對(duì)復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑免疫增強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)研究

對(duì)復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑免疫增強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)研究

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1、對(duì)復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑免疫增強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)研究摘要:目的觀察復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑免疫增強(qiáng)作用。方法采用單核巨噬細(xì)胞吞噬試驗(yàn)方法,復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑以2.25g生藥/ml和0.75g生藥/ml劑量分別給小鼠連續(xù)腹部涂藥5d。結(jié)果復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑大、小劑量組均能明顯提高單核巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)K值,分別與陰性對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。結(jié)論復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑具有顯著的免疫增強(qiáng)作用。關(guān)鍵詞:復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑免疫增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞Abstract:ObjectiveTheimmunoenhancementeffectofpoundHuangmao

2、daofuchailinimentethodofphagocytosisofmononuclearmacrophagetestaodaofuchailinimentinistreredbyexternaluseonmice'sabdomenindosageof2.25g/mland0.75g/mlrespectivelyforconsecutive7days.ResultspoundHuangmaodaofuchailinimentsignificantlyinhancedtheindexvalueofphagocytosisinmono

3、nuclearmacrophagesinbothdosageof2.25g/mland0.75g/ml.ConclusionpoundHuangmaodaofuchailinimentcaninhancetheimmunityinmice.Keyaodaofuchailiniment;Immunoenhancement;Mononuclearmacrophages  復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑主要由廣西壯藥黃毛豆腐柴與骨碎補(bǔ)、冰片、薄荷腦等配伍制成的乙醇外用透皮搽劑,具有活血化淤、強(qiáng)筋壯骨、驅(qū)風(fēng)止痛之功效。主治腰腿痛、跌打扭傷、風(fēng)濕性和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)

4、炎、脊椎炎、肩周炎等癥。該藥主要通過局部外搽,以發(fā)揮其功效。我們對(duì)該藥進(jìn)行過豚鼠皮膚刺激性試驗(yàn)及制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[1,2]以及抗皮膚損傷和止痛等藥效實(shí)驗(yàn)[3]。本實(shí)驗(yàn)將進(jìn)一步觀察與復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑抗炎作用相關(guān)的免疫增強(qiáng)作用,為該藥的療效提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1器材  1.1材料  復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑由廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院制劑實(shí)驗(yàn)室提供,含生藥量為0.75g/ml,批號(hào)050719;痛腫靈搽劑,廣西龍州方略制藥有限公司產(chǎn)品,批號(hào)061027。75%乙醇消毒液,江西草珊瑚消毒用品公司產(chǎn)品,批號(hào)20060908?! ?.2動(dòng)物KM種小鼠,18~2

5、2g,雌雄兼用,清潔級(jí)動(dòng)物,由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,許可證號(hào):SCXK桂2003-0003。小鼠分性別飼養(yǎng)于空調(diào)室內(nèi),室溫(22±2)℃,濕度(60±5)%,喂標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料,自由飲水和攝食?! ?.3儀器棱光-722型可見分光光度計(jì),由上海精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。  1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用PEMS3.1統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示,采用t檢驗(yàn)作組間比較差異顯著性,P<0.05認(rèn)為有顯著差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2方法與結(jié)果  采用小鼠碳粒廓清法[4,5]。取小鼠48只,雌雄各半,隨機(jī)分為陰性對(duì)照組,陽性對(duì)照組(痛腫靈

6、搽劑),復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑高劑量(2.25g/ml)組、低劑量(0.75g/ml)組,每組12只。實(shí)驗(yàn)前用電剪對(duì)小鼠腹部皮膚脫毛,然后用溫水擦拭干凈。用注射器分別吸取0.3ml各組藥物涂抹于小鼠去毛的皮膚上。陰性對(duì)照組給予僅含相同濃度的酒精,陽性對(duì)照組外搽痛腫靈搽劑,每天涂藥上下午各1次,連續(xù)5d。于末次涂藥60min后,小鼠尾靜脈注射20%印度墨汁0.1ml/10g體重,于注入后的2min和7min時(shí)分別從小鼠眼眶靜脈叢用微量吸管取血20μl,溶于2ml0.1%的Na2CO3溶液中搖勻,于722分光光度計(jì)上650nm處測(cè)定吸光度(O·D

7、值),按公式:K=(logOD1-logOD2)/(t2-t1)計(jì)算吞噬指數(shù)K值,進(jìn)行組間比較t檢驗(yàn),評(píng)價(jià)藥物對(duì)單核巨噬細(xì)胞吞噬功能。表1復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑對(duì)單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(略)  結(jié)果表明,復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑高低劑量組與陽性藥均能顯著提高單核巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)。提示該藥具有明顯的免疫增強(qiáng)作用。3討論  現(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明,炎癥與免疫反應(yīng)是一個(gè)問題的兩個(gè)側(cè)面。兩者在組織、細(xì)胞和分子水平聯(lián)系密切。許多藥物研究也表明,炎癥和免疫密切相關(guān)。眾所周知,炎癥是機(jī)體對(duì)各種致炎因子引起組織損害而產(chǎn)生的一種基本病理過程,也是許多疾病的重要組成部分[6

8、]。由免疫介導(dǎo)的AA大鼠是研究炎癥與免疫的常用動(dòng)物模型,其病理改變與人類的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相似,有局部和全身性炎性反應(yīng)及免疫功能降低或障礙的表現(xiàn)。用此模型,可以系統(tǒng)地觀察和分析藥物的抗炎免疫作用

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