兩種不同超聲乳化術(shù)對兔角膜內(nèi)皮細胞的影響

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1、兩種不同超聲乳化術(shù)對兔角膜內(nèi)皮細胞的影響作者：陶仕英穆長征劉華王小梅【摘要】目的：探討冷超聲乳化術(shù)和熱超聲乳化術(shù)后角膜內(nèi)皮形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。方法：將12只純種日本大耳白兔隨機分為3組，對照組為正常的兔角膜內(nèi)皮細胞，實驗組分為冷超聲乳化組和熱超聲乳化組。每組4只兔，每只兔左眼均行冷超聲乳化術(shù)，右眼行熱超聲乳化術(shù)。于術(shù)前和術(shù)后6小時采用接觸性角膜內(nèi)皮顯微鏡進行角膜內(nèi)皮細胞形態(tài)學定量測定，并在透射電鏡下觀察角膜內(nèi)皮細胞超微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果：熱超聲乳化組細胞密度和六邊形細胞百分率明顯降低（P<0.01），細胞面積和變異系數(shù)明顯增加（P<0.01）。角膜中央1mm區(qū)域取材的透射電鏡切片示冷超

2、聲乳化組的內(nèi)皮損害小于熱超聲乳化組。結(jié)論：在相同的手術(shù)條件下，冷超聲乳化術(shù)后角膜內(nèi)皮的損傷小于熱超聲乳化術(shù)?！娟P(guān)鍵詞】冷超聲乳化術(shù)；熱超聲乳化術(shù)；角膜內(nèi)皮　　白內(nèi)障是眼科常見病和多發(fā)病，超聲乳化白內(nèi)障摘除術(shù)由于切口小，手術(shù)安全可靠而備受眼科界的青睞。以往多應用連續(xù)脈沖模式超聲乳化術(shù)，又叫熱超聲，由于超聲晶體核產(chǎn)生熱量及浪涌現(xiàn)象對角膜內(nèi)皮細胞造成損傷，是該手術(shù)最普遍最嚴重的并發(fā)癥［1］。如何降低超聲乳化過程中角膜內(nèi)皮細胞的損傷，一直是眼科醫(yī)生探討和研究的課題。近年來，眼科學者們提出新的概念—間歇微脈沖超聲乳化術(shù)，又叫冷超聲。本研究觀察并對比了兩種不同超聲乳化術(shù)對角膜內(nèi)皮損傷的差異，旨在為臨床醫(yī)

3、生選擇安全的手術(shù)方式提供理論依據(jù)。　　1材料與方法　　11實驗動物純種日本大耳白兔12只，3.5月齡，體重1.8~2.0kg，雌雄不限，由遼寧醫(yī)學院實驗動物中心提供。　　12藥品和試劑平衡鹽溶液（美國Alcon公司）；粘彈劑Viscoat（美國Alcon公司）；其它均為國產(chǎn)試劑?！　?3主要儀器接觸性角膜內(nèi)皮細胞反射顯微照相反射系統(tǒng)（日本TOMEYEM1000）；透射電子顯微鏡（日本JEM1200EX）；超薄切片機（日本LKB5型）；美國Allergen公司帶有白星軟件系統(tǒng)的SoverEign超聲乳化機；美國Stors公司的Protégé超聲乳化機?！　?4模型制備純種日本大耳

4、白兔12只隨機分為3組：正常對照組；冷超聲組采用間歇微脈沖模式超聲乳化術(shù)；熱超聲組采用連續(xù)脈沖模式超聲乳化術(shù)。用100ml/L水合氯醛（3ml/kg）腹腔麻醉，眼部用4%鹽酸奧布卡因滴眼液表面麻醉。常規(guī)顯微手術(shù)器械，灌注液為平衡鹽溶液，設(shè)置恒定參數(shù)（瓶高170cm，乳化時間1min40s）。于上方鞏膜緣后2mm作長約3.5mm的鞏膜隧道切口，穿刺入前房，注入粘彈劑0.25ml；環(huán)行撕囊，直徑約5mm。囊袋內(nèi)劈核行超聲乳化手術(shù)：左眼冷超聲乳化能量設(shè)定10%，負壓吸引400~500mmHg；右眼熱超聲乳化能量設(shè)定30%，負壓吸引120~150mmHg；抽吸晶狀體皮質(zhì)?！　?5角膜內(nèi)皮細胞檢測　

5、　151形態(tài)學定量分析術(shù)后6小時采用Tomey　EM1000型接觸性角膜內(nèi)皮顯微鏡行中央部角膜內(nèi)皮細胞照相，每次檢查前，術(shù)眼點局麻藥一次。選取角膜中央?yún)^(qū)為統(tǒng)一的測量區(qū)域，檢查者從目鏡中看到內(nèi)皮細胞的清晰圖象后，通過計算機系統(tǒng)連續(xù)采集20張照片，從中選取分辨率最佳的進行計算機圖象處理。通過計算機系統(tǒng)分析得出角膜內(nèi)皮細胞密度、細胞面積、六邊形細胞百分率和變異系數(shù)?！　?52電鏡觀察術(shù)后6小時全麻下取雙眼角膜置于2.5%戊二醛固定液中，然后取角膜中央1mm區(qū)域的組織制成透射電鏡樣本?！　?6統(tǒng)計學分析應用計算機圖象分析儀進行圖象分析處理，數(shù)據(jù)以±s表示，采用SPSS11.5統(tǒng)計程序進行

6、單因素方差分析和q檢驗，P＜0.05為差異有顯著性意義。　　2結(jié)果　　21術(shù)前角膜內(nèi)皮顯微鏡檢查結(jié)果　　表1術(shù)前角膜內(nèi)皮顯微鏡檢查結(jié)果（略）　　冷超聲組和熱超聲組與正常對照組比較內(nèi)皮細胞密度、細胞面積、六邊形細胞百分率和變異系數(shù)各組對比無顯著性差異（P＞0.05）。　　22術(shù)后6h角膜內(nèi)皮顯微鏡檢查結(jié)果表2術(shù)后6h角膜內(nèi)皮顯微鏡檢查結(jié)果（略）　　注：*與正常對照組比較,P＜0.05;**與冷超聲組比較P＜0.01?！　〖毎芏?、六邊形細胞百分率各實驗組與對照組比較明顯減少（P＜0.05），其中以熱超聲組減少最為顯著（P＜0.01）。細胞面積、變異系數(shù)各實驗組與對照組比較明顯增加（P＜0.

7、05），其中以熱超聲組增加最為顯著（P＜0.01）?！　?3透射電鏡檢查結(jié)果　　231正常對照組角膜內(nèi)皮細胞為單層扁平上皮細胞，細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)（如細胞核、線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等）清晰可見，內(nèi)皮細胞與基底膜連接緊密（圖1）?！　D1正常對照組角膜內(nèi)皮細胞（×5000）（略）　　232冷超聲組細胞結(jié)構(gòu)完整，但與正常組對比線粒體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，胞漿內(nèi)吞飲小泡增多（圖2）。　　圖2冷超聲組角膜內(nèi)皮細胞（×500