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《加減抵當(dāng)湯對胰島素抵抗大鼠肝臟胰島素受體基因表達》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、加減抵當(dāng)湯對胰島素抵抗大鼠肝臟胰島素受體基因表達【摘要】 ?。勰康模萏接懠訙p抵當(dāng)湯對IR大鼠肝臟InRmRNA表達的影響。[方法]造模大鼠隨機分成正常組、模型組、加減抵當(dāng)湯高、中、低劑量組、文迪雅組,用RTPCR方法檢測加減抵當(dāng)湯對IR大鼠肝臟InRmRNA表達的影響。[結(jié)果]加減抵當(dāng)湯高、中劑量組能明顯上調(diào)IR大鼠肝臟InRmRNA的表達(P<005或P<001)。[結(jié)論]加減抵當(dāng)湯能上調(diào)InRmRNA的表達,可能是其改善IR的機理之一?!娟P(guān)鍵詞】抵當(dāng)湯胰島素抵抗胰島素受體基因表達 Abstract:[Objective]Toexpl
2、oretheeffectofmodifiedDidangdecoctiononinsulinreceptorgeneexpressioninliverininsulinresistancerats.[Methods]Theinsulinresistanceratslydividedintothecontrolgroup,themodelcontrolgroup,thehigh,mediumandloodifiedDidangdecoctiongroupsanderasechainreactionodifiedDidangdecoctionontheInRm
3、RNAofliverinrats.[Results]TheInRgeneexpressionlevelediumdoseofmodifiedDidangdecoction(P<005orP<001).[Conclusion]UpregulationonInRgeneexpressionispossiblyoneofthemechanismsofmodifiedDidangdecoctionintreatinginsulinresistance. Keyega公司;RTPCR試劑盒購自TAKARA公司;全自動血液流變儀,LBY/Nb北京
4、普利生集團產(chǎn)品;低溫冰箱:BCD216E/B型,青島海爾電器有限公司產(chǎn)品;凝膠成像分析系統(tǒng),上海天能科技有限公司產(chǎn)品。PCR循環(huán)儀:Tpersonal型,Biometra公司產(chǎn)品?! ?4藥物加減抵當(dāng)湯組成:酒制大黃9g,桃仁9g,水蛭6g,黃芪20g;以上各藥購自浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院,按比例稱取后,水煎后濃縮制成每毫升煎液含生藥3g,高溫消毒滅菌,置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩N牡涎牛嘿徸哉憬嗅t(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院,粉碎后溶于09%的生理鹽水?! ?5使用劑量根據(jù)臨床用藥情況,折算成大鼠使用劑量。大、中、小劑量分別是成人(60kg)日用藥量的20、
5、10、5倍,并稀釋成相同的給藥容量。對照組文迪雅取成人(60kg)日用藥量的10倍,并稀釋成相同的給藥容量。 16處理方法正常組給予常規(guī)飼料同時灌服等容量的生理鹽水,模型組和中藥組給予高脂高糖飲食,模型組同時灌服等容量的生理鹽水,中藥組同時灌服大、中、小劑量的加減抵當(dāng)湯中藥煎劑,西藥對照組給予文迪雅溶解液,共12周。實驗結(jié)束后禁食12h,腹主靜脈取血并取肝組織用于各項檢測。 17指標(biāo)檢測實驗結(jié)束后,空腹取血,用葡萄糖氧化酶法測葡萄糖(FBS);放射免疫法測胰島素(FINS);計算各自胰島素敏感指數(shù)ISI=ln[1/(FBS×FINS)];脂酶法測膽
6、固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDLC)、低密度脂蛋白(LDLC);全自動血流變儀測定全血比黏度(RNA和PPARγmRNA的表達(1)組織RNA提?。阂勒誘rizolReagent使用說明書進行。(2)RTPCR:按RTPCR試劑盒中方法操作,設(shè)β肌動蛋白基因(βactin)為內(nèi)參基因。(3)引物及擴增片段,InR引物:上游:5’GCTGAGCAACCTTACCAA3’下游:5’AAATGTGTACGAACTATC3’擴增產(chǎn)物大小為602bp。PPARγ引物上游:5’CACAAGAGCTGACCCAATGGTTGCTG
7、3’下游:5’CGCAGATCAGCAGACTCTGGGTTC3’擴增產(chǎn)物大小為471bp。βactin上游:5’GTCACCAACTGGGACGAT3’下游:5’GAGGCATACAGGGACAACA3’擴增產(chǎn)物大小為209bp。(4)PCR擴增產(chǎn)物分析:PCR產(chǎn)物電泳完畢后在凝膠掃描儀上觀察結(jié)果,用目的基因光密度值與βactin光密度值的比值進行半定量分析,得出結(jié)果?! ?9統(tǒng)計學(xué)方法本實驗數(shù)據(jù)處理采用SPSS115統(tǒng)計軟件。計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用方差分析對各組均數(shù)進行顯著性檢驗,P<005時有統(tǒng)計
8、學(xué)意義?! ?實驗結(jié)果 21空腹血糖(FBS)、胰島素(FIN