,每孔輕輕吸去上清液0.7mL,加入0.7mL不含小牛血清的RPMI16405培養(yǎng)液,同時(shí)加入MTT(5mg/mL)50μL/孔,繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后,每孔加入1mL酸性異丙醇,吹打混勻,使紫色結(jié)晶完全溶解。然后分裝到96孔培養(yǎng)板中,每孔作3個(gè)平行樣,用酶標(biāo)儀,以570nm波長(zhǎng)測(cè)定光密度值[7]。表1試驗(yàn)
8、動(dòng)物分組序號(hào)組別劑量(×100mg/kg)①空白對(duì)照