中藥和保健食品中黃豆黃苷和黃豆黃素的含量測(cè)定

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1、中藥和保健食品中黃豆黃苷和黃豆黃素的含量測(cè)定【摘要】目的建立大豆類保健食品中黃豆黃苷和黃豆黃素的高效液相色譜含量測(cè)定方法。方法色譜柱為AgilentzorbaxSB-C18(4.6mm×150mm,5μm),流動(dòng)相采用乙腈-0.2%甲酸進(jìn)行梯度洗脫,檢測(cè)波長(zhǎng)為255nm,流速為1mL/min。結(jié)果黃豆黃苷和黃豆黃素的線性范圍分別為0.24～1.82μg和0.040～0.30μg；加樣回收率分別為97.38%和97.25%(n=5)。結(jié)論本方法簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確,可用于含大豆異黃酮類中藥和保健食品中以上兩種成分的含量測(cè)定和產(chǎn)品

2、質(zhì)量控制。【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法；黃豆黃苷；黃豆黃素；含量測(cè)定Abstract：ObjectiveTodevelopanHPLCmethodfordeterminationofglycitinandglyciteininfunctionalfoodssimultaneously.MethodsAnAgilentzorbaxSB-C18column(4.6mm×150mm,5μm)obilephaseposingofacetonitrileand0.2%formicacidobilephase,andthefloL/min

3、,detective.ResultsTheresultspleandreproducibleHPLCmethodinationofthetination大量研究表明,大豆異黃酮具有雌激素樣作用,能降低乳腺癌、前列腺癌等疾病的發(fā)病率,緩解更年期因雌激素分泌減少而引起的停經(jīng)期綜合征和骨質(zhì)疏松癥,又有延緩衰老以及預(yù)防心血管疾病等多種功效[1-3]。大豆異黃酮類主要包括大豆苷元、大豆苷、染料木素、染料木苷、黃豆黃素和黃豆黃苷等成分。目前,大豆異黃酮類提取物和產(chǎn)品的質(zhì)量控制多采用紫外分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法和毛細(xì)管電泳

4、法等測(cè)定其中部分異黃酮如大豆苷元、大豆苷、染料木素等的含量[4-8],但是對(duì)黃豆黃素和黃豆黃苷測(cè)定的報(bào)道很少。為更好地評(píng)價(jià)和控制產(chǎn)品的質(zhì)量,我們建立了測(cè)定中藥和保健食品中黃豆黃苷和黃豆黃素兩含量的方法,并取得了滿意的效果?！　?儀器與試劑　　illipoore0.22μm濾膜。含大豆異黃酮中藥樣品3個(gè)(樣品1～3),保健食品樣品3個(gè)(樣品4～6)均為市售?！　?方法與結(jié)果　　2.1色譜條件　　色譜柱AgilentzorbaxSB-C18(4.6mm×150mm,5μm),柱溫25℃；流動(dòng)相由0.2%甲酸-乙腈按梯度表組成(

5、見表1),流速1mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)255nm；理論塔板數(shù)按染料木素計(jì)算不低于2000。色譜圖見圖1。表1流動(dòng)相梯度表（略）　　2.2對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取黃豆黃苷和黃豆黃素對(duì)照品適量,加甲醇分別配制成黃豆黃苷0.1200mg/mL和黃豆黃素0.0201mg/mL的溶液,作為對(duì)照品溶液。　　2.3供試品溶液的制備分別取樣品(市售含大豆異黃酮類保健食品和中藥樣品)細(xì)粉0.4g,精密稱定,精密加入甲醇25mL,稱定重量,超聲處理30min,放至室溫,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,過0.45μm的微孔濾膜,作為

6、供試品溶液?！　?.4線性范圍的考察分別吸取對(duì)照品溶液2.0、4.0、8.0、10.0、15.0μL,注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),計(jì)算其回歸方程。兩種大豆異黃酮線性關(guān)系分別為：黃豆黃素Y=6863452.35X+138492.58(r=0.9994),黃豆黃苷Y=5973869.46X-24952.48(r=0.9997)。黃豆黃素和黃豆黃苷分別在0.040～0.30μg和0.24～1.82μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好?！　?.5穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取供試品溶液10μL,每隔2h進(jìn)樣1次,共6次,測(cè)定

7、峰面積,結(jié)果黃豆黃苷和黃豆黃素的RSD分別為1.04%和0.98%,表明12h內(nèi)測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定?！　?.6精密度試驗(yàn)分別精密吸取對(duì)照品溶液10μL,注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積,結(jié)果黃豆黃苷和黃豆黃素的RSD分別為1.29%和1.73%(n=5),表明儀器精密度良好?！　?.7重復(fù)性試驗(yàn)取同一樣品5份,按樣品處理方法平行提取并同法測(cè)定兩種成分的含量,求出測(cè)得值的RSD。黃豆黃苷和黃豆黃素的RSD分別為1.13%和0.96%,表明本法重復(fù)性良好?！　?.8加樣回收率試驗(yàn)精密吸取已知含量的樣品9份,每3份一組,按高、中、低3個(gè)水平

8、分別精密加入一定量對(duì)照品,按“2.3”供試品溶液制備項(xiàng)下操作,兩種成分的回收率分別為：黃豆黃苷97.38%(RSD=1.28%)、黃豆黃素97.25%(RSD=1.49%)。結(jié)果表明,以本法同時(shí)測(cè)定兩種大豆異黃酮類成分,其回收率結(jié)果良好?！　?.9樣品的測(cè)定　　按“2.3”項(xiàng)下方法制備樣品溶液并測(cè)定,6