酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清抗體結(jié)核分枝桿菌抗體

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清抗體結(jié)核分枝桿菌抗體

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1、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清抗體結(jié)核分枝桿菌抗體【摘要】目的探討酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在結(jié)核病臨床診斷中的應(yīng)用及臨床意義。方法用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)檢測(cè)105例肺結(jié)核患者血清抗結(jié)核抗體與痰直接涂片檢測(cè)患者痰中的結(jié)核桿菌進(jìn)行了對(duì)比。分析比較兩者的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果ELISA法檢測(cè)患者血清抗結(jié)核抗體陽(yáng)性率為83.8%,直接涂片陽(yáng)性率為26.3%,ELISA法的陽(yáng)性率明顯高于痰直接涂片(P<0.001)。結(jié)論ELISA法檢測(cè)患者血清抗結(jié)核抗體簡(jiǎn)便、快速、特異性好,是目前最理想的診斷方法。【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA);結(jié)核抗體;方法

2、對(duì)比酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清抗結(jié)核分枝桿菌抗體,為Nassau等(1976)率先應(yīng)用于結(jié)核病的臨床診斷。近年來(lái),隨著結(jié)核分枝桿菌幾種特異性抗原的發(fā)現(xiàn)與純化,實(shí)驗(yàn)技術(shù)的不斷改進(jìn),ELISA檢測(cè)血清抗體已在國(guó)內(nèi)臨床實(shí)驗(yàn)應(yīng)用,并有多篇文獻(xiàn)報(bào)道研究探討了結(jié)核抗體的檢測(cè)及其臨床意義。研究證實(shí)活動(dòng)性結(jié)核病患者細(xì)胞免疫減損,體液免疫亢進(jìn),血清及其他體液中結(jié)核抗體(主要是IgG)升高,應(yīng)用ELISA法檢測(cè)結(jié)核抗體有助于結(jié)核病的診斷和鑒別診斷。我們對(duì)105例確診結(jié)核和60例健康組患者檢測(cè)血清中的結(jié)核抗體與同步條件涂片抗酸染色法進(jìn)行比較,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)

3、告如下?! ?資料與方法1.1一般資料2000年1月~2006年10月對(duì)105例肺結(jié)核患者應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測(cè)其血清中的抗結(jié)核抗體與痰直接涂片法檢測(cè)患者痰中結(jié)核桿菌進(jìn)行檢測(cè)對(duì)比,診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病分會(huì)關(guān)于“肺結(jié)核病診斷與治療指南”[1]確診;在105例患者中,男66例,女39例,年齡20~79歲,平均年齡56歲。浸潤(rùn)型肺結(jié)核80例,慢性纖維空洞型肺結(jié)核25例。初治66例,復(fù)治39例。另選擇臨床診斷非結(jié)核病人60例作為對(duì)照,其中慢性支氣管炎合并肺氣腫者31例,支氣管擴(kuò)張癥11例,肺炎6例,肺癌并咯血者12例。1.2儀器及試劑酶聯(lián)免疫

4、吸附試驗(yàn)(ELISA)快速測(cè)定試劑盒由上??迫A生物技術(shù)有限公司提供,參考說(shuō)明書(shū)方法操作。應(yīng)用上??迫AST-360型酶標(biāo)儀檢測(cè)。1.3標(biāo)本來(lái)源檢測(cè)對(duì)象,血清標(biāo)本由本院臨床收治患者和細(xì)菌室提供,取早晨空腹血標(biāo)本并及時(shí)檢測(cè)。痰標(biāo)本由病人早晨徹底清潔口腔后,深咳出1~2口痰液(如果咯血取膿血痰)留于加蓋無(wú)菌容器內(nèi)立即送檢。1.4檢測(cè)方法和結(jié)果判斷血清抗結(jié)核抗體(IgG)檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),顯色后應(yīng)用上??迫AST-360型酶標(biāo)儀檢測(cè)。涂片以抗酸染色在鏡檢100個(gè)視野有3~9條抗酸桿菌為陽(yáng)性,鏡檢300個(gè)視野未見(jiàn)抗酸桿菌為陰性?! ?

5、結(jié)果105例ELISA法檢測(cè)血清TB-Ab陽(yáng)性88例,陽(yáng)性率為83.8%;直接痰涂片陽(yáng)性28例,陽(yáng)性率為26.3%,這28例ELISA法檢測(cè)其血清全部陽(yáng)性,ELISA的陽(yáng)性率明顯高于直接涂片法(P<0.001)。涂片陰性77例中ELISA檢測(cè)血清TB-Ab陽(yáng)性60例。60例非肺結(jié)核疾病患者中ELISA檢測(cè)陽(yáng)性6例(肺癌2例,慢性支氣管炎2例,支氣管擴(kuò)張1例);涂片未檢測(cè)陽(yáng)性者。TB-Ab陽(yáng)性治療3~6個(gè)月后復(fù)檢血清結(jié)核抗體患者50例。ELISA復(fù)查陽(yáng)性40例,陽(yáng)性率80.0%;涂片復(fù)查20例,陽(yáng)性2例,陽(yáng)性率10.4%。3討論(責(zé)任編輯

6、:admin)由于結(jié)核病診斷缺乏“金標(biāo)準(zhǔn)”,確診只有通過(guò)臨床標(biāo)本培養(yǎng)出結(jié)核分枝桿菌或正規(guī)抗結(jié)核治療有效來(lái)確定。因而往往無(wú)法早期明確診斷。我們應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)臨床診斷為肺結(jié)核患者血清抗結(jié)核分枝桿菌抗體,陽(yáng)性率為83.8%(88/105),涂片陽(yáng)性率為26.3%(28/105),兩者差異有非常顯著性(P<0.001);在痰涂陽(yáng)性病人中(ELISA)法檢測(cè)全部陽(yáng)性;在痰涂陰性病人中,(ELISA)法檢出陽(yáng)性率為78%(60/77)。文獻(xiàn)報(bào)道(ELISA)法檢測(cè)肺結(jié)核患者血清中的抗結(jié)核抗體陽(yáng)性率明顯高于痰涂片和培養(yǎng),尤其

7、在結(jié)核早期感染時(shí)細(xì)菌量少或化療后細(xì)菌變異死亡難于培養(yǎng)時(shí)更明顯。因此,ELISA特別適合結(jié)核病的早期診斷和鑒別診斷[3]。(ELISA)檢測(cè)血清中的抗結(jié)核抗體不受細(xì)菌活力和形態(tài)的影響,只要細(xì)菌DNA尚未變性,可檢出痰液中死亡和是非正常形態(tài)的抗結(jié)核抗體,給結(jié)核病人化療后結(jié)核桿菌檢測(cè)和判斷療效提供了簡(jiǎn)便方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該實(shí)驗(yàn)方法基本達(dá)到了快速(40min)、敏感、特異,簡(jiǎn)便(可目測(cè)判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果)的實(shí)驗(yàn)要求。本組病人經(jīng)過(guò)正規(guī)的抗結(jié)核治療3~6個(gè)月后,臨床癥狀和胸片顯示均有明顯好轉(zhuǎn),但ELISA復(fù)檢陽(yáng)性率仍為80.0%(40/50),與程紹基等[4]

8、報(bào)道26例活動(dòng)性肺結(jié)核治療6個(gè)月后檢測(cè)陽(yáng)性率為88.0%(22/25)的觀點(diǎn)趨向一致??菇Y(jié)核治療后經(jīng)ELISA試驗(yàn)法仍為陽(yáng)性的持續(xù)時(shí)間及其臨床意義尚不清楚,但說(shuō)明E

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