加減抵當(dāng)湯對胰島素抵抗大鼠肝臟胰島素受體基因表達

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1、加減抵當(dāng)湯對胰島素抵抗大鼠肝臟胰島素受體基因表達【摘要】　?。勰康模萏接懠訙p抵當(dāng)湯對IR大鼠肝臟InRmRNA表達的影響。［方法］造模大鼠隨機分成正常組、模型組、加減抵當(dāng)湯高、中、低劑量組、文迪雅組，用RTPCR方法檢測加減抵當(dāng)湯對IR大鼠肝臟InRmRNA表達的影響。［結(jié)果］加減抵當(dāng)湯高、中劑量組能明顯上調(diào)IR大鼠肝臟InRmRNA的表達（P<005或P<001）。［結(jié)論］加減抵當(dāng)湯能上調(diào)InRmRNA的表達，可能是其改善IR的機理之一?！娟P(guān)鍵詞】抵當(dāng)湯胰島素抵抗胰島素受體基因表達　　Abstract:［Objective］Toexpl

2、oretheeffectofmodifiedDidangdecoctiononinsulinreceptorgeneexpressioninliverininsulinresistancerats.［Methods］Theinsulinresistanceratslydividedintothecontrolgroup,themodelcontrolgroup,thehigh,mediumandloodifiedDidangdecoctiongroupsanderasechainreactionodifiedDidangdecoctionontheInRm

3、RNAofliverinrats.［Results］TheInRgeneexpressionlevelediumdoseofmodifiedDidangdecoction（P<005orP<001）.［Conclusion］UpregulationonInRgeneexpressionispossiblyoneofthemechanismsofmodifiedDidangdecoctionintreatinginsulinresistance.　　Keyega公司；RTPCR試劑盒購自TAKARA公司；全自動血液流變儀，LBY/Nb北京

4、普利生集團產(chǎn)品；低溫冰箱：BCD216E/B型，青島海爾電器有限公司產(chǎn)品；凝膠成像分析系統(tǒng)，上海天能科技有限公司產(chǎn)品。PCR循環(huán)儀：Tpersonal型，Biometra公司產(chǎn)品?！　?4藥物加減抵當(dāng)湯組成：酒制大黃9g,桃仁9g,水蛭6g,黃芪20g；以上各藥購自浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，按比例稱取后，水煎后濃縮制成每毫升煎液含生藥3g，高溫消毒滅菌，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｎ牡涎牛嘿徸哉憬嗅t(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，粉碎后溶于09%的生理鹽水?！　?5使用劑量根據(jù)臨床用藥情況，折算成大鼠使用劑量。大、中、小劑量分別是成人（60kg）日用藥量的20、

5、10、5倍，并稀釋成相同的給藥容量。對照組文迪雅取成人（60kg）日用藥量的10倍，并稀釋成相同的給藥容量。　　16處理方法正常組給予常規(guī)飼料同時灌服等容量的生理鹽水，模型組和中藥組給予高脂高糖飲食，模型組同時灌服等容量的生理鹽水，中藥組同時灌服大、中、小劑量的加減抵當(dāng)湯中藥煎劑，西藥對照組給予文迪雅溶解液，共12周。實驗結(jié)束后禁食12h，腹主靜脈取血并取肝組織用于各項檢測。　　17指標(biāo)檢測實驗結(jié)束后，空腹取血，用葡萄糖氧化酶法測葡萄糖（FBS）；放射免疫法測胰島素（FINS）；計算各自胰島素敏感指數(shù)ISI=ln［1/(FBS×FINS)］；脂酶法測膽

6、固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白（HDLC）、低密度脂蛋白（LDLC）；全自動血流變儀測定全血比黏度（RNA和PPARγmRNA的表達(1)組織RNA提?。阂勒誘rizolReagent使用說明書進行。(2)RTPCR：按RTPCR試劑盒中方法操作,設(shè)β肌動蛋白基因（βactin）為內(nèi)參基因。(3)引物及擴增片段,InR引物:上游：5’GCTGAGCAACCTTACCAA3’下游：5’AAATGTGTACGAACTATC3’擴增產(chǎn)物大小為602bp。PPARγ引物上游：5’CACAAGAGCTGACCCAATGGTTGCTG

7、3’下游：5’CGCAGATCAGCAGACTCTGGGTTC3’擴增產(chǎn)物大小為471bp。βactin上游：5’GTCACCAACTGGGACGAT3’下游：5’GAGGCATACAGGGACAACA3’擴增產(chǎn)物大小為209bp。(4)PCR擴增產(chǎn)物分析：PCR產(chǎn)物電泳完畢后在凝膠掃描儀上觀察結(jié)果，用目的基因光密度值與βactin光密度值的比值進行半定量分析，得出結(jié)果?！　?9統(tǒng)計學(xué)方法本實驗數(shù)據(jù)處理采用SPSS115統(tǒng)計軟件。計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用方差分析對各組均數(shù)進行顯著性檢驗，P<005時有統(tǒng)計

8、學(xué)意義?！　?實驗結(jié)果　　21空腹血糖（FBS）、胰島素（FIN