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1、山藥對(duì)老齡小鼠游泳耐力和免疫器官形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響【摘要】 目的研究山藥水煎液對(duì)亞急性衰老小鼠游泳耐力和免疫器官形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。方法30只小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組（A）、衰老模型組（B）和衰老用藥組（C）。B、C組腹腔注射D半乳糖（50mg·kg-1·d-1），連續(xù)60d，建立衰老模型；A組腹腔注射生理鹽水（50mg·kg-1·d-1）。第46天C組灌胃山藥水煎液（50mg·kg-1·d-1），A、B組灌胃等體積蒸餾水，連續(xù)15d。第61天進(jìn)行力竭游泳試驗(yàn)，觀察并記錄力竭游泳時(shí)間，后斷頭采血，測(cè)定血尿素氮（BUN）、血乳酸（BLA）、
2、血紅蛋白（Hb）含量，剖取胸腺、脾臟稱其重量，計(jì)算相關(guān)臟器指數(shù)，常規(guī)石蠟切片，HE染色。結(jié)果與B組比較，C組小鼠力竭游泳時(shí)間顯著延長(zhǎng)（P<0.05）、BUN、BLA含量顯著降低（P<0.01），胸腺、脾臟指數(shù)上升（P<0.05），胸腺皮質(zhì)/髓質(zhì)、脾臟白髓/紅髓比例升高。結(jié)論山藥水煎液可以改善老齡小鼠的游泳耐力，并在一定程度上延緩免疫器官的衰老。【關(guān)鍵詞】山藥；游泳耐力；胸腺；脾 山藥具有健脾補(bǔ)肺、固腎益精和降血脂、抗衰老等諸多功效〔1〕。研究發(fā)現(xiàn)隨著年齡的增長(zhǎng)，機(jī)體的抗氧化功能逐漸降低〔2〕，運(yùn)動(dòng)時(shí)隨著自由基的堆
3、積，機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)會(huì)相應(yīng)增強(qiáng)〔3〕，脂質(zhì)過(guò)氧化增強(qiáng)會(huì)造成免疫損傷，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，肌細(xì)胞的耐疲勞性減弱，使機(jī)體的運(yùn)動(dòng)能力減低〔4，5〕。研究表明山藥具有較強(qiáng)的抗氧化活性和清除自由基的功能〔6，7〕，基于山藥的強(qiáng)抗氧化性和清除自由基功能，本試驗(yàn)探討山藥對(duì)老齡小鼠游泳耐力和免疫器官形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。 1材料與方法 1.1動(dòng)物分組 Km雄性小白鼠30只，5周齡，體重（25±5）g，購(gòu)自華北煤炭醫(yī)學(xué)院動(dòng)物養(yǎng)殖中心，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（京）20050013。小鼠預(yù)飼養(yǎng)7d，隨機(jī)分為3組，分別為空白對(duì)照組（A）、衰老模型組（B）、衰
4、老用藥組（C），均以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)?！ ?.2藥品和試劑 D半乳糖購(gòu)于北京三博遠(yuǎn)志生物技術(shù)有限責(zé)任公司，Sigma公司生產(chǎn)。血尿素氮（BUN）試劑盒（北京北化康泰臨床試劑有限公司，批號(hào):20061206），血乳酸（BLA）試劑盒（南京建成生物工程研究所）。懷山藥：購(gòu)于北京同仁堂唐山分店?！ ?.3方法 1.3.1山藥水煎液的制備 稱取山藥片100g，粉碎后按1∶8比例加水，60～80℃熱水提取4h，收集提取液，濃縮至100ml。試驗(yàn)時(shí)用生理鹽水配成所需濃度?！ ?.3.2衰老模型制備和給藥方法 A組腹腔注射生理鹽水(50mg
5、·kg-1·d-1)，B、C組腹腔注射D半乳糖（50mg·kg-1·d-1），連續(xù)60d。第46天，A、B組灌胃蒸餾水（50mg·kg-1·d-1），C組腹腔注射D半乳糖的同時(shí)灌胃山藥水煎液（50mg·kg-1·d-1）,連續(xù)給藥15d。每天記錄小鼠體重變化，以調(diào)整給藥劑量?！ ?.3.3力竭游泳試驗(yàn) 第61天進(jìn)行力竭游泳試驗(yàn)，將同組小鼠分別放入恒溫水槽（水深>30cm）、水溫（25±1）℃，進(jìn)行力竭游泳試驗(yàn)，當(dāng)鼠頭沉入水下5s不能抬起并不能完成翻正反射計(jì)時(shí)停止，為力竭游泳時(shí)間?！ ?.3.4生理指標(biāo)測(cè)定和統(tǒng)計(jì) 1.3
6、.4.1小鼠體重、胸腺重量、脾臟重量、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)及體重增重率統(tǒng)計(jì) A、B、C三組小鼠每3天稱重一次，取每組平均值記錄。試驗(yàn)結(jié)束將剖取的胸腺、脾臟用澳豪斯AdventurerTM天平稱濕重并計(jì)算其指數(shù)。臟器指數(shù)=臟器重量/體重（mg/10g）。增重率=（試驗(yàn)后體重-試驗(yàn)前體重）/試驗(yàn)前體重×100%。1.3.4.2BUN、血紅蛋白（Hb）含量的測(cè)定將采得的血液迅速用TGL16G冷凍離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）離心5min（3000r/min），取上清液，用BUN試劑盒和722S可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海棱光技術(shù)有限公司）測(cè)定BUN
7、、Hb含量（可見(jiàn)光比色法）?！ ?.3.4.3切片制備 稱重后的小鼠胸腺、脾臟迅速固定，常規(guī)石蠟切片，HE染色。光鏡下觀察三組小鼠胸腺、脾臟組織結(jié)構(gòu)，顯微拍照。 1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS11.5進(jìn)行方差分析和多重比較（LSD），數(shù)據(jù)以x±s表示?！ ?結(jié)果 2.1山藥對(duì)小鼠體重增重率和力竭游泳時(shí)間的影響 A、B、C三組小鼠的體重增重率分別為（14.88±3.39）%，（12.88±6.9）%，（13.87±5.51）%；組間比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）。力竭游泳時(shí)間B組最短〔（96.28±9
8、.63）min〕，與A組〔（135.05±12.73）min〕差異顯著（P<0.05）；C組〔（116.83±15.94）min〕與A組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與B組比較，有顯著性差異（P<0.05）。灌胃山藥水煎液的C組力竭游
