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《綿羊卵母細(xì)胞論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、綿羊卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)條件的研宄蔡麗娟，于昊贏，孫曉冬，尹多，李鐘淑*（延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系，吉林延吉133000）摘要:本實(shí)驗(yàn)比較了不同綿羊卵母細(xì)胞的收集方法、不同培養(yǎng)時(shí)間、FSH和LH不同添加量對(duì)綿羊卵母細(xì)胞的體外成熟的影響，結(jié)果顯示：應(yīng)用切割法比抽吸法更適合于綿羊卵母細(xì)胞的回收（2.44：1.65）;綿羊卵母細(xì)胞的成熟培養(yǎng)適宜吋間為22-24h，培養(yǎng)26-28h吋出現(xiàn)了輕微的過(guò)成熟現(xiàn)象;FSH/LH濃度為lOug/ml時(shí)更有利于卵母細(xì)胞的成熟，以此為延邊奶山羊與綿羊構(gòu)建異種間克隆胚胎提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。關(guān)
2、鍵詞：綿羊；卵母細(xì)胞；體外成熟TheStudyofMaturationinVitroCultureConditionsofSheepOocytesCaiLi-juan，YuHao-ying，SunXiao-dong，YinDuo,LiZhong-shu*(DepartmentofAnimalScience，AgriculturalCollegeofYanbianUniversity,Yanji133000,China)Abstract：Theexperimentcomparisontheeffectsofdif
3、ferentsheepoocytecollectionmethod,differentculturetime，differentdosageofFSHandLHonsheepoocyteinvitromaturation，theresultsshowedthat:theapplicationofcuttingmethodismoresuitablethanthesuctionmethodforsheepoocyterecovery(2.44:1.65);Thesuitabletrainingtimeofovin
4、eoocytesmaturationcultureis22-24h，26-28happearedslightovermaturephenomenon;FSH/LHconcentrationoflOug/mlismorebeneficialtothematurationofoocytes.ThisstudyprovidedthebasicdataofconstructingtheinterspeciesclonedembryosofYanbiandairygoatsandsheepKeywords:sheep;o
5、ocytes;invitromaturation二十世紀(jì)以來(lái)，克隆技術(shù)的發(fā)展是大家有目共睹的，哺乳動(dòng)物異種間克隆也越來(lái)越受到人們的關(guān)注，它對(duì)物種的改良、瀕危動(dòng)物的保護(hù)等具有十分重要的意義，但是目前異種動(dòng)物克隆技術(shù)的成功率仍然很低，試驗(yàn)屮仍有很多環(huán)節(jié)需要進(jìn)一步改進(jìn)和完善。與同種動(dòng)物（如,羊-羊）相比，異種動(dòng)物（如，山羊-綿羊）克隆研宂進(jìn)行的較少，體系也是很不完善。延邊奶山羊是優(yōu)良的地方品種，體型大、耐粗飼、適應(yīng)性強(qiáng)、產(chǎn)奶量高、終年以放牧飼養(yǎng)為主，很適合在延邊朝鮮族自治州特殊的地理環(huán)境下飼養(yǎng)，是洲內(nèi)人比的主要經(jīng)濟(jì)來(lái)
6、源之一。但是由于長(zhǎng)期以來(lái)沒(méi)有系統(tǒng)的管理制度，選育不當(dāng)，導(dǎo)致延邊奶山羊體型外貌不一、體格不大、體重變輕、產(chǎn)奶性能高低差異顯著，泌乳期較短，經(jīng)濟(jì)收益不大［1］。為改善這一現(xiàn)狀，優(yōu)化種群，試驗(yàn)將利用克隆技術(shù)進(jìn)行品種改良，但是由于延邊奶山羊屠宰量少，且屠宰地點(diǎn)分散,導(dǎo)致卵母細(xì)胞不易獲得，試驗(yàn)很難進(jìn)行。但是綿羊的卵母細(xì)胞很容易獲得，因此試驗(yàn)利用綿羊卵母細(xì)胞進(jìn)行延邊奶山羊-綿羊異種間核移植，該技術(shù)的應(yīng)用使試驗(yàn)順利進(jìn)行。本文主要介紹優(yōu)化綿羊卵母細(xì)胞體外成熟的培養(yǎng)條件，應(yīng)用正確的卵巢收集方法，在適宜的培養(yǎng)時(shí)間和適宜的激素濃度下
7、，獲得最優(yōu)質(zhì)的受體細(xì)胞，為延邊奶山羊與綿羊卵母細(xì)胞體外成熟、異種間核移梢和胚胎體外培養(yǎng)等研宄提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。一、材料和方法1、實(shí)驗(yàn)材料綿羊卵巢（取自龍井市屠宰場(chǎng)）2、主要的藥品及實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備2.1主要藥品TCM-199、胎牛血清（FBS,杭州四季青）、17p-雌二醇、丙酮酸鈉、促卵泡激素（FSH）、促黃體激素（LH）、DMEM粉末、青霉素、鏈霉素等，試劑及無(wú)機(jī)鹽無(wú)特殊說(shuō)明均為Sigma公司產(chǎn)品。所有藥品均在生物超凈工作臺(tái)內(nèi)配制，除生理鹽水用水為三重蒸餾水，其余藥品所用水均為去離子水。所有藥品均用孔徑為25pm的微
8、孔過(guò)濾器過(guò)濾。（1）采卵液:TCM-199、15mmol/LHepes>0.168mg/mlNaHCO3、2%FBS、9IU/ml肝素鈉。調(diào)pH至7.2-7.4。0.22um濾膜過(guò)濾；用前3小時(shí)進(jìn)行平衡.⑵沖卵液：95%的TCM-199和5%的FBS均勻混合，過(guò)濾滅菌。⑶成熟培養(yǎng)液：90%TCM-199、10%FBS、lmg/L17p_雌二醇、0.12g/L丙酮酸鈉按比例混勻，過(guò)濾滅菌
