螺旋體和檢驗(yàn)

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1、懷化醫(yī)?！段⑸飳W(xué)檢驗(yàn)》教案編號：2010年上學(xué)期授課教師桂芳教研室主任審核簽名李爭鳴螺旋體及檢驗(yàn)課時(shí)授課月日月日月日月日月日月日教學(xué)課題2時(shí)間星期星期星期星期星期星期授課對象檢驗(yàn)專業(yè)班級【掌握】鉤端螺旋體，梅毒螺旋體的生物學(xué)特性和微生物學(xué)檢驗(yàn)?！臼煜ぁ?、回歸熱螺旋體和伯氏疏螺旋體的特性。目的要求2、各類螺旋體的致病與免疫性?！玖私狻糠乐卧瓌t和其他螺施體。重點(diǎn)：1、螺旋體的概念與特征教學(xué)重點(diǎn)2、鉤端螺旋體的主要生物學(xué)性狀及微生物學(xué)檢驗(yàn)及難點(diǎn)3、梅毒螺旋體的主要生物學(xué)性狀及微生物學(xué)檢驗(yàn)難點(diǎn)：鉤端螺旋體、梅毒螺

2、旋體的微生物學(xué)檢驗(yàn)。教法與講授法學(xué)法課型理論課教學(xué)手段多媒體1、概述：主要特點(diǎn)及分類。（10min）2、鉤端螺旋體：形態(tài)染色、培養(yǎng)、抗原構(gòu)造與分類。致病性與免疫性，微生物學(xué)檢查教學(xué)及防治原則。（35min）內(nèi)容與3、梅毒螺旋體：形態(tài)染色、培養(yǎng)特性、抗原構(gòu)造。致病性與免疫性，微生物學(xué)檢查及時(shí)間防治原則。（35min）分配4、其他螺旋體。(10min)小結(jié)（10min）復(fù)習(xí)1、什么叫螺旋體？有哪些特征？思考題2、梅毒螺旋體的血清學(xué)檢測包括哪些試驗(yàn)？其原理如何？1、張卓然主編《臨床微生物學(xué)與微生物檢驗(yàn)》人衛(wèi)出版社第

3、3版2006.11參考資料2、倪語星主編《臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)》人衛(wèi)出版社第4版，2007年3、李凡主編《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》人衛(wèi)出版社第7版2008.1本次課首先應(yīng)重點(diǎn)講授螺旋體的概念與基本特征，尤其是與其他微生物的區(qū)別。自評其次是鉤端螺旋體、梅毒螺旋體的微生物學(xué)檢查及致病性，螺旋體常用的染色法是鍍銀染色法，該法的操作方法及結(jié)果觀察可以放在實(shí)驗(yàn)課介紹。1第二十七章螺旋體及檢驗(yàn)(spirochete)螺旋體是一類細(xì)長、柔軟、彎曲呈螺旋狀、運(yùn)動活潑的原核細(xì)胞型微生物。生物學(xué)地位介于細(xì)菌與原蟲之間。有細(xì)胞壁、原始核，以二

4、分裂方式繁殖，對抗生素敏感等。其中致病性螺旋體主要有鉤端螺旋體屬、疏螺旋體屬、密螺旋體屬等3個(gè)屬。第一節(jié)鉤端螺旋體（Leptospira）有2種：問號鉤端螺旋體——人畜共患??；雙曲鉤端螺旋體——不致病。一、生物學(xué)性狀1.形態(tài)染色螺旋細(xì)密、規(guī)則，形似細(xì)小珍珠排列的細(xì)鏈。一端或兩端呈鉤狀，故名鉤端螺旋體。運(yùn)動活潑，常使菌體呈C、S或8字型。G-，但不易著色。常用Fontana鍍銀染色法，被染成棕褐色。暗視野顯微鏡下可見活潑運(yùn)動、折光性強(qiáng)而成白色的鉤端螺旋體。2.培養(yǎng)特性需氧或微需氧，營養(yǎng)要求高，常用Korthof

5、培養(yǎng)基，其中含10%新鮮滅活兔血清或牛血清，蛋白胨和磷酸鹽緩沖液（血清除促進(jìn)鉤體生長外，還可中和其產(chǎn)生的毒性）。適宜生長溫度為28-30℃，若11-13℃能生長的為非致病的雙曲鉤端螺旋體。最適pH7.2-7.6，pH<6.5死亡，最高能耐pH8.4。在人工培養(yǎng)基中生長緩慢：液體培養(yǎng)基：28℃培養(yǎng)1-2周，液體培養(yǎng)基呈半透明云霧狀生長。1%瓊脂固體：28℃1-3周，可形成透明、不規(guī)則，d<2mm的扁平小菌落。生化反應(yīng)不活潑，不分解糖類和蛋白質(zhì)，有過氧化氫酶，有的菌株可溶血。3.抵抗力對熱和酸抵抗力弱，60℃1m

6、in即死亡。0.2%來蘇、1:2000升汞、1%石炭酸經(jīng)10~30min被殺滅。對青霉素敏感。2在夏秋季酸鹼度中性的濕土或水中可存活20天以上，甚至數(shù)月之久，這在本菌的傳播上有重要意義。4.抗原構(gòu)造與分類1）屬特異性抗原（菌體抗原）：脂多糖復(fù)合物，用于分群。2）型特異性抗原（表面抗原）：多糖蛋白復(fù)合物，用于分型。問號狀鉤端螺旋體至少可分為25個(gè)血清群、273個(gè)血清型。我國已發(fā)現(xiàn)的致病性鉤端螺旋體至少有19個(gè)血清群、74個(gè)血清型，是發(fā)現(xiàn)血清型最多的國家。二、致病性與免疫性1、致病物質(zhì)?（1）內(nèi)毒素樣物質(zhì)(ELS

7、)或稱脂多糖樣物質(zhì)(LLS)?（2）溶血素：溶解紅細(xì)胞，引起貧血、出血、肝腫大、黃疸、血尿。?（3）細(xì)胞毒性因子(CTF)：引起小鼠肌肉痙攣、呼吸困難而死亡。?（4）細(xì)胞致病作用(CPE)物質(zhì)：56℃經(jīng)30分鐘被破壞。注射入家兔，可形成紅斑和水腫。2、所致疾病鉤端螺旋體?。ㄒ环N人畜共患傳染?。Υ嫠拗鳎菏蠛拓i，其他：50多種動物（蛇、雞、鴨、鵝等）傳播途徑：人與污染水或土壤接觸,經(jīng)粘膜或破損皮膚進(jìn)入;經(jīng)胎盤垂直傳播.臨床表現(xiàn)：大多隱性感染，隨尿排出。輕重程度與感染鉤體型別、毒力、免疫性有關(guān)。輕者似感冒，重者

8、引起內(nèi)臟器官和神經(jīng)系統(tǒng)的損害。先形成鉤體血癥,進(jìn)入損傷全身毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及肝、腎、肺心及中樞神經(jīng)。疾病特點(diǎn)：起病急、高熱、乏力、全身酸痛、眼結(jié)膜充血、腓腸肌壓痛、表淺淋巴結(jié)腫大。免疫性：疾病后可獲得抗同型鉤體的持久免疫力。細(xì)胞免疫為主。三、微生物學(xué)檢查法（一）標(biāo)本采集鉤端螺旋體可從臨床標(biāo)本、攜帶者和自然界的水中分離獲得。標(biāo)本包括血液、尿和腦脊液，發(fā)病早期(10天內(nèi))血液的陽性率高，2周后尿和腦脊液