非小細(xì)胞肺癌中survivin蛋白的表達(dá)及其與 p53表達(dá)的關(guān)系

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1、非小細(xì)胞肺癌中survivin蛋白的表達(dá)及其與p53表達(dá)的關(guān)系作者：王靜，楊繼要，石敏，吳逸明，吳擁軍【摘要】目的探討非小細(xì)胞肺癌組織中survivin蛋白的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系及其與p53表達(dá)的相關(guān)性。方法采用免疫組化的鏈霉菌抗生物素過氧化酶法（StreptavidinPeroxidase,SP）檢測80例NSCLC組織和20例正常肺組織中survivin、p53蛋白表達(dá)情況。結(jié)果80例非小細(xì)胞肺癌組織中survivin蛋白陽性例數(shù)49例，表達(dá)率為61.3%，在肺良性病變組織中，未陽性表達(dá)，兩組比較

2、差異有顯著性（P<0.05）；在III～I(xiàn)V期肺癌組織中survivin蛋白陽性表達(dá)率顯著高于I～I(xiàn)I期肺癌組織(P<0.05)，而與組織學(xué)分型、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否無關(guān)(P>0.05)；survivin、突變型p53蛋白在肺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論survivin蛋白表達(dá)與肺癌的TNM分期密切相關(guān)，有可能成為判斷病情和評價(jià)預(yù)后的指標(biāo)，survivin有望成為肺癌診斷的腫瘤標(biāo)志物及基因治療的新靶點(diǎn)；survivin、突變型p53蛋白在肺癌組織的協(xié)同高表達(dá)可能促使肺癌病情的惡性發(fā)展。

3、【關(guān)鍵詞】非小細(xì)胞肺癌；survivin；p53；表達(dá)CorrespondingAuthor:ethodsTheexpressionofsurvivin,p53protEinallungtissuebyimmunohistochemicalStreptavidinPeroxidase(SP)method.Resultssurvivinaandin0of20(0)casesofnormallungtissuesasignificantlyhigherthanthatinnormallungtissues(P

4、<0.05).ThepositiverateofsurvivininstageⅢ～Ⅳphnodemetastasis(P>0.05),ThereisthepositivecorrelationexistingintheexpressionofSurvivin,mutationP53inlungcarcinoma.Conclusionsurvivinayplayanimportantroleinlungcarcinogenesisandbeidentifiedasadefinitediagnos

5、ticmarkerandapotentialtherapeutictargetinNSCLC.CooperativehighexpressionofsurvivinandmutationP53inlungcancertissuesmaymakelungcancerdevelopquickly.Key的切片，60℃烘烤，脫蠟，3%過氧化氫滅活內(nèi)源性過氧化物酶，微波修復(fù)抗原，10%非免疫血清封閉，加入1∶50稀釋的兔抗人survivin多克隆抗體（美國Neomarkers公司）和鼠抗人p53單克隆抗體（美國Z

6、ymed公司）4℃過夜孵育，PBS沖洗，滴加1∶300生物素標(biāo)記二抗，室溫下30min，沖洗，滴加1∶40稀釋的SP溶液，室溫下30min,沖洗后DAB（武漢博士德生物工程公司）顯色,蘇木素—伊紅（HE）復(fù)染，封片。對照染色:免疫組化染色設(shè)陽性對照，以乳腺癌陽性標(biāo)本作為陽性對照；陰性對照，以PBS液代替一抗作為陰性對照。1．3免疫組化結(jié)果判定及計(jì)數(shù)方法survivin蛋白陽性反應(yīng)為淡黃至棕黃色顆粒，定位于胞漿；p53陽性反應(yīng)為棕黃色顆粒，定位于細(xì)胞核。survivin蛋白陽性細(xì)胞的計(jì)數(shù)：按照Sinicrop

7、[2]的標(biāo)準(zhǔn)作組織化學(xué)記分：H=N×I。若H>1為陽性，若H≤1則為陰性。陽性細(xì)胞數(shù)記分（N）5個高倍視野陽性細(xì)胞數(shù)的百分率。共分5個等級：<5.0%；5.0%～25.0%；26.0%～50.0%；51.0%～75.0%；>75.0%。著色強(qiáng)度記分（I）:1分弱陽性(+)；2分中度陽性（++）；3分強(qiáng)陽性(+++)。p53染色陽性細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法：每例標(biāo)本隨機(jī)選取10個高倍鏡視野，計(jì)數(shù)1000個細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞百分率。陽性細(xì)胞百分率≥25%為陽性，<25%為陰性。陽性細(xì)胞

8、不再進(jìn)一步分級。1．4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，采用χ2檢驗(yàn)，Spearman等級相關(guān)性分析，以P<0.05作為差異顯著性的判定標(biāo)準(zhǔn)。2結(jié)果2.1survivin蛋白在肺癌和肺良性病變組織中的表達(dá)survivin蛋白的陽性反應(yīng)為淡黃色顆粒，表達(dá)較強(qiáng)時呈棕黃色，主要定位于胞漿。肺癌組織的survivin蛋白陽性表達(dá)率為61.3%(49/80)，但在肺良性病變組織中，未見陽性染色，兩組比較差異