葉片熒光測(cè)量實(shí)驗(yàn)報(bào)告

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1、專(zhuān)業(yè)技術(shù)資料整理分享葉片熒光測(cè)量實(shí)驗(yàn)報(bào)告1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.實(shí)驗(yàn)方法利用PAM100,熒光成像系統(tǒng)測(cè)量葉綠素?zé)晒?.實(shí)驗(yàn)原理及一些參數(shù)的意義熒光的變化反映光合與熱耗散的變化。光化學(xué)淬滅（PhotochemicalQuenching）:由于光合作用引起的熒光下降，反映了光合活性的高低。qP=(Fm’-Fs)/Fv’=1-(Fs-Fo’)/(Fm’-Fo’)（基于“沼澤模型”）qL=(Fm’-F)/(Fm’-Fo’)·Fo’/F=qP·Fo’/F（基于“湖泊模型”）非光化學(xué)淬滅（Non-PhotochemicalQu

2、enching）:由于熱耗散引起的熒光下降。qN=(Fv-Fv’)/Fv=1-(Fm’-Fo’)/(Fm-Fo)NPQ=(Fm-Fm’)/Fm’=Fm/Fm’-1，不需測(cè)定Fo’，適合野外調(diào)查qN或NPQ反映了植物耗散過(guò)剩光能轉(zhuǎn)化為熱的能力，反映了植物的光保護(hù)能力。Fv/Fm=(Fm-Fo)/Fm:PSII的最大量子效率，反映植物潛在最大光合能力，高等植物一般在0.8－0.84之間，當(dāng)植物受到脅迫（Stress）時(shí)，F(xiàn)v/Fm顯著下降。ΦPSII=Yield=(Fm’-Fs)/Fm’=ΔF/Fm’=qP·Fv

3、’/Fm’:任一光照狀態(tài)下PSWORD格式可編輯專(zhuān)業(yè)技術(shù)資料整理分享II的實(shí)際量子產(chǎn)量（實(shí)際光合能力、實(shí)際光合效率）不需暗適應(yīng)，不需測(cè)定Fo’，適合野外調(diào)查。Y(NPQ)=1-Y(II)-1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1))：調(diào)節(jié)性能量耗散，PSII處調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)量。若Y(NPQ)較高，一方面表明植物接受的光強(qiáng)過(guò)剩，另一方面則說(shuō)明植物仍可以通過(guò)調(diào)節(jié)（如將過(guò)剩光能耗散為熱）來(lái)保護(hù)自身。Y（NPQ）是光保護(hù)的重要指標(biāo)。Y(NO)=1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1))：非調(diào)節(jié)性能量耗散PSII

4、處非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)量。若Y(NO)較高，則表明光化學(xué)能量轉(zhuǎn)換和保護(hù)性的調(diào)節(jié)機(jī)制（如熱耗散）不足以將植物吸收的光能完全消耗掉。也就是說(shuō)，入射光強(qiáng)超過(guò)了植物能接受的程度。這時(shí)，植物可能已經(jīng)受到損傷，或者（盡管還未受到損傷）繼續(xù)照光的話植物將要受到損傷。Y（NO）是光損傷的重要指標(biāo)。P：光合速率，即相對(duì)電子傳遞速率rETRPm:最大光合速率，即最大相對(duì)電子傳遞速率rETRmaxa：初始斜率，反映了光能的利用效率b：光抑制參數(shù)Ik=Pm/a：半飽和光強(qiáng)，反映了樣品對(duì)強(qiáng)光的耐受能力。WORD格式可編輯專(zhuān)業(yè)技術(shù)資

5、料整理分享AL:作用光ML:檢測(cè)光SP/P+Fsp:飽和脈沖光注：光化學(xué)淬滅可以被一種短飽和脈沖光（0.2－1s）暫時(shí)完全抑制，剩余的熒光淬滅就是非光化學(xué)淬滅。（葉綠素a熒光理論及其應(yīng)用張西斌）1.實(shí)驗(yàn)步驟4.1Dual-Pam100的操作步驟4.1.1參數(shù)調(diào)整4.1.1.1打開(kāi)Dual-Pam100的界面，更改下面參數(shù)：Mode:fluo+P700;Meanslight:fiuo-int=10P700-int=5Actlight:Act.red.right-int=17Farredlight=5Width=

6、40sSatpulse:P+F+sp--int=10;4.1.1.2點(diǎn)Light，進(jìn)入界面，再點(diǎn)edit進(jìn)行下面參數(shù)的編輯：Intense1，4,8,12,14,16,18,19,20WORD格式可編輯專(zhuān)業(yè)技術(shù)資料整理分享Time2,2,2,2,2,2,2,2,2,之后的全部設(shè)置為0；1.1.2進(jìn)入測(cè)定界面開(kāi)始測(cè)定1.1.2.1回到slowkinetics界面點(diǎn)擊F0，F(xiàn)m(確定Y（II）值0.8-0.85之間)→點(diǎn)Bal(平衡光系統(tǒng)I，II)→點(diǎn)Pm(待回復(fù)灰色)→點(diǎn)start(過(guò)4s后)→點(diǎn)Al作用光（過(guò)

7、3min半）→點(diǎn)P+F+sp飽和光（此時(shí)一般會(huì)觀察到紅色曲線達(dá)到平衡）→過(guò)30s左右關(guān)掉Al(曲線會(huì)下降)→再過(guò)1min左右（曲線平穩(wěn)）→點(diǎn)stop→在當(dāng)前界面點(diǎn)擊曲線保存按鈕保存曲線。4.1.2.2回到lightcurve界面點(diǎn)Bal→點(diǎn)start（出現(xiàn)對(duì)話框newF0,FmandPm-determindtion…點(diǎn)NO）→等曲線繪成后點(diǎn)report保存數(shù)據(jù)→數(shù)據(jù)保存后手動(dòng)清空當(dāng)前界面數(shù)據(jù)。4.2熒光成像系統(tǒng)的操作先打開(kāi)熒光成像儀再打開(kāi)電腦對(duì)應(yīng)系統(tǒng)→將葉片按要求放在葉室；4.2.1進(jìn)入setting界面如下

8、調(diào)整參數(shù)：Meas.Light-int=1Frequence=1;Act.light-int=19widths=0;ImageCorrection=MAXI;ImageTransformation=Rotate180°Battery=16.3V;WORD格式可編輯專(zhuān)業(yè)技術(shù)資料整理分享Gain=1Damping=2Sat.Pulse-int=10No=1Intervals=30;SlowInducti