肝細(xì)胞癌中缺氧誘導(dǎo)因子

肝細(xì)胞癌中缺氧誘導(dǎo)因子

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1、肝細(xì)胞癌中缺氧誘導(dǎo)因子【摘要】目的探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α(Hypoxiainduciblefactor-1α,HIF-1α)、熱休克蛋白70(heatshockprotEin70,HSP70)在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)48例肝細(xì)胞癌中HIF-1α、HSP70的表達(dá)。結(jié)果 48例肝細(xì)胞癌HIF-1α陽(yáng)性率為70.8%,強(qiáng)表達(dá)10例,中度表達(dá)14例,弱表達(dá)10例,無(wú)表達(dá)14例,與正常對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)。Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ-Ⅳ級(jí)VEGF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)

2、三組比較有顯著性差異(P<0.05)?;颊甙┺D(zhuǎn)移者與無(wú)癌轉(zhuǎn)移者HIF-1α、HSP70比較有顯著性差異(P<0.01),HIF-2α表達(dá)與肝細(xì)胞癌惡性程度呈正相關(guān)(rr=0.726,,P<0.05)。HSP70與HIF-2α表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.726,P<0.05)。結(jié)論 HIF-2α與HSP70表達(dá)有相關(guān)性,HIF-1α、HSP70與癌轉(zhuǎn)移有關(guān),HIF-α與HSP70聯(lián)合檢測(cè)有助于判斷肝細(xì)胞癌患者的預(yù)后?!娟P(guān)鍵詞】肝細(xì)胞癌缺氧誘導(dǎo)因子-1α熱休克蛋白【Abstract】Obj

3、ective:ToexploretheexpressionofHypoxiainduciblefactor-1α(HIF-1α)andheatshockprotEIn70(HSP70)inhepatocellularcarcinoma,therelationbetetastasis.Method:TheexpressionofHIF-1αandHSP70in48patientsoflivercarcinomamunohistochemicalanalyses.Result:TheHIF-1α-posit

4、iveoutof48patientsediumexpression,10loongⅠ,ⅡandⅢ~Ⅳgradeetastasisthoseetastasis(P<0.01).andtheexpressionofHIF-2αalignantdegree(rr=0.726,P<0.05).TheexpressionofHSP70andHIF-2αetastasis.ThebineddetectionofHIF-1αandHSP70contributetojudgeoftheprognosisof

5、hepatocellularcarcinoma.【Keya,Hypoxiainduciblefactor-1α,heatshockprotein70HIF-1α(Hypoxiainduciblefactor-1α)是1992年發(fā)現(xiàn)的一種在缺氧條件下細(xì)胞產(chǎn)生的核蛋白,它與靶基因結(jié)合,促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄,使機(jī)體產(chǎn)生一系列缺氧適應(yīng)反應(yīng)[1]?,F(xiàn)己證實(shí),在任何氧濃度降低的情況下,如全身缺氧、腦動(dòng)脈阻塞,都可能誘導(dǎo)HIF-1的快速大量表達(dá)[2]。肝細(xì)胞癌發(fā)生后,腫瘤的不斷生長(zhǎng)、體積增大,血供不足發(fā)生缺氧壞死,可誘導(dǎo)HIF

6、-1α過(guò)度表達(dá)。因此,對(duì)以上過(guò)程在肝臟中對(duì)于下游基因的表達(dá)及與癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系成為近期的研究熱點(diǎn)。我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)48例肝細(xì)胞癌及9例正常肝組織中的HIF-1α、HSP70的表達(dá)進(jìn)行研究,探討與癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移、臨床預(yù)后的關(guān)系。1資料與研究方法1.1一般資料 48例肝細(xì)胞癌組織取自華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院2006.02-2007.05手術(shù)切除標(biāo)本。男28例,女20例。年齡36-71(平均56.0)歲。其中經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)伴轉(zhuǎn)移者28例,無(wú)轉(zhuǎn)移者20例。按Furhman分級(jí):Ⅰ級(jí)18例,Ⅱ級(jí)19

7、例,Ⅲ級(jí)7例,Ⅳ級(jí)4例。9例癌旁正常肝組織(遠(yuǎn)離腫瘤邊緣>5cm)作為對(duì)照,并經(jīng)病理切片證實(shí)。1.2免疫組織化學(xué)方法測(cè)定腦細(xì)胞的HIF-1α表達(dá)1.2.1主要試劑 鼠抗人HIF-1α(Lot:MS-1164-P0)購(gòu)自美國(guó)NOVUS公司。SP檢測(cè)試劑盒、DAB檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自Sigma公司。VEGF檢測(cè)試劑盒(LOT:D-182)、0.1%EDTA抗原修復(fù)液(PH=9.0)、100%山羊血清購(gòu)自北京中山生物試劑公司。1.2.2主要染色步驟 常規(guī)PBS(PH=0.1)代替一抗作為陰性對(duì)照。HIF-1

8、α染色步驟:石蠟切片60℃烤箱烤片15min,梯度乙醇脫蠟至水,3%H2O2室溫孵育15min,0.1%EDTA150ml微波抗原修復(fù)45min,涼至室溫,10%血清封閉15min,加入1∶200一抗4℃過(guò)夜,生物素化二抗室溫孵育35min,加鏈親素酶標(biāo)室溫孵育30min,DAB顯色10min,脫水,透明,中性樹(shù)膠封固。HSP70染色步驟:石蠟切片60℃烤箱烤片15min,梯度乙醇脫蠟至水,10mmol0.1%EDTA(PH=9.0)微波抗

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