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1、超聲波提取木瓜葉總黃酮及其鑒別論文黃鎖義，劉?；?，黎海妮，唐玉蓮，張婧萱【關(guān)鍵詞】超聲波提??；,,木瓜葉；,,.freelg/ml，回收率為97.79%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過(guò)程，無(wú)任何污染，是提取木瓜葉黃酮類物質(zhì)的有效途徑。關(guān)鍵詞：超聲波提?。荒竟先~；總黃酮；鑒別ExtractionandIdentificationofTotalFlavanonefromPapayaLeavesbyUltrasonicethodsTheflavonoidspapayaleavesetrytoextractandc
2、hecktheflavanoneofpapayaleaves.ResultsThedensityofthetotalflavanoneofpapayaleavesg/mlandtherateofrecoveryethodisapurelyphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealpapayaleaves.Keyl95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾。濾渣再加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩5~7ml為止，放置100m
3、l容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。2.2測(cè)定方法依據(jù)以蘆丁為對(duì)照品測(cè)定木瓜葉中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時(shí)控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡(luò)合物，在可見(jiàn)光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰。2.3定量實(shí)驗(yàn)-總黃酮的含量測(cè)定2.3.1波長(zhǎng)的選擇取樣品液適量，在0.30ml5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經(jīng)硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420~700nm波長(zhǎng)范圍測(cè)定絡(luò)合物的吸光度，絡(luò)合物于510nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故測(cè)定時(shí)選用此波長(zhǎng)。2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密吸取蘆丁對(duì)照液（0.10mg/ml）
4、0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加10%硝酸鋁溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12min，以試劑作空白參比液，于510nm處測(cè)定吸光度，結(jié)果見(jiàn)表1。表1紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定蘆丁對(duì)照液吸光度（略）根據(jù)上表得回歸方程：A=-6.9671×103+8.4181C，r=0.99992.3.3提取物含量的測(cè)定精密吸取樣品液0.50
5、ml，置10.00ml容量瓶，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法測(cè)定其吸光度A=0.409，根據(jù)回歸方程：A=-6.9671×103+8.4181C，計(jì)算樣品中總黃酮的含量C=0.9880mg/ml。2.3.4回收實(shí)驗(yàn)精密量取樣品液1.00ml，加入標(biāo)準(zhǔn)蘆丁對(duì)照品1.00ml（0.10mg/ml），同前樣品測(cè)定方法操作測(cè)定吸光度，求出回收率為97.79%。2.4定性實(shí)驗(yàn)-總黃酮的鑒別2.4.1顏色反應(yīng)紫外光下呈色反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，在可見(jiàn)光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點(diǎn)。濃氨水反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，將濾
6、紙?jiān)诎彼戏窖?.5min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點(diǎn)。三氯化鋁反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加１％三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見(jiàn)光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點(diǎn)。乙酸鎂反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點(diǎn)。鹽酸鎂粉反應(yīng)：取乙醇提取液1ml于試管中加鎂粉，再加入濃鹽酸數(shù)滴（1次加入），在泡沫處呈紫紅色。2.4.2紙層析取樣品溶液10μl點(diǎn)在濾紙上。用正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5（體積比）為展開劑，上行展開5h，取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光
7、下，可見(jiàn)熒光斑點(diǎn)。3討論3.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)方法工藝簡(jiǎn)單，回收率為97.79%，利用本文所提供的超聲波提取、純化方法而得到的黃酮類物質(zhì)其純度較高。超聲波可以強(qiáng)化乙醇浸提法，達(dá)到省時(shí)、高效、節(jié)能的目的，此方法采用全物理過(guò)程，無(wú)任何污染，是一條理想的提取黃酮類物質(zhì)的途徑，具有廣闊的應(yīng)用前景。3.2黃酮類化合物是一大類天然產(chǎn)物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分。在自然界中最常見(jiàn)的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等［5］。天然來(lái)源的生物黃酮分子量小，能被
8、人體迅速吸收，能通過(guò)血腦屏障，能進(jìn)入脂肪組織，進(jìn)而體現(xiàn)出如下功能：消除疲勞、保護(hù)血管、防動(dòng)脈硬化、擴(kuò)張毛細(xì)血管、疏通微循環(huán)、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大腦及其他臟器細(xì)胞的功能。黃酮類化合物具有抗癌、抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、治療骨質(zhì)疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗輻射等作用［6~10］。近年來(lái)，世界上掀
