感染性腹瀉分離培養(yǎng)技術與藥物敏感試驗技術

《感染性腹瀉分離培養(yǎng)技術與藥物敏感試驗技術》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、感染性腹瀉分離培養(yǎng)技術與藥物敏感試驗技術張曉兵(肇東市第一醫(yī)院黑龍江肇東151100)【摘要】目的：探討感染性腹瀉病原菌分離培養(yǎng)技術與藥物敏感試驗技術。方法：選取2015年3月?12只收治的感染性腹瀉住院患者43例便分離培養(yǎng)技術與藥物敏感試驗技術方法進行分析。結果：對急性感染性腹瀉糞便，檢出致病菌18株，其中賀氐菌屬16株，腸炎沙門氏菌1株，綠膿桿菌1例。結論：腹瀉病原菌種類繁多，實驗室不可能對所有可能引起腹瀉的病原菌都進行培養(yǎng)。為保證獲得較高的檢出率，可以對患者進行腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)。【關鍵詞】感染性腹瀉；分離培養(yǎng)技術；藥物感試驗技術【中圖分類號】R446【文獻標識碼】

2、A【文章編號】1007-8231(2016)01-0078-02腸道細菌學實驗室主要從事臨床感染性腹瀉的病原學診斷，是臨床微生物實驗室的一個功能單元。在國內各級醫(yī)院，腸道細菌學實驗室或隸屬于檢驗科的臨床微生物室，或隸屬于感染病科而成為一個獨立的實驗室。不論屬于哪種模式,都必須符合臨床實驗室管理的基木要求和擁有腸道細菌檢驗的基木技術。1.資料與方法1.1一般資料選取2014年1月?2015年10月收治的急性感染性腹瀉性腹瀉住院患者43例，其中男22例，女21例，年齡10?80歲，平均年齡42歲。腹瀉每日3?10次，一至數日不等。便為稀水樣便，粘液膿血便伴里急后重，多有發(fā)熱，

3、體溫38?40°C1.2方法1.2.1分離培養(yǎng)技術使用濾膜技術，直接在非選擇性瓊脂平板上放置滅菌的0.65μm孔徑大小的醋酸纖維素濾膜。將10?15滴糞便懸液置于濾膜上,在35?37°C平板培養(yǎng)1小吋。取下濾膜，將平板在微需氧條件下，37°C培養(yǎng)過夜（每毫升糞便懸液菌落數〉105才采用此方法）。此方法不如直接培養(yǎng)法敏感。采用可替代的彎曲菌平板37°C或42°C培養(yǎng)過夜。無血培養(yǎng)基Preston配方炭粉、頭孢唑林、脫氧膽酸鈉瓊脂。用不含頭孢噻吩的培養(yǎng)基，37%培養(yǎng)7天。1.2.2藥物敏感試驗技術常用的抗菌藥物敏感性試驗方法奮紙片擴散法、稀釋法和E試驗法。1.2.2.

4、1紙片擴散法該法由Kirby和Bauer建立，故又稱K-B法。將細菌涂布在瓊脂平板上，再貼上含一定量抗菌藥物的藥敏紙片，經35°C培養(yǎng)后量取紙片周圍的抑菌圈直徑，當該直徑人于等于敏感限吋為敏感，當該直徑小于等于耐藥限吋為耐藥，直徑在敏感限和耐藥限之間時為中介。某藥的藥敏試驗結果為敏感吋，臨床上可考慮選用為抗感染治療藥物，耐藥吋臨床不能應用［1］。中介是試驗設定的一個緩沖區(qū)，防止因試驗的微小誤差而造成結果解釋決然相反的嚴重錯誤。另外，當某藥藥敏試驗為中介吋，如果能夠提高該藥的用藥劑量（如p-內酰胺類），或感染部位該藥物濃度很高（如喹諾酮類在尿中），在沒奮其他更好的選擇時該藥

5、亦可選用。紙片擴散法的優(yōu)點是結果直觀和易于理解，但是，紙片擴散法無定量結果，對于慢生長菌和擴散慢的藥物不適用。1.2.2.2稀釋法將抗菌藥物用肉湯培養(yǎng)基或瓊脂培養(yǎng)基進行倍比稀釋，然后接種試驗菌，經35°C培養(yǎng)，以內眼未見細菌生長的藥物最小濃度判定為最小抑菌濃度。根據稀釋介質的不同，又分為肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法；根據培養(yǎng)基用量的不同又分為宏量稀釋法和微量稀釋法。稀釋法沒奮紙片法藥敏試驗簡單、方便，測定結果是一個濃度值，盡管可根據MIC值的判斷標準判斷敏感、耐藥和中介，但仍需要奮經驗的臨床醫(yī)師或檢驗醫(yī)師根據臨床情況加以分析和解釋［2】。MIC的測定是藥敏試驗的標準方法，其結果

6、準確可靠。當藥物劑量必須嚴格監(jiān)控吋，紙片法不適用（如對于慢生長菌）吋，紙片法結果需要進一步證實吋，感染菌對無毒的β-內酰胺類藥物耐藥或中介需要大劑量進行治療吋，某些藥物在尿或某個組織中濃度較高常規(guī)劑量可能奏效吋，這些吋候，常常需要MIC的測定結果來幫助進行分析和判斷。1.2.2.3E試驗（Etest）:又稱濃度梯度紙條擴散法MIC測定。本法融合了紙片法操作簡單和稀釋法可給出定量結果的優(yōu)點，不僅可用于一般細菌的MIC測定，還可用于一些慢生長菌、厭氧菌和真菌。1.結果對急性感染性腹瀉糞便，檢出致病菌18株，其中賀氏菌屬16株，腸炎沙門氏菌1株，綠膿桿菌1例。2.討論

7、腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)腹瀉病原菌種類繁多，實驗室不可能對所冇可能引起腹瀉的病原菌都進行培養(yǎng)。為保證獲得較高的檢出率，可以對患者進行腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)，包括沙門菌、志賀菌、氣單胞菌、鄰單胞菌、弧菌，也包括可引起菌群失調的金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌和酵母菌。糞便標本至少應接種XLD（或SS）、EMB（或MAC或中國藍）等培養(yǎng)基，必要吋加血平皿。例如，血平皿+SS+MAC用于糞便常規(guī)培養(yǎng)。腸道致病菌的分離培養(yǎng)應注意如下幾點：SS培養(yǎng)基對部分志賀菌冇抑制作用。常用的腸道選擇性培養(yǎng)基（如SS等）對氣單胞菌、鄰單胞菌有抑制作用，初次分離吋應接種