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1、貴州野生多汁乳菇對小鼠免疫功能影響【關(guān)鍵詞】野生多汁乳菇 貴州野生多汁乳菇,又名奶漿菌,盛產(chǎn)在貴州山區(qū),富含人體必需氨基酸及常量、微量元素〔1〕,貴州野生多汁乳菇具有明顯抗輻射作用〔2〕。蘑菇類提取的多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗輻射、抗腫瘤、抗疲勞等多方面的生物學(xué)活性〔3,4〕。本文對野生多汁乳菇改善機(jī)體免疫功能的作用進(jìn)行了研究?! ?材料與方法 11材料 111多汁乳菇提取物的制備市場上購得批次鮮品,測定鮮品平均水份為893%,去泥、洗凈,在55~60℃烘箱內(nèi)烘干,粉碎,過25目篩,置干燥器內(nèi)保存?zhèn)溆?。稱取一定量的多汁乳菇干品,加適量蒸餾水,煮沸3次,每
2、次05h,合并3次濾液,80℃水浴濃縮,定容備用?! ?12實驗動物及環(huán)境清潔級雌性昆明種小鼠(貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心)〔合格證號SCXK(黔)2002-0001〕,體重18~22g,小鼠飼料、綿羊紅細(xì)胞、制備補(bǔ)體用的豚鼠。飼養(yǎng)環(huán)境為貴州省疾病預(yù)防控制中心潔凈動物實驗室(合格證號SYXK(黔)2003-0003)。 12方法 121動物分組與方法據(jù)動物體重隨機(jī)分組,用雌性小鼠80只,分為4組,每組動物20只。設(shè)為:(1)正常對照組;(2)多汁乳菇組9g/(kg·bg/(kg·bg/(kg·bg/(kg·bg/(kg·bl/(kg·bin,分別從右內(nèi)眥靜
3、脈叢取血20μl,放入2ml2%Na2CO3溶液中,測定2次的吸光度(A)值,用吞噬指數(shù)α(α代表小鼠碳廓清的能力)表示。α=體重/(肝重+脾重)×3K,K=(1gA1-lgA2)/(t2-t1),t1、t2代表注射墨汁后的2次取血時間。(4)血清抗綿羊紅細(xì)胞(SRBC)抗體測定(HC50):用2%SRBC腹腔免疫小鼠4d后,眼內(nèi)眥靜脈取血,分離血清,測定血清抗體水平,以半數(shù)溶血值(HC50)表示,HC50=樣品吸光度值/SRBC半數(shù)溶血時的吸光度值×稀釋倍數(shù)。(5)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)(DTH):用2%SRBC腹腔免疫小鼠后第4d,在其左后趾部皮內(nèi)注射20%SRBC,注射
4、后24h測定足趾部厚度,以攻擊前后足趾厚度差值(mm)表示?! ?3統(tǒng)計分析采用SPSS110軟件進(jìn)行方差分析。 2結(jié)果 21一般狀況在實驗期間,腹腔注射CP的小鼠在實驗開始3d后,表現(xiàn)為精神不振、呆臥、豎毛、少食,實驗到14d后,小鼠基本恢復(fù)正常。正常對照組和多汁乳菇組小鼠體重變化從0~4周生長體重呈增加趨勢,至第4周小鼠平均體重基本相等;多汁乳菇+CP組從0~4周體重呈增加趨勢,第4周時平均體重低于正常對照組;CP組小鼠在第2周時平均體重低于第1周,以后呈增加趨勢,第4周時平均體重低于正常對照組?! ?2對小鼠各器官重量的影響(表1)CP組的胸腺指數(shù)較
5、正常對照組明顯降低(P<001),說明用CP免疫小鼠,使模型組的胸腺明顯萎縮,免疫功能下降,在給CP的同時給予9g/(kg·bg/g上升至982和767mg/g,明顯高于正常對照組(P<001),這可能與本次實驗建立的免疫缺陷模型的方式有關(guān)。 表2各實驗組小鼠的免疫指標(biāo)(略) 注:與正常對照組比較,aP<001;與CP組比較,bP<001 24對小鼠DTH反應(yīng)的影響CP+9g/(kg·bg/(kg·bg/(kg·bg/(kg·bw)35d后,血清溶血素、DTH、碳粒廓清指數(shù)、胸腺指數(shù)較CP組都有明顯提高,其中DTH、碳粒廓清
6、指數(shù)α恢復(fù)至正常水平。這提示多汁乳菇對細(xì)胞免疫功能和非特異性免疫功能有較好的保護(hù)作用。血清溶血素水平多汁乳菇+CP組明顯高于CP組,但未恢復(fù)至正常水平。這可能是因為體液免疫功能對免疫損傷較敏感。體液免疫功能恢復(fù)需要具有分泌抗體能力B淋巴細(xì)胞的恢復(fù)才能體現(xiàn),這導(dǎo)致小鼠體液免疫系統(tǒng)免疫損傷的恢復(fù)時間較長。本次實驗結(jié)果表明,多汁乳菇具有明顯改善受損機(jī)體免疫功能的作用,但其具體的功效成分、作用強(qiáng)度及最佳生物學(xué)效應(yīng)還有待進(jìn)一步研究。【參考文獻(xiàn)】 〔1〕周慶珍,蘇維詞.貴州野生多汁乳菇營養(yǎng)成分分析[J].營養(yǎng)學(xué)報,2003,25(2):130-132. 〔2〕劉佳,高敏,向紅
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