異體神經(jīng)移植的研究進(jìn)展

《異體神經(jīng)移植的研究進(jìn)展 》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。

1、異體神經(jīng)移植的研究進(jìn)展【關(guān)鍵詞】異體神經(jīng)移植免疫細(xì)胞在神經(jīng)移植中，由于自體神經(jīng)及其替代物均具有不同程度的缺陷，目前在周圍神經(jīng)移植領(lǐng)域，同種異體神經(jīng)移植是該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。異體神經(jīng)取材廣泛、方便，可用于長(zhǎng)段神經(jīng)缺損的移植。但是新鮮異體神經(jīng)移植后會(huì)因免疫排斥反應(yīng)導(dǎo)致失敗，為了減輕免疫排斥反應(yīng)，人們進(jìn)行了相關(guān)研究，現(xiàn)綜述如下。1免疫學(xué)研究移植的核心問(wèn)題是主要組織相容性復(fù)合體(MHC)，MHC的表達(dá)產(chǎn)物主要存在于細(xì)胞膜表面，其構(gòu)成了多種細(xì)胞的膜抗原，這是產(chǎn)生移植免疫的主要原因［1］。1.1雪旺細(xì)胞經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，周圍神經(jīng)組織相容性復(fù)合體的表達(dá)產(chǎn)物主要存在于雪旺細(xì)胞表面，構(gòu)成了雪旺細(xì)

2、胞的膜抗原，這是產(chǎn)生移植免疫排斥的主要原因。此點(diǎn)，Sanders等在1954年就提出了雪旺細(xì)胞是宿主免疫排斥反應(yīng)的主要標(biāo)靶，體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)了雪旺細(xì)胞的表面攜帶MHC?Ⅱ。雪旺細(xì)胞可分泌多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（如NGF、BDNF、FGF等），同時(shí)還產(chǎn)生ECG和細(xì)胞粘附因子，對(duì)促進(jìn)周圍神經(jīng)的生長(zhǎng)發(fā)育和再生起著至關(guān)重要的作用［2］。自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)可在體內(nèi)誘導(dǎo)分化為雪旺細(xì)胞并具有其功能［3］。通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)MSCs分化為雪旺細(xì)胞應(yīng)用于神經(jīng)移植中，取得了良好效果［4］。Hadlock等［5］發(fā)現(xiàn)單層雪旺細(xì)胞覆蓋移植物對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷后功能的恢復(fù)優(yōu)于無(wú)雪旺細(xì)

3、胞覆蓋。關(guān)于雪旺細(xì)胞在移植中的相關(guān)問(wèn)題（如雪旺細(xì)胞可加速與瘢痕形成相關(guān)的硫酸軟骨素蛋白多糖的生成原理及再生神經(jīng)軸突可以生長(zhǎng)進(jìn)入雪旺細(xì)胞移植物，但不能繼續(xù)向外生長(zhǎng)的原因等）還需進(jìn)一步研究。1.2巨噬細(xì)胞巨噬細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)豐富，功能活躍時(shí)內(nèi)含許多顆?；蚩张?，具有變形運(yùn)動(dòng)和吞噬能力，是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，具有抗感染及免疫調(diào)節(jié)作用。機(jī)體局部創(chuàng)傷后，體液中的單核細(xì)胞在多種炎癥介質(zhì)的趨化下轉(zhuǎn)化為巨噬細(xì)胞，浸潤(rùn)于損傷局部，吞噬潰變的髓鞘，同時(shí)釋放胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）及血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)等多種生物活性因子，而且表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體（MHC）抗原等，清除周圍神經(jīng)再生“屏

4、障”，刺激雪旺細(xì)胞分裂、成熟，釋放神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，對(duì)神經(jīng)再生有促進(jìn)作用［6］。也有研究證明巨噬細(xì)胞與神經(jīng)損傷后炎癥反應(yīng)有關(guān)，但認(rèn)為巨噬細(xì)胞抑制神經(jīng)再生［7］。2降低免疫排斥方法的研究2.1冷凍法研究表明，冷凍法保存的異體神經(jīng)其主要組織相容性復(fù)合物的陽(yáng)性表達(dá)和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)降低，從而降低了其免疫原性。國(guó)外有學(xué)者早在1992年就研究了冷凍后的異體坐骨神經(jīng)在神經(jīng)移植中的作用，并發(fā)現(xiàn)移植后的神經(jīng)功能恢復(fù)與自體神經(jīng)無(wú)明顯差異。Hare等［8］通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)短期（6～12h）冷凍保存的異體神經(jīng)不能降低神經(jīng)抗原性，移植效果差。關(guān)于異體神經(jīng)冷凍保存的溫度和時(shí)間，有學(xué)者報(bào)道在－196℃下保

5、存3周的異體神經(jīng)在神經(jīng)移植中免疫排斥反應(yīng)最小。國(guó)內(nèi)有學(xué)者以15％二甲基亞砜（DMSO）為低溫保護(hù)劑，對(duì)SD大鼠坐骨神經(jīng)進(jìn)行－45～－70℃冷凍處理，-196℃液氮保存后觀察神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示在同等超深低溫保存的條件下，不同冷凍處理溫度對(duì)神經(jīng)組織損傷表現(xiàn)不同，－50℃是最佳溫度值。Fox等［9］的試驗(yàn)證實(shí)對(duì)異體神經(jīng)分別冷存1、4、7周，時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)胞免疫反應(yīng)越輕，對(duì)保存7周的神經(jīng)，其免疫排斥反應(yīng)接近缺失，同時(shí)冷凍時(shí)間的延長(zhǎng)不影響神經(jīng)的再生。但也有研究發(fā)現(xiàn)冷凍法破壞了細(xì)胞膜，形成了細(xì)胞崩解碎片，消弱了纖維的長(zhǎng)入及軸突的再生，由于不能夠消除細(xì)胞碎片，仍會(huì)發(fā)生免疫反應(yīng)，常致神

6、經(jīng)移植段瘢痕化。2.2酒精法乙醇可破壞雪旺細(xì)胞的三級(jí)結(jié)構(gòu)而致蛋白變性，但基底膜不受破壞，有利于來(lái)自遠(yuǎn)端的神經(jīng)趨化因子沿著神經(jīng)膜管向近端擴(kuò)張。Hirasaw等將準(zhǔn)備移植的異體神經(jīng)在70％的酒精中浸泡8h，移植后神經(jīng)再生效果良好。但有學(xué)者發(fā)現(xiàn)經(jīng)乙醇處理后的神經(jīng)，雪旺細(xì)胞不能釋放NTF和粘附因子，只能提供機(jī)械支架，影響了神經(jīng)再生效果。2.3化學(xué)法在同種異體神經(jīng)移植中，與免疫排斥反應(yīng)有關(guān)的是雪旺細(xì)胞和髓鞘存在的主要組織相容性復(fù)合體（MHC）。其中雪旺細(xì)胞與免疫排斥關(guān)系密切。為降低同種異體神經(jīng)的抗原性，減輕移植后的免疫排斥反應(yīng)，人們研究發(fā)現(xiàn)，化學(xué)萃取法是一種較為理想的方法，該方法

7、具有以下優(yōu)點(diǎn)［10～12］：①有效地清除細(xì)胞、髓鞘及崩解碎片。②保留了雪旺細(xì)胞基底板層（SCBL）。Dument等［13］應(yīng)用溶血性磷脂膽堿等化學(xué)消毒劑獲得脫細(xì)胞異體神經(jīng)，然后將雪旺細(xì)胞注入脫細(xì)胞神經(jīng)中，制備再細(xì)胞化神經(jīng)移植物。國(guó)內(nèi)眾多學(xué)者在此法的基礎(chǔ)上，將異體的預(yù)變性神經(jīng)和正常神經(jīng)經(jīng)溶血卵磷脂裂解處理后用于神經(jīng)移植，得到了良好的效果。Sondell等［14］應(yīng)用脫氧膽酸鈉和TritonX?100處理鼠坐骨神經(jīng)，可以清除所有細(xì)胞和髓鞘及其崩解碎片，同時(shí)保持了SCBL的完整。衷鴻賓等［15］在Sondell方法的基礎(chǔ)上，發(fā)展了大型哺乳類動(dòng)物