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《aspcr檢測hiv-1微量耐藥突變方法的建立和初步應(yīng)用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文ASPCR檢測HIV--1微量耐藥突變方法的建立和初步應(yīng)用姓名：郭東星中請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：李敬云20100610情況，對(duì)抗病毒治療方案的制定fl?奮很好的指導(dǎo)作川。檢測劣勢耐藥毐株可以更好地了解耐藥性產(chǎn)生的機(jī)理并及時(shí)地指好臨床抗病毒治療，盡可能延緩病人耐藥轉(zhuǎn)材M。州.A柿NSO澹A直鵠3雋蕉碩即A忻蓋碰，、將其連接到喊體，進(jìn)行定點(diǎn)誘變并轉(zhuǎn)化測序，得到癇毐與野生型癇毐根裾戰(zhàn)fi按比例混合，捉取混合癇毐的砌、進(jìn)行一步法逆轉(zhuǎn)確性和靈敏度。主要結(jié)果如卜：QQKQC的炅敏度吋達(dá)卯％和G%。CiiR《舅G宵梏$峁
2、5允荊誠W檢測6螺GG吸鴕34壞鉑卯的靈敏度可CGG舛R壤G肜礪郾壤＜；唎辛己玫囊恢灤浴R虼耍鋮CC方法的前期流稈＜?方法在檢測G簦＜?微量耐藥突變中的應(yīng)用人的系列樣本，繪制了相應(yīng)的耐藥位點(diǎn)的受化曲線，監(jiān)測其耐藥突受殳化的情況，較。主耍結(jié)果如下：'k、M分存種的比例低于P%或髙于P%,其中一半以卜.耐藥突變占病毒準(zhǔn)種的比例低于隊(duì)。卵Wt9鍋3沾蛐湍鴕6觳夥椒廠啾齲城沾檢測微g耐藥突變的能力顯'k.wm；mm%.mmw綱的忠名?屮，V%以上的沾鉍沾/記沱V槐潿局晡Ai磕鴕v槐;沾癇毐枷沾局小t誆《駒亓餌嘍越系沾沾6666S鹿66S666Ssgggg6666666糞
3、666,666666666SI6666666666SI費(fèi)666S6.66,06s>6薛6666箱66S6666666666S6666截S6666666666666盞6666鏃6.6瑯巨666666霧6g666F6666娶6666666666666智【66騅?666華66666666舳印.a?aanLaaaaaaaii籣。aaaaaaaddddddd3鰌aaaaaaa…璐aALCCCcccCCCCCcccCCCcccc括謝c謝ccccSRc謝ccccccccC%9ccCCCCGGG淛：CCCCCCC骼cccc砸cCCcc把ccc舔ccccc鋤cCCCCCCCCCC
4、CccCCCcccccC錦GfGCG鋤Gc路—CCCCCccccccc卜澌GCC鬭Cc.c%cccc欄…CCCCCcCCaRccc胍ccccccccc/c桑甅c農(nóng)cccccctllilccccCr'ifLCCCCCC，CCCCccccccc斷ccccccccc購cc輟0cccccccccc版cccccCCCC粢經(jīng)cKc觚cccccC繳ccccccccco它CCCC、啪cccccccccccc骸h闖鷇cciJi英文縮略詞表測方法檢出水平之下。這些種群迅然很小，但在耐藥的發(fā)展過程中可能發(fā)揮著巫-、劣勢耐藥突變病誨株的米源±是2耐藥病毒。特別是22222親畛＜2牟沸2
5、2耐藥基因突變形式，人突變株在癇毒種群屮的比例及分布可以為制記理想的臨床治療方案捉供重要依越米越多的證裾表明感染蕎體內(nèi)存fr:的劣勢耐藥株對(duì)治療效果有顯著的影響，可能足因?yàn)榱觿菽退幎局甑拇驽媒档土水a(chǎn)生耐藥的遺傳屏障。感染耐藥毐株的癇人，開始治療后抑制病毒復(fù)制所需的時(shí)間更長，而到治療失敗的時(shí)間更短。使用更敏感的方法檢測耐藥癇毒可發(fā)現(xiàn)更多的常規(guī)基因型和農(nóng)型方法檢測不到的劣勢耐藥病毐。與整介酶抑制劑222孕22和222伊222駝2喙72222蛑衛(wèi)突變與融合抑制劑222222耐藥相關(guān)，能夠促進(jìn)222賺2巧的聯(lián)合抑制受體結(jié)介或提髙rn滕n嗜性。i'i昀耐藥相關(guān)突變位點(diǎn)核苷
6、類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑I黯I類抗病諦藥物是通過和逆轉(zhuǎn)錄酶的天然底Ii’槐滸i’i‘街幀if浚閡恢鐘険11突變有關(guān)itrnn、n斷口稱為弘e。ni靂常發(fā)屮回復(fù)突變，在無藥物選擇壓力時(shí)，增加n的復(fù)rn親畛＜1胭it耐藥突變。在體外試驗(yàn)中，n訶引起n對(duì)n投髑rnrniTii埏11叨饒鴕11緣卮錙敵rrnic，n株；當(dāng)失敗的II儲(chǔ)療方案中含n保i’AiTf是最先出現(xiàn)的耐藥突變。非核苷類逆轉(zhuǎn)誠酶抑制劑it源n是通過與n逆轉(zhuǎn)泌酶相關(guān)區(qū)域結(jié)合，改變酶活性，進(jìn)而抑制n木酆稀ni/i［埤n玀，ni疣代藥突變，這些突變均nry??致n對(duì)n母叨饒鴕s簡煌）［潭鵲市訣耐藥。研究證明，Inf梢
7、允筇if訣I的耐藥程度增加町捉n可以f碩1［耐藥突變，且這I幟蛇a槐渚Hf餒iI圓沸fW耐藥di。I】。在含雌n牧s現(xiàn)瘟浦覷n足最常見的m基因區(qū)的耐藥突變。主要突變僅侖兒種。次要突變的出現(xiàn)與蛋白酶的交義耐藥侖關(guān)，原因可能與抗病三、常規(guī)耐藥檢測方法行測序。表型分析處將3舷3產(chǎn)物*隆到前病毐背架中，包裝病毐并檢測相應(yīng)定位點(diǎn)突變的、有確定的農(nóng)型敏感性數(shù)據(jù)的序列進(jìn)行比對(duì)，從而預(yù)測癇毐對(duì)藥物的敏感性?？共「χ委熓〔∪梭w內(nèi)的33劣勢耐藥突變株，增加了病人體閃的耐藥壓力,但采用常規(guī)的基因型方法又無法對(duì)其進(jìn)行檢測。高靈敏度的微跫耐藥檢測方法的應(yīng)川表明，在抗病毒治療失敗的病人中
8、，耐藥對(duì)抗病毒治療失敗的
