枸杞多糖對(duì)荷瘤小鼠腫瘤微環(huán)境t淋巴細(xì)胞亞群及樹(shù)突狀細(xì)胞的影響

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1、枸杞多糖對(duì)荷瘤小鼠腫瘤微環(huán)境T淋巴細(xì)胞亞群及樹(shù)突狀細(xì)胞的影響作者:何彥麗,應(yīng)逸,許艷麗,蘇俊芳,羅惠,王惠峰【關(guān)鍵詞】枸杞多糖[摘要]目的:研究枸杞多糖(Lyciumbarbarumpolysaccharide,LBP)對(duì)荷瘤小鼠體內(nèi)腫瘤微環(huán)境中T淋巴細(xì)胞亞群和樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcells,DCs)的影響,探討LBP對(duì)荷瘤機(jī)體免疫逃逸的干預(yù)作用。方法:用LBP給H22荷瘤小鼠灌胃,連續(xù)2周后,測(cè)定腫瘤重量,采用流式細(xì)胞術(shù)檢查腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(tumorinfiltratinglymphocyte,TIL)中

2、T淋巴細(xì)胞亞群和DCs的數(shù)量,以及協(xié)同刺激分子CD80(B71)表達(dá)的變化。結(jié)果:LBP可明顯抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),增加腫瘤浸潤(rùn)C(jī)D4+、CD8+細(xì)胞的數(shù)量。LBP高劑量組CD4+和CD8+細(xì)胞數(shù)量的百分比高于模型組(P<0.05)。LBP低劑量和高劑量組腫瘤浸潤(rùn)DCs數(shù)量及B71表達(dá)均較模型組升高,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:LBP的抗腫瘤作用可能與恢復(fù)荷瘤小鼠TIL中CD4+、CD8+的細(xì)胞數(shù)量、解除機(jī)體的免疫抑制狀態(tài)及增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤免疫功能有關(guān)。LBP能否恢復(fù)荷瘤機(jī)體DCs的表型及功能尚待進(jìn)一步研究?!   ?/p>

3、[關(guān)鍵詞]枸杞多糖;免疫抑制;淋巴細(xì)胞亞群;腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞;樹(shù)突狀細(xì)胞  EffectsofLyciumbarbarumpolysaccharideontumormicroenvironmentTlymphocytesubsetsanddendriticcellsinH22bearingmice  ABSTRACTObjective:TostudytheeffectsofLyciumbarbarumpolysaccharide(LBP)ontumormicroenvironmentTlymphocytesubsets

4、anddendriticcellsinH22bearingmiceandthemechanismsforinterventionoftumorimmuneescapebyLBP.Methods:H22bearingmicephocytesubsetsandthephenotypesofdendriticcellsintumorinfiltratinglymphocytes(TIL)etry(FCM).Results:LBPcouldsignificantlyincreasethenumbersofCD4+andCD8+

5、TcellsinTILasparedodelcontrolgroup(P<0.05).Inmodelcontrolgroup,thenumberofdendriticcellsintumormicroenvironmentdecreasedmarkedly,berofdendriticcellsandB71expressionoreffectprobablybyincreasingthenumbersofCD4+andCD8+TcellsinTILtorelievetheimmunosuppressionande

6、nhancetheantitumorfunctionoftheimmunesystem.Buticeshouldbefurtherstudied.  KEYI1640培養(yǎng)液中浸泡30min后,將瘤體剪成1mm3大小,置于含0.05%Ⅳ型膠原酶、0.003%Ⅰ型DNase酶及10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中,4℃磁力攪拌過(guò)夜消化,200目消毒銅網(wǎng)過(guò)濾洗滌后,1500r/min離心15min,分離獲得腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(tumorinfiltratinglymphocyte,TIL),用DHanks液洗滌2次,臺(tái)盼藍(lán)

7、染色檢測(cè)細(xì)胞活力,調(diào)整細(xì)胞濃度至1×106/ml。  1.5TIL中CD4、CD8a、CD11c、CD80流式細(xì)胞儀分析每個(gè)樣本分3管,每管中加入3×105個(gè)細(xì)胞,PBS液調(diào)整總體積為100μl,其中第1管中加入不同熒光素標(biāo)記的抗鼠CD4、CD8a單克隆抗體0.5μl(0.25μg)、1.0μl(0.2μg),第2管中加入不同熒光素標(biāo)記的抗鼠CD11c、CD80單克隆抗體1.0μl(0.2μg)、1.0μl(0.5μg),第3管為空白對(duì)照管,室溫避光孵育30min,PBS液洗滌2次,每次實(shí)驗(yàn)取2管細(xì)胞分別加入FITC和

8、PE單熒光素標(biāo)記抗體,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)?! ?.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,行單因素方差分析及組間比較最小顯著差(leastsignificantdifference,LSD)法?! ?結(jié)果  2.1LBP對(duì)H22荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)及胸腺指數(shù)的影響模型組平均瘤體質(zhì)量(2.48±0.40)g,LB

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