hbeag和p53突變在肝癌發(fā)生中的作用

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1、HBeAg和P53突變在肝癌發(fā)生中的作用【摘要】目的：探討血清HBeAg和肝癌組織中P53突變的關(guān)系及其在肝癌發(fā)生中的作用.方法：應(yīng)用ELISA法檢測血清HBeAg，PCR結(jié)合直接測序檢測P53突變.同時(shí)分析相關(guān)臨床病理因素.結(jié)果：在42例患者中HBeAg陽性者20例，占47.6%;P53突變25例，占59.5%;HBeAg陽性同時(shí)伴有P53突變者16例.HBeAg的表達(dá)情況與腫瘤數(shù)目（P=0.002）、分化程度（P=0.025）、復(fù)發(fā)（P=0.026）有關(guān);P53突變與腫瘤數(shù)目（P=0.013）、包膜（P=0.04

2、6）、分化程度（P=0.013）、復(fù)發(fā)（P=0.003）有關(guān);HBeAg陽性與P53突變有關(guān)（P=0.024）.HBeAg陽性及P53突變患者的術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間較短（4.6±2.1）mo（P<0.001）.結(jié)論：HBeAg陽性和P53突變在肝癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，常提示預(yù)后較差.【關(guān)鍵詞】肝炎e抗原,2型；基因,P53；癌,肝細(xì)胞；預(yù)后　　【Abstract】AIM:TostudytherolesoftheserumHBeAgandtheP53mutationinthedevelopmentofhepatoce

3、llularcarcinoma(HCC).METHODS:ELISAHBeAgandPCRanddirectsequencingmethodutation.TheclinicopathologiccharacteristicsHBeAgpositive,and25cases(59.5%)hadP53mutation.Amongthem,16casesorcount（P=0.002）,degreeofthetumordifferentiation（P=0.025）andrecurrence（P=0.026）.P53mu

4、tationorcount（P=0.013）,capsule（P=0.046）,degreeofthetumordifferentiation（P=0.013）andrecurrence（P=0.003）.ThereHBeAgpositivityandP53mutation（P=0.024）.Therecurrencetimeutation［(4.56±2.13)months,P<0.001］.CONCLUTION:SerumHBeAgandP53mutationplayimportantrolesinthed

5、evelopmentofHCC,andtheyimplyapoorprognosis.　　【Keya,hepatocellular;prognosis　　0引言　　根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)與乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染密切相關(guān).慢性HBV感染者中HCC發(fā)生的高危性比非HBV感染人群高約200倍［1］.我國HCC主要發(fā)生在慢性HBV感染者，HBV感染可從無癥狀病毒攜帶發(fā)展為急性肝炎、慢性肝炎、重癥肝炎、肝硬化、HCC，其臨床結(jié)局

6、與HBV在體內(nèi)演變的情況和機(jī)體的免疫應(yīng)答有關(guān)［1］，鑒定體內(nèi)HBV的感染狀況對揭示HCC的發(fā)病機(jī)制有積極意義.近來發(fā)現(xiàn)HBeAg與HCC的復(fù)發(fā)和預(yù)后相關(guān)，是一個(gè)值得深入研究的指標(biāo).為了解HBVHBeAg在HCC發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制，我們檢測血清HBeAg和HCC中P53突變，并探討相關(guān)的臨床病理因素.　　1材料和方法　　1.1材料　　2004/2007HBsAg陽性HCC患者42(男38，女4)例，年齡31~72歲.挑取手術(shù)切除腫瘤組織適量立即置入液氮，其余組織送病理檢查.腫瘤組織均經(jīng)病理證實(shí).腫瘤組織放置-80℃冰

7、箱備用.同時(shí)于患者術(shù)前1L離心后取血清1.5mL用eppendorf管于-80℃冰箱保存.　　1.2方法　　取-80℃冰箱保存的癌組織標(biāo)本約0.03g，勻漿成細(xì)胞懸液，然后按照TIANampGenomicDNAKit（北京天根公司提供）的說明書提取DNA.樣品儲(chǔ)存于-20℃.HBeAg檢測采用ELISA方法，由廈門新創(chuàng)公司提供試劑盒，按說明書操作及判斷結(jié)果.設(shè)計(jì)引物檢測P53基因第7外顯子249位點(diǎn).上游引物為：5′TCCTAGGTTGGCTCTGAC3′，下游引物為：5′CAAGTGGCTCCTGACCTG

8、3′，全長131bp.由上海生工協(xié)助合成.按照MasterMix(北京天根公司提供)說明書行PCR反應(yīng).反應(yīng)條件為：94℃5min；94℃45s，55℃30s，72℃45s,35個(gè)循環(huán)；72℃5min.產(chǎn)物送上海生工協(xié)助完成純化和測序，測序引物同PCR引物.　　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理.對計(jì)量資料用t檢驗(yàn)，對計(jì)數(shù)資料用χ