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《氟美松對(duì)急性肝損傷大鼠肝細(xì)胞fasfas配體表達(dá)和細(xì)胞凋亡的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、氟美松對(duì)急性肝損傷大鼠肝細(xì)胞FasFas配體表達(dá)和細(xì)胞凋亡的影響作者：周高速?gòu)堈駮醴擦譂h軍朱潔【關(guān)鍵詞】氟美松 EffectsofdexamethasoneonFas/Fasligandexpressionandapoptosisofhepatocytesinratsentbydexamethasoneandtoevaluatethepotentialroleandmechanisminthepathogenesisofacuteliverinjury.METHODS:ExpressionofFas/FasLp
2、rotEinandmRNAmunohistochemistryandinsituhybridization,respectively.ApoptosisinedbyterminalUTPnickendlabelling(TUNEL)inratsduringeveryphaseofacuteliverinjury.RESULTS:ExpressionofFas/FasLprotEInandmRNAinistrationofdexamethasonesuppressedapoptosisasRNA(P<0.05)
3、.CONCLUSION:DysregulationofapoptosisandactivationofFas/FasLsystemmayplayakeyroleinthepathogenesisofLPSinducedacuteliverinjuryinrats,ethasonemayobstructtheactivationofFas/FasLsystemandapoptosisofhepatocytesinratsage. 【Keyethasone;LPS;liverinjury;Fas/FasL;apopt
4、osis 【摘要】目的:觀察內(nèi)毒素急性肝損傷后肝細(xì)胞凋亡和Fas/Fas配體（FasL）表達(dá)的變化，以及氟美松對(duì)其影響，探討急性肝損傷早期作用機(jī)制.方法:采用免疫組化和原位雜交技術(shù)檢測(cè)各時(shí)相點(diǎn)肝細(xì)胞Fas/FasL蛋白和mRNA的表達(dá)；應(yīng)用原位末端標(biāo)記技術(shù)對(duì)各時(shí)相點(diǎn)肝細(xì)胞凋亡進(jìn)行檢測(cè).結(jié)果:內(nèi)毒素急性肝損傷各時(shí)相點(diǎn)大鼠肝細(xì)胞Fas/FasL蛋白和mRNA的表達(dá)較對(duì)照組明顯上調(diào)（P<0.05），且與肝細(xì)胞凋亡的增加相一致；氟美松可明顯減輕炎癥反應(yīng)，抑制脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡，并使肝細(xì)胞Fas/Fas
5、L蛋白和mRNA的表達(dá)明顯下調(diào)（P<0.05）.結(jié)論:肝細(xì)胞凋亡和Fas/FasL系統(tǒng)活化可能參與內(nèi)毒素急性肝損傷早期的發(fā)病機(jī)制，而且加重早期肝損傷；氟美松可抑制Fas/FasL系統(tǒng)活化，阻斷和調(diào)控凋亡，從而減輕肝組織損傷. 【關(guān)鍵詞】氟美松；內(nèi)毒素；肝損傷；Fas/Fas配體；凋亡 0引言 急性肝損傷常與膿毒癥和感染相關(guān)，內(nèi)毒素急性肝損傷模型是模擬感染性肝損傷病因的一種模型，臨床上較常見(jiàn)，內(nèi)毒素的主要毒性成分是脂多糖（lipopolysaccharide,LPS），內(nèi)毒素結(jié)合蛋白即脂多糖結(jié)合蛋白主要由
6、肝細(xì)胞合成并分泌，LPS可通過(guò)直接和間接效應(yīng)導(dǎo)致肝臟和全身臟器的損傷［1-3］.我們通過(guò)觀察氟美松對(duì)內(nèi)毒素急性肝損傷大鼠肝細(xì)胞Fas/Fas配體（Fas/Fasligand,FasL）表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響，探討其在全身炎癥反應(yīng)及急性肝損傷中的作用機(jī)制及意義. 1材料和方法 1.1材料雄性公司試劑盒提供方法稍加改進(jìn).免疫組化Fas/FasL檢測(cè)采用SP法，兔抗Fas多克隆抗體，兔抗FasL多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)SantaCruzBiotechnology公司.Fas/FasLmRNA原位雜交檢測(cè)：Fas/FasL寡核
7、苷酸探針由中國(guó)科學(xué)院上海生物工程研究中心合成，序列如下：Fas5′CTGTTTCAGGATTTAAGGTTGGAGATT3′,FasL5′CTTCACTCCAGAAAGCAGGAC3′，按試劑盒提供方法進(jìn)行標(biāo)記，標(biāo)記后探針質(zhì)量及特異性按BM公司提供方法進(jìn)行檢測(cè)，均符合要求.結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：①肝細(xì)胞凋亡：陽(yáng)性細(xì)胞為核呈棕黃色顯色，陰性細(xì)胞為核無(wú)棕黃色顯色，計(jì)算5個(gè)高倍視野（×400）下的凋亡的細(xì)胞數(shù)，凋亡指數(shù)以凋亡細(xì)胞/100個(gè)細(xì)胞表示;②Fas/FasL蛋白質(zhì)表達(dá)判斷：陰性細(xì)胞的胞質(zhì)或(和)胞膜均無(wú)棕黃色染色，陽(yáng)性細(xì)
8、胞的胞質(zhì)或(和)胞膜棕黃色染色，陽(yáng)性程度分為4級(jí)：0級(jí)為低倍鏡視野陽(yáng)性細(xì)胞偶見(jiàn)，1級(jí)為陽(yáng)性細(xì)胞小于1/3，2級(jí)為陽(yáng)性細(xì)胞為1/3~2/3，3級(jí)為陽(yáng)性細(xì)胞大于2/3；③Fas/FasLmRNA原位雜交結(jié)果判斷；陽(yáng)性細(xì)胞的胞質(zhì)或胞核呈紫藍(lán)色染色，陰性細(xì)胞無(wú)紫藍(lán)色染色，分級(jí)程度同②. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：凋亡指數(shù)以x±s表示，組內(nèi)各時(shí)相點(diǎn)比較用t檢驗(yàn)，同一時(shí)相點(diǎn)組間比較
