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《染料木黃酮與順鉑聯(lián)用對耐藥卵巢癌細(xì)胞skov》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、染料木黃酮與順鉑聯(lián)用對耐藥卵巢癌細(xì)胞SKOV作者：袁鵬，黃艷紅，辛?xí)匝?，宋暉，田爽，王德堂【關(guān)鍵詞】染料 binedacellSKOV3 【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectsofgenistEinbinedacellSKOV3.METHODS:ThegroorphologicalalterationsofSKOV3cellsonstratedbyHoechst33342stainingunderafluorescencemicroscopeandapoptosisandcellcycledi
2、stributionetry.RESULTS:Variousconcentrationsofgenisteininbination0.586to0.869,provethegroayberelatedtotheG2/MarrestandthedisturbanceofSphasebygenistein. 【Keys;drugsynergism 【摘要】目的：探討染料木黃酮與順鉑聯(lián)用對耐藥卵巢癌細(xì)胞系SKOV3增殖與凋亡的影響.方法：采用MTT比色法檢測染料木黃酮和順鉑聯(lián)用對SKOV3細(xì)胞增殖的影響，Hoechst染色熒光顯微鏡下
3、觀察聯(lián)合用藥后細(xì)胞形態(tài)的改變，流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期并檢測凋亡率.結(jié)果：聯(lián)用不同濃度的染料木黃酮后順鉑對SKOV3細(xì)胞IC50降低率為32.3%~79.8%,兩藥聯(lián)合作用系數(shù)在0.586~0.869之間，為輕度至高度協(xié)同作用.染料木黃酮與順鉑聯(lián)用可顯著提高凋亡率，兩藥聯(lián)用誘導(dǎo)SKOV3細(xì)胞凋亡和阻滯G2/M期、干擾S期進(jìn)程，凋亡率與G1期細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)（rs=-0.953,P<0.05）.結(jié)論:染料木黃酮可以增強(qiáng)順鉑對SKOV3細(xì)胞的增殖抑制作用和殺傷作用，兩種藥物具有協(xié)同作用.染料木黃酮阻滯細(xì)胞于G2/M期并同時(shí)干擾S期進(jìn)
4、程可能是兩藥發(fā)揮協(xié)同作用的重要機(jī)制. 【關(guān)鍵詞】染料木黃酮；順鉑；卵巢腫瘤；藥物協(xié)同作用 0引言 近年來染料木黃酮（4，5，7三羥基異黃酮，genistein）對腫瘤生長的抑制作用日益受到重視，尤其是它可以增強(qiáng)常規(guī)化療藥物的療效［1-2］.而染料木黃酮和傳統(tǒng)化療藥物順鉑聯(lián)用能否增強(qiáng)順鉑對耐藥卵巢癌的殺傷作用呢？為此，我們研究了染料木黃酮與順鉑聯(lián)用對耐藥卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖與凋亡的影響及其機(jī)制. 1材料和方法 1.1材料 人卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌細(xì)胞系SKOV3由西京醫(yī)院婦產(chǎn)科實(shí)驗(yàn)室保存，該細(xì)胞系對順鉑等多種藥物耐藥；
5、RPMI1640培養(yǎng)基(Gibco公司)；新生牛血清(四季青公司)；順鉑(齊魯制藥廠)；染料木黃酮、二甲基亞砜（DMSO）,Hoechst33342(Sigma公司)；四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)(Amresco公司).細(xì)胞周期檢測試劑盒為DNAPrepStainkit(BeckmanCoulter公司)；K3型全自動(dòng)酶標(biāo)儀(LabsystemsDragon公司)；ELITEESP型流式細(xì)胞儀（BeckmanCoulter公司）. 1.2方法 1.2.1MTT法檢測細(xì)胞增殖抑制率取對數(shù)生長期的SKOV3細(xì)胞，8×103個(gè)/孔接種于9
6、6孔培養(yǎng)板，置37℃，50mL/LCO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)12h，細(xì)胞貼壁后棄去培養(yǎng)液，然后加入含不同濃度藥物的培養(yǎng)基200μL：對照組只加RPMI1640培養(yǎng)基(100mL/L小牛血清)；順鉑組加入順鉑濃度分別為0.625，1.25，2.5，5，10，20mg/L的培養(yǎng)基；染料木黃酮組加入染料木黃酮濃度分別為2.5，5，10，20，30，40，50mg/L的培養(yǎng)基；染料木黃酮和順鉑聯(lián)用組為2.5，5，10，20mg/L的染料木黃酮與順鉑聯(lián)用，順鉑濃度同單藥組，每組均設(shè)6個(gè)復(fù)孔.繼續(xù)培養(yǎng)至加藥后96h，每孔加入MTT(5g/L,20μL),
7、繼續(xù)孵育4h后棄培養(yǎng)液，每孔加入DMSO150μL，振蕩10min，用酶標(biāo)儀檢測各孔吸光值(A490nm)，按以下公式計(jì)算：細(xì)胞增殖抑制率=（對照組A490nm-實(shí)驗(yàn)組A490nm）/對照組A490nm×100%，取6復(fù)孔均值繪制抑制率與藥物劑量關(guān)系曲線，按作圖法求出半數(shù)抑制濃度（IC50）.同時(shí)采用聯(lián)合作用指數(shù)(binedindex，CI)判斷染料木黃酮和順鉑聯(lián)用的性質(zhì).CI=DA／ICX,A+DB／ICX,B(A，B代表兩種不同藥物，ICX,A和ICX,B是兩種藥物單獨(dú)使用使生長抑制率達(dá)X時(shí)的藥物濃度，DA和DB是兩藥聯(lián)用使生長
8、抑制率達(dá)X時(shí)兩種藥物的濃度)［3］.根據(jù)Soriano等［4］的判斷方法，0.9≤CI≤1.1為疊加作用，0.8≤CI<0.9為低度協(xié)同作用，0.6≤CI<0.8為中度協(xié)同作用，0.4≤CI<0.6為高度協(xié)同作用，0
