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《快速dna提取檢測(cè)試劑盒》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、杭州新景生物試劑開(kāi)發(fā)有限公司區(qū)地址：浙江省杭州市西湖科技經(jīng)濟(jì)園金蓬街366號(hào)1幢東4F郵編：310030電話：0571-87381295傳真：0571-87381297快速DNA提取檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品組成快速DNA提取檢測(cè)試劑盒Cat.No.50次制備4005050200次制備4005200樣本裂解液蛋白酶K貯存液2×PCRMixddH2O研磨棒說(shuō)明書12ml500μl500μl500μl5個(gè)1份12ml×41ml×21ml×21ml×25個(gè)1份產(chǎn)品儲(chǔ)存與有效期-20℃儲(chǔ)存，有效期為兩年以上；如果頻繁使用，建議儲(chǔ)存于2~8℃保存，有效期為6個(gè)月。技術(shù)支持
2、杭州新景生物試劑開(kāi)發(fā)有限公司研發(fā)部：e-mail:technical@simgen.cn,電話：400-0099-857。產(chǎn)品介紹本試劑盒試劑盒包含了快速制備DNA和PCR擴(kuò)增的所有試劑，可在20分鐘內(nèi)從植物組織、種子、細(xì)菌和動(dòng)物組織樣本中一步法提取總DNA并用于PCR擴(kuò)增。整個(gè)提取過(guò)程無(wú)需有機(jī)溶劑抽提，無(wú)需無(wú)水乙醇沉淀，簡(jiǎn)便、快捷，而且質(zhì)量穩(wěn)定可靠。本試劑盒提供的2×PCRMix是一種優(yōu)化的兩倍濃度的PCR預(yù)混合液，TaqPlusDNA聚合酶、PCR增強(qiáng)劑和蛋白穩(wěn)定劑協(xié)同提高了PCR效率和靈敏度，非常適合低拷貝模板擴(kuò)增，特別適合于高通量的篩選。用戶
3、需自備的試劑與物品1．1.5ml離心管、移液器吸頭、一次性手套及防護(hù)用品2．臺(tái)式小量離心機(jī)（可配離心1.5ml離心管和2ml離心管的轉(zhuǎn)子）3．旋渦震蕩器、水浴鍋或干浴鍋使用前準(zhǔn)備1．如果離心機(jī)有制冷功能，請(qǐng)將溫度設(shè)置到25℃。2．將水浴鍋或干浴鍋溫度設(shè)置到56℃和95℃。3．收集樣本：植物材料：稱取約10mg組織放入離心管中，用研磨棒旋轉(zhuǎn)擠壓組織，使其成勻漿狀（如果需要更多研磨棒，可以撥打400-0099-857咨詢購(gòu)買）；如果是植物種子，應(yīng)事先破碎并研細(xì)；動(dòng)物材料：用手術(shù)刀將組織剁成勻漿狀，稱取約10mg組織勻漿放入于離心管中；細(xì)菌：取菌液200-
4、800μl，12000rpm離心30秒收集菌體；www.simgen.cn僅供科研使用，請(qǐng)勿用于人體及動(dòng)物的治療或臨床診斷。Ver.3杭州新景生物試劑開(kāi)發(fā)有限公司區(qū)地址：浙江省杭州市西湖科技經(jīng)濟(jì)園金蓬街366號(hào)1幢東4F郵編：310030電話：0571-87381295傳真：0571-87381297操作步驟1.加入200μl裂解緩沖液，渦旋振蕩直至組織勻漿或菌體徹底懸浮分散開(kāi)來(lái)。2.加入10μl蛋白酶K貯存液，渦旋振蕩混合均勻，56℃孵育10分鐘。3.低速離心數(shù)秒使離心管管蓋上的液體沉降到管底，然后95℃處理5分鐘。*低速離心數(shù)秒的步驟不可省略，否
5、則管蓋上殘留的蛋白酶K未經(jīng)95℃失活，可能影響后續(xù)的PCR擴(kuò)增。4.最高速（≥13,000rpm）離心5分鐘。5.吸取150μl上清轉(zhuǎn)移至一個(gè)潔凈的1.5ml離心管，作為模版直接用于PCR擴(kuò)增或-20℃貯存?zhèn)溆谩?.PCR擴(kuò)增：2×PCRMix正向引物（10μM）反向引物（10μM）模板ddH2O10μl0.5μl0.5μl2μl7μlTotal20μl7.手指輕彈PCR反應(yīng)管充分混勻，簡(jiǎn)短離心。8.PCR反應(yīng)循環(huán)設(shè)置舉例94℃3min94℃30sec※55℃30sec35Cycles§72℃1min72℃5min※以實(shí)際最佳退火溫度為準(zhǔn)。§以1kb
6、/min計(jì)算。對(duì)于擴(kuò)增300bp以下的目的片段，可用兩步法擴(kuò)增，以節(jié)省擴(kuò)增時(shí)間：94℃3min94℃20sec35Cycles60℃1min72℃5min9.結(jié)果檢測(cè)：取5-10μl擴(kuò)增產(chǎn)物直接進(jìn)行瓊脂糖電泳檢測(cè)。*瓊脂糖凝膠濃度與線形DNA最佳分辨范圍的關(guān)系：瓊脂糖濃度最佳線形DNA分辨范圍0.5%0.7%1.0%1.2%1.5%2.0%1,000~30,000800~12,000500~10,000400~7,000200~3,00050~2,000www.simgen.cn僅供科研使用，請(qǐng)勿用于人體及動(dòng)物的治療或臨床診斷。Ver.3
