乙型病毒性肝炎臨床轉(zhuǎn)歸與機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀況的相關(guān)性研究

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1、乙型病毒性肝炎臨床轉(zhuǎn)歸與機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀況的相關(guān)性研究[摘要]目的探討乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、血清干擾素-Y(IFN-Y)和腫瘤壞死因子-a(TNF-a)的變化與疾病臨床轉(zhuǎn)歸的關(guān)系。方法收集2009年1?12月益陽市中心醫(yī)院診治的352例乙肝病毒性肝炎患者,并選擇同期健康人82例作為對(duì)照。采用流式細(xì)胞儀檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+),ELISA法檢測細(xì)胞外血清IFN-Y和TNF-a,比較乙肝病毒性肝炎患者與健康人外周血T淋巴細(xì)胞亞群及IFN-Y和TNF-a水平。結(jié)果不

2、同HBV-DNA載量的患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IFN-V和TNF-a水平與健康人比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。IFN-a治療患者治療6個(gè)月和隨訪1、3、5年時(shí),HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率均高于保肝護(hù)肝基礎(chǔ)治療患者(P0.05).HBV-DNAnegativeratesofpatientsgivenIFN-atreatmentat6monthsfinished,follow-up1,3,5yearswerehigherthanthosepatientsgivenliverprot

3、ectionbasictreatment(P[Keywords]HBV;Cellularimmunefunction;Prognosis乙型肝炎病毒(HBV)是一種嗜肝DNA病毒,人體感染后引起急性、慢性乙型肝炎或成為無癥狀病毒攜帶者,遷延難愈,可發(fā)展成為肝硬化、肝癌等[1],但目前對(duì)其發(fā)病機(jī)制尚未徹底清楚,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為與免疫應(yīng)答或免疫調(diào)節(jié)功能紊亂有關(guān)。成人、兒童及幼兒感染HBV后,分別有5%、30%和95%成為慢性HBV感染者,這表明機(jī)體免疫成熟程度是決定HBV持續(xù)感染的重要因素[2]。因此深入研究其發(fā)病機(jī)制

4、和感染慢性化的原因,了解不同類型HBV感染者免疫應(yīng)答的特點(diǎn)與宿主免疫功能之間的關(guān)系,探討機(jī)體自身細(xì)胞免疫功能在乙型病毒性肝炎轉(zhuǎn)歸中的作用是當(dāng)前亟需解決的課題。1資料與方法1.1一般資料對(duì)2009年1?12月益陽市中心醫(yī)院(以下筒稱“我院”)診治的HBV感染者進(jìn)行回顧性流行病學(xué)調(diào)查后獲得869例血清標(biāo)本。經(jīng)乙肝兩對(duì)半及熒光定量PCR檢測HBV-DNA檢查,并排除合并其他病毒感染發(fā)現(xiàn),現(xiàn)行HBV感染者352例,其中HBV-DNA陽性209例,HBV-DNA陰性143例;男196例,女156例;年齡1?46歲,平均(

5、29.65±15.28)歲;按不同轉(zhuǎn)歸[3-4]分:急性或亞急性肝衰竭者96例,急性自限性HBV感染者86例,慢性HBV感染者90例,隱匿性HBV感染者80例。再選擇同期來我院健康體檢者82例作為對(duì)照,均無心、肝、肺、腎等重要臟器疾病,經(jīng)臨床檢查排除炎癥、免疫性疾病和腫瘤,HBV標(biāo)記測定陰性且肝腎功能正常。其中男42例,女40例;年齡2?50歲,平均(31.17±13.46)歲。兩組年齡、性別比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.935,P〉0.05)。1.2方法1.2.1檢測方法1.2.1.1血清病毒學(xué)標(biāo)志物檢測乙

6、肝五項(xiàng)指標(biāo)檢測采用ELISA法,試劑由上??迫A生物公司生產(chǎn),操作過程按說明書進(jìn)行。1.2.1.2血清HBV-DNA檢測HBV-DNA檢測采用熒光定量PCR法,HBV-DNA>1.0X103copies/mL判定為陽性,試劑由上海萬興生物公司生產(chǎn),操作過程按說明書進(jìn)行。1.2.1.3流式細(xì)胞儀檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群采用Beckman-Coulter公司的EPICS-XL型流式細(xì)胞儀進(jìn)行熒光標(biāo)記抗體檢測。檢測淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+)所用的單克隆抗體及其組合為:TC-CD3/FITC-CD4/PE

7、-CD8:同型陰性對(duì)照分別為Tc-IgG2a/PE-IgG2a/FITC-IgG2a;上述試劑均購自CALTAG公司,操作過程按說明書進(jìn)行。1.2.1.4血清細(xì)胞因子檢測采用ELISA法檢測細(xì)胞外血清細(xì)胞因子干擾素-Y(IFN-Y)和腫瘤壞死因子-a(TNF-a),試劑盒購自DIACLONE公司,具體步驟按說明書嚴(yán)格操作。1.2.2治療方法HBc-IgM陽性患者依患者經(jīng)濟(jì)狀況及自愿,采用保肝護(hù)肝基礎(chǔ)治療,干擾素-a(IFN-a)治療。治療滿6個(gè)月后檢測患者細(xì)胞免疫功能指標(biāo)。1.2.2.1IFN-a治療IFN-a

8、5X106U,皮下注射,每曰1次,2周后改為每周3次。1.2.2.2保肝護(hù)肝基礎(chǔ)治療采用降酶、保肝治療。治療滿3個(gè)月者作為觀察統(tǒng)計(jì)對(duì)象。治療6個(gè)月后HBV-DNA陰轉(zhuǎn)或下降〉1.00X105coples/mL者進(jìn)入繼續(xù)治療組,再治療6個(gè)月,治療后隨訪1、3、5年再觀察HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率。最后IFN-a治療106例,保肝護(hù)肝基礎(chǔ)治療106例,共212例。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS16

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