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《益氣養(yǎng)陰方對小鼠肝癌血道轉移的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、益氣養(yǎng)陰方對小鼠肝癌血道轉移的影響 經(jīng)血道轉移是大多數(shù)惡性腫瘤轉移的重要途徑之一。臨床上中醫(yī)藥在改善腫瘤患者生存質量，延長帶瘤患者生存時間以及減少遠處轉移灶發(fā)生等方面具有獨特的優(yōu)勢，已成為腫瘤的手術、放療、化療、生物療法之外的另一重要治療大法，探索中醫(yī)藥在防治腫瘤轉移的作用受到越來越廣泛的重視。益氣養(yǎng)陰方在臨床抗腫瘤轉移治療中多有應用，但動物實驗對于益氣養(yǎng)陰方的抗腫瘤轉移研究目前尚無報道。為了進一步了解益氣養(yǎng)陰方抗腫瘤轉移的療效及作用機理，本實驗根據(jù)以往對益氣養(yǎng)陰方的抗腫瘤轉移的篩選工作結果，通過其對腹水型H22肝癌小鼠血道轉移的抑制作用進行了觀察研究?，F(xiàn)報
2、道如下?！ ?材料 1.1瘤株及動物小鼠腹水型H22肝癌瘤株，由山東省醫(yī)學科學院藥物所腫瘤室提供。昆明種小鼠30只，體質量(20±2)g，雌性，SPF級，由山東中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供（動物合格證號：SCXK魯20030004）?！ ?.2藥品益氣養(yǎng)陰方中藥由建聯(lián)中藥店提供，經(jīng)山東中醫(yī)藥大學中藥專家鑒定質量符合實驗要求。注射用環(huán)磷酰胺（cytoxan，CTX），規(guī)格：200mg/支，批號：031002，上海華聯(lián)制藥有限公司產(chǎn)品?！ ?方法 2.1轉移模型的建立選取接種7d的腹水瘤小鼠6只，各抽吸腹水1ml，放入無菌容器中混勻。D-Hanks液洗滌3次，臺
3、盼藍染色，計數(shù)腫瘤細胞存活率＞95％。參考文獻［1］調整細胞濃度為5×106cell·ml-1，每只小鼠尾靜脈注射細胞懸液0.2ml?！ ?.2分組與給藥實驗小鼠隨機分為3組，每組各10只，分別為：模型對照組（簡稱造模組）、益氣養(yǎng)陰方組（簡稱中藥組）、環(huán)磷酰胺對照組（簡稱西藥組）。造模組小鼠每天灌胃生理鹽水0.1ml/10g；常規(guī)方法制備益氣養(yǎng)陰方水煎液，濃縮至相當于原生藥材4.3g/ml藥液，冷卻裝入滅菌藥瓶，置4℃冰箱備用。按人鼠等效劑量換算給藥，中藥組小鼠分別每天灌胃中藥水煎液0.1ml/10g。西藥組給予臨床常用化療藥物環(huán)磷酰胺腹腔注射60mg/kg，
4、隔日1次。自造模之日起，連續(xù)給藥14d。脫頸椎處死小鼠，剝離肺臟，置于Bouin固定液，常規(guī)石蠟切片HE染色?！ ?.3觀察指標 2.3.1體重變化稱體質量，比較實驗前后體質量變化情況?！ ?.3.2免疫器官的影響取脾臟和胸腺稱重，計算脾指數(shù)及胸腺指數(shù)?！ ?.3.3肺轉移瘤生長情況剝離肺臟稱重，Bouin液固定24h觀察，以單盲法計數(shù)肺轉移瘤結節(jié)數(shù)，計算肺結節(jié)抑制率、肺轉移瘤生長指數(shù)和肺轉移瘤生長抑制率，光鏡下觀察瘤組織生長情況。 2.4統(tǒng)計學方法計量資料用±s表示，用單因素方差分析(one-wayANOVA)進行比較，等級資料比較用Kruskal-Wa
5、llis秩和檢驗，用SPSS14.0軟件進行統(tǒng)計分析，以P＜0.05作為差異有顯著性檢驗水準?！ ?結果 3.1體質量變化實驗后造模組和中藥組體質量有所增長，西藥組體質量明顯減輕；與造模組比西藥組體質量減輕顯著，P＜0.01；中藥組與西藥組比體質量增加有顯著性差異（P＜0.01）。結果見表1。表1益氣養(yǎng)陰方對肝癌血道轉移小鼠體質量影響的比較（略） 3.2免疫器官的影響中藥組脾重量、胸腺重量及指數(shù)較造模組明顯升高，P＜0.05；西藥組脾重量較造模組顯著降低，P＜0.05；中藥組脾和胸腺重量及脾指數(shù)較西藥組明顯增加（P＜0.01或P＜0.05）。結果見表2。表
6、2益氣養(yǎng)陰方對肝癌血道轉移小鼠免疫器官影響的比較（略） 3.3肺轉移瘤生長情況藥物組的肺重量、肺瘤結節(jié)數(shù)和肺轉移瘤生長指數(shù)較造模組均有下降，中藥組肺瘤結節(jié)數(shù)與造模組比減少有顯著性差異，P＜0.05；西藥組肺重量和肺瘤結節(jié)數(shù)較造模組減少顯著性差異，P＜0.05；中藥組與西藥組肺轉移情況比無顯著性差異（P＞0.05）。結果見表3。表3益氣養(yǎng)陰方對肝癌血道轉移小鼠肺轉移瘤生長影響的比較（略） 3.4肺轉移瘤的形態(tài)學觀察肺轉移瘤組織學檢查類型為轉移性H22肝癌瘤灶，肺轉移瘤形態(tài)學表現(xiàn)為：造模組肺組織可見廣泛的轉移灶，結節(jié)大小不一，多分布于肺邊緣、小血管周圍或支氣管
7、周圍，轉移結節(jié)包繞各級氣管，部分結節(jié)圍繞血管生長呈“袖口狀”，少數(shù)侵襲血管壁，甚至整個肺葉被瘤組織取代。中藥組肺組織可見轉移結節(jié)明顯減少，以小轉移灶為主，邊界清楚，圍繞血管生長或侵襲血管壁的現(xiàn)象較少，可見較多正常肺組織。西藥組肺組織轉移結節(jié)數(shù)量較造模組減少，大小不等，少數(shù)結節(jié)較大，多數(shù)結節(jié)邊界清楚，也有圍繞氣管和血管生長并侵襲血管壁的現(xiàn)象。此結果與小鼠肺表面轉移瘤結節(jié)數(shù)的結果相吻合。鏡下觀察肺轉移程度結果顯示：中藥組與西藥組肺轉移程度均較造模組下降。造模組肺轉移程度多為Ⅲ級，沒有Ⅰ級的出現(xiàn)；中藥組各級轉移均有出現(xiàn)，但多集中為Ⅱ級；西藥組多以Ⅱ級和Ⅲ級轉移為主（
8、肺內轉移瘤轉移程度分級方法參考文獻［2
