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《tnf-α對滋養(yǎng)細(xì)胞visfatin表達的調(diào)控及機制研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、授予單位代碼10089學(xué)號或申請?zhí)?0152024中國圖書分類號R714.7HebeiMedicaluniversity碩士學(xué)位論文學(xué)術(shù)學(xué)位TNF-α對滋養(yǎng)細(xì)胞visfatin表達的調(diào)控及機制研究研究生：張艷紅導(dǎo)師：霍琰教授專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)二級學(xué)院：河北省人民醫(yī)院2018年3月目錄中文摘要…………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………3英文縮寫………………………………………………………………6研究論文TNF-α對滋養(yǎng)細(xì)胞visfatin表達的
2、調(diào)控及機制研究前言………………………………………………………………………7材料與方法………………………………………………………8結(jié)果………………………………………………………………19附圖………………………………………………………………21附表………………………………………………………………30討論………………………………………………………………31結(jié)論………………………………………………………………35參考文獻…………………………………………………………35綜述內(nèi)脂素與妊娠期代謝綜合征……………………
3、……………41致謝……………………………………………………………………50個人簡歷………………………………………………………………51中文摘要TNF-α對滋養(yǎng)細(xì)胞visfatin表達的調(diào)控及機制研究摘要內(nèi)脂素(visfatin)是一種主要由胎盤和內(nèi)臟脂肪組織表達和分泌的脂肪細(xì)胞因子，可參與炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)，并具有胰島素模擬活性，參與糖脂代謝。近年發(fā)現(xiàn)內(nèi)脂素還與胰島素抵抗(IR)相關(guān)，參與妊娠期糖尿病(GDM)的發(fā)生發(fā)展。過氧化物酶增殖物激活受體(PPAR-γ)是一種細(xì)胞核受體，主要表達于脂肪組織，可經(jīng)噻唑
4、烷二酮類藥物激活，調(diào)節(jié)糖脂代謝，還可抑制炎癥因子的表達，發(fā)揮抗炎作用。c-Jun氨基末端激酶(JNK)屬于絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，能夠被多種細(xì)胞因子和應(yīng)激激活，被認(rèn)為是聯(lián)系炎癥和胰島素抵抗的重要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。GDM患者TNF-α等炎癥因子水平升高，對滋養(yǎng)細(xì)胞visfatin的表達具有調(diào)節(jié)作用，而PPAR-γ和/或JNK信號通路是否參與TNF-α對滋養(yǎng)細(xì)胞visfatin表達的調(diào)節(jié)，尚未見研究和報道。目的：通過BeWo細(xì)胞的體外培養(yǎng)，探討TNF-α對BeWo細(xì)胞visfatin表達的影響及調(diào)控機制。方法：
5、用不同濃度的TNF-α(0,1,10,100ng/mL)作用于BeWo細(xì)胞48h，F(xiàn)QRT-PCR檢測細(xì)胞visfatin、PPAR-γmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，選出有效作用濃度；以該濃度的TNF-α作用于BeWo細(xì)胞12、24、48、72h，F(xiàn)QRT-PCR檢測visfatin、PPAR-γmRNA轉(zhuǎn)錄水平，選出有效作用時間；以有效濃度和時間干預(yù)BeWo細(xì)胞后，Western-blot檢測細(xì)胞中visfatin、PPAR-γ、JNK及p-JNK蛋白的表達水平，后加入JNK抑制劑SP600125，Wester
6、n-blot檢測visfatin、JNK及p-JNK蛋白水平，ELISA檢測細(xì)胞外visfatin的分泌水平。結(jié)果：1.不同濃度的TNF-α(1,10,100ng/mL)均使visfatin及PPAR-γmRNA表達降低，呈濃度依賴性；相關(guān)性分析表明：visfatin與PPAR-γmRNA表達正相關(guān)(r=0.794，P<0.01)。2.TNF-α(100ng/ml)作用BeWo細(xì)胞12、24、48、72h，PPAR-γmRNA表達僅在48h降低；visfatinmRNA表達于12、24h無明顯變化，48
7、、72h表達降低(P<0.01)，48h降低最明顯；visfatin與PPAR-γmRNA表達正相關(guān)(r=0.749，P<0.01)。1中文摘要3.TNF-α(100ng/ml)作用BeWo細(xì)胞48h后，PPAR-γ及JNK蛋白表達無明顯變化，visfatin蛋白表達降低(P<0.01)，同時JNK磷酸化水平增加(P<0.05)，visfatin與p-JNK蛋白水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.816，P=0.048)；加入JNK抑制劑SP600125后，與未用抑制劑組比較，JNK磷酸化水平降低，visfat
8、in蛋白水平增加(均P<0.01)。4.對照組、TNF-α組和TNF-α+SP600125組分別處理細(xì)胞48h后，TNF-α組與對照組相比，visfatin的分泌水平略有降低(0.110±0.066vs.0.169±0.092ng/ml，P=0.38)，TNF-α+SP600125組與TNF-α組比較，visfatin分泌略有升高(0.235±0.067vs.0.110±0.066ng/ml，P=0.09)。結(jié)論：1.TNF-α可通過激活J
